Multiplex syklisk fluorescerende immunhistokjemi

Tumormikromiljøet involverer interaksjoner mellom vertsceller, tumorceller, immunceller, stromale celler og vaskulatur. Karakterisering og romlig organisering av immuncelleundergrupper og målproteiner er avgjørende for prognostiske og terapeutiske formål. Dette har ført til utviklingen av multipleksede immunhistokjemiske fargemetoder. Multiplex fluorescens immunhistokjemi tillater samtidig deteksjon av flere markører, noe som letter en omfattende forståelse av cellefunksjon og intercellulære interaksjoner. I denne artikkelen beskriver vi en arbeidsflyt for multiplex syklisk fluorescerende immunhistokjemianalyse og dens anvendelse i kvantifiseringsanalysen av lymfocyttundergrupper. Multiplex syklisk fluorescerende immunhistokjemifarging følger lignende trinn og reagenser som standard immunhistokjemi, som involverer antigengjenfinning, syklisk antistoffinkubasjon og farging på et formalinfast parafininnebygd (FFPE) vevslysbilde. Under antigen-antistoffreaksjonen fremstilles en blanding av antistoffer fra forskjellige arter. Forhold, som antigeninnhentingstid og antistoffkonsentrasjon, optimaliseres og valideres for å øke signal-støy-forholdet. Denne teknikken er reproduserbar og fungerer som et verdifullt verktøy for immunterapiforskning og kliniske applikasjoner.