A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Abstract
Biology
Denne protokol beskriver, hvordan man opnår nethindekryosektioner af høj kvalitet hos større dyr, såsom kaniner. Efter enukleation nedsænkes øjet kortvarigt i fikseringsmidlet. Derefter fjernes hornhinden og iris, og øjet efterlades natten over for yderligere fiksering ved 4 °C. Efter fiksering fjernes linsen. Øjet placeres derefter i en kryomold og fyldes med et indlejringsmedium. Ved at fjerne linsen har indlejringsmediet bedre adgang til glaslegemet og fører til bedre nethindestabilitet. Det er vigtigt, at øjet inkuberes i indlejringsmedium natten over for at tillade fuldstændig infiltration i hele glaslegemet. Efter inkubation natten over fryses øjet på tøris og snittes. Hele nethindesektioner kan fås til brug i immunhistokemi. Standardfarvningsprotokoller kan bruges til at studere lokaliseringen af antigener i nethindevævet. Overholdelse af denne protokol resulterer i nethindekryosektioner af høj kvalitet, som kan bruges i ethvert eksperiment, der anvender immunhistokemi.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved