Oppnå kryoseksjoner av høy kvalitet av hele kaninøye

Denne protokollen beskriver hvordan man oppnår høykvalitets retinale kryoseksjoner hos større dyr, for eksempel kaniner. Etter enukleering er øyet kort nedsenket i fikseringsmidlet. Deretter fjernes hornhinnen og iris og øyet blir stående over natten for ytterligere fiksering ved 4 °C. Etter fiksering fjernes linsen. Øyet plasseres deretter i en kryomold og fylles med et innstøpingsmedium. Ved å fjerne linsen har innstøpingsmediet bedre tilgang til glasslegemet og fører til bedre netthinnestabilitet. Det er viktig at øyet inkuberes i innstøpingsmedium over natten for å tillate fullstendig infiltrasjon i hele glasslegemet. Etter inkubasjon over natten fryses øyet på tørris og snittes. Hele netthinnesnitt kan fås for bruk i immunhistokjemi. Standard fargingsprotokoller kan brukes til å studere lokaliseringen av antigener i netthinnevevet. Overholdelse av denne protokollen resulterer i høykvalitets retinale kryoseksjoner som kan brukes i ethvert eksperiment som bruker immunhistokjemi.