Erhållande av högkvalitativa kryosektioner av hela kaninögat

Detta protokoll beskriver hur man erhåller retinal kryosektion av hög kvalitet hos större djur, såsom kaniner. Efter enukleation är ögat kortvarigt nedsänkt i fixativet. Därefter avlägsnas hornhinnan och iris och ögat lämnas över natten för ytterligare fixering vid 4 °C. Efter fixering tas linsen bort. Ögat placeras sedan i en kryomold och fylls med ett inbäddningsmedium. Genom att ta bort linsen får inbäddningsmediet bättre tillgång till glaskroppen och leder till bättre näthinnestabilitet. Det är viktigt att ögat inkuberas i inbäddningsmedium över natten för att möjliggöra fullständig infiltration i hela glaskroppen. Efter inkubation över natten fryses ögat ner på torris och snittas. Hela näthinnesnitt kan erhållas för användning inom immunhistokemi. Standardfärgningsprotokoll kan användas för att studera lokaliseringen av antigener i näthinnans vävnad. Att följa detta protokoll resulterar i högkvalitativa retinala kryosektioner som kan användas i alla experiment som använder immunhistokemi.