ウサギの眼全体の高品質な凍結切片の取得

このプロトコルは、ウサギなどの大型動物で高品質の網膜凍結切片を取得する方法を説明しています。除核後、眼を固定剤に短時間浸します。次に、角膜と虹彩を切除し、眼球を一晩放置して4°Cでさらに固定します。 固定後、レンズを取り外します。次に、眼球をクライオモールドに入れ、埋め込み培地で満たします。レンズを取り外すことにより、埋め込み媒体は硝子体へのアクセスを改善し、網膜の安定性を向上させます。重要なことに、眼は硝子体全体に完全に浸透できるように、埋め込み培地で一晩インキュベートする必要があります。一晩のインキュベーション後、眼をドライアイスで凍結し、切片化します。全網膜切片は、免疫組織化学で使用するために得ることができる。標準的な染色プロトコルは、網膜組織内の抗原の局在を研究するために利用できます。このプロトコルを順守することで、免疫組織化学を利用するあらゆる実験で使用できる高品質の網膜凍結切片が得られます。