JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

Abstract

Biology

Opnåelse af kryosektioner af høj kvalitet af hele kaninøjet

Published: November 10th, 2023

DOI:

10.3791/66115

1Keck School of Medicine, University of Southern California, 2The Vision Center, Department of Surgery, Children’s Hospital Los Angeles, 3The Saban Research Institute, Children’s Hospital Los Angeles, 4USC Roski Eye Institute, Department of Ophthalmology, Keck School of Medicine, University of Southern California, 5Eli and Edythe Broad CIRM Center for Regenerative Medicine and Stem Cell Research, University of Southern California, 6Tina and Rick Caruso Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery, University of Southern California

Abstract

Denne protokol beskriver, hvordan man opnår nethindekryosektioner af høj kvalitet hos større dyr, såsom kaniner. Efter enukleation nedsænkes øjet kortvarigt i fikseringsmidlet. Derefter fjernes hornhinden og iris, og øjet efterlades natten over for yderligere fiksering ved 4 °C. Efter fiksering fjernes linsen. Øjet placeres derefter i en kryomold og fyldes med et indlejringsmedium. Ved at fjerne linsen har indlejringsmediet bedre adgang til glaslegemet og fører til bedre nethindestabilitet. Det er vigtigt, at øjet inkuberes i indlejringsmedium natten over for at tillade fuldstændig infiltration i hele glaslegemet. Efter inkubation natten over fryses øjet på tøris og snittes. Hele nethindesektioner kan fås til brug i immunhistokemi. Standardfarvningsprotokoller kan bruges til at studere lokaliseringen af antigener i nethindevævet. Overholdelse af denne protokol resulterer i nethindekryosektioner af høj kvalitet, som kan bruges i ethvert eksperiment, der anvender immunhistokemi.

Explore More Videos

Biologi

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved