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  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • Representative Results
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

Il protocollo fornisce un processo di standardizzazione dettagliato della formula di decotto e della tecnica del gavage con il decotto Yiqi Jiedu nel modello murino di osteosarcoma come esempio. Descrive la protezione degli animali e migliora l'affidabilità dei dati della ricerca, fornendo strategie efficaci per studiare l'efficacia terapeutica e i meccanismi molecolari delle formule di decotto in vivo.

Abstract

La formula del decotto è la forma di dosaggio più comunemente usata nella medicina tradizionale cinese e applicata nella pratica clinica da migliaia di anni mediante somministrazione transorale, che è caratterizzata da un effetto rapido, un facile assorbimento e un trattamento individualizzato in base alle sindromi specifiche dei pazienti. La qualità della formula del decotto è direttamente responsabile dell'efficacia clinica della medicina tradizionale cinese; Pertanto, il processo di standardizzazione della formula del decotto è importante per evitare differenze nella qualità del decotto causate da fattori soggettivi. Nel frattempo, a causa dei limiti dell'esecuzione di esperimenti clinici, i piccoli animali portatori di malattie umane, come i topi, sono spesso utilizzati nella ricerca medica per esplorare l'efficacia terapeutica e i meccanismi completi di diversi interventi, inclusa la formula del decotto per la medicina tradizionale cinese. Di conseguenza, essendo un importante metodo di somministrazione transorale, la tecnica del gavage è particolarmente importante per evitare potenziali danni all'esofago e fuoriuscite di farmaci, che garantiranno la somministrazione di una quantità uguale di farmaco a ciascun animale modello, portando a risultati sperimentali accurati. Inoltre, il metodo standardizzato di preparazione della formula di decotto e la strategia di gavage qualificata sono necessari per proteggere il benessere degli animali e ridurre al minimo il numero di animali utilizzati. Qui, abbiamo riportato un processo di standardizzazione dettagliato della formula di decotto e della tecnica del gavage con il decotto Yiqi Jiedu nel modello murino di osteosarcoma come esempio. L'efficacia è stata valutata in base al volume del tumore. Questo protocollo massimizzerà la protezione degli animali e migliorerà l'affidabilità dei dati della ricerca, fornendo quindi strategie efficaci per studiare in futuro l'efficacia terapeutica e i meccanismi molecolari della formula di decotto per la medicina tradizionale cinese in vivo.

Introduction

La formula del decotto è la forma di dosaggio più comunemente usata della medicina tradizionale cinese e dei farmaci medicinali liquidi 1,2. La formula del decotto della medicina tradizionale cinese viene elaborata decondo le erbe in acqua dopo essere state messe a bagno, seguite da un filtraggio per scartare la feccia.

Poiché la formula del decotto può essere individualizzata in base alle necessità cliniche, soprattutto in linea con le caratteristiche del trattamento basato sull'evidenza nella medicina tradizionale cinese, questa forma di dosaggio tramite somministrazione ....

Protocol

Questo protocollo descrive la tecnica dettagliata del gavage nei topi modello di osteosarcoma utilizzando il decotto Yiqi Jiedu come campione. In questo esperimento sono stati utilizzati topi atimici maschi di quattro settimane (BALB/c nude) e tenuti nella sala di allevamento di grado SPF del Laboratory Animal Center dell'Università di Medicina Tradizionale Cinese di Shanghai. Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati approvati dall'Animal Management and Committee dell'Università di Medicina Tradizionale Cinese di.......

Representative Results

L'effetto inibitorio del decotto Yiqi Jiedu sulla crescita dell'osteosarcoma in vivo è stato determinato in un modello murino di osteosarcoma xenotrapianto intra-tibiale, che è stato preparato iniettando le cellule di osteosarcoma 143B nella tibia di topi atimici. Il decotto di Yiqi Jiedu è stato somministrato ai topi del gruppo di decotti di Yiqi Jiedu per via endovenosa per 28 giorni a partire dal secondo giorno dell'iniezione di 143B. La soluzione fisiologica è stata somministrata ai topi del gruppo di co.......

Discussion

L'efficacia clinica delle erbe prescritte nella medicina tradizionale cinese è in gran parte associata alla dose somministrata e alla forma di dosaggio; Pertanto, l'istituzione di una strategia di decotto standardizzata e di un processo di somministrazione qualificato sono necessari nella pratica clinica, nonché per migliorare l'affidabilità dei risultati sperimentali.

In questo studio, abbiamo prima fornito una strategia dettagliata per il decotto standardizzato di erbe cinesi utilizzate n.......

Acknowledgements

L'attuale lavoro è supportato da sovvenzioni della (1) National Nature Science Foundation (81973877 e 82174408), (2) National Key R&D Program of China (2020YFE0201600), (3) Progetto di costruzione del Shanghai Top Priority Research Center (2022ZZ01009), (4) Shanghai Collaborative Innovation Center of Industrial Transformation of Hospital TCM Preparation e (5) Progetti di ricerca nell'ambito del budget dell'Università di Medicina Tradizionale Cinese di Shanghai (2021LK047).

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
143B cell lineATCCCRL-8303osteosarcoma cell line
Anesthesia machineShenzhen RWD Life Technology Co.,LtdR500IPThe Equipment of Anesthesia mice
Automatic cell counterShanghai Simo Biological Technology Co., LtdIC1000Counting cells
BALB/c athymic miceShanghai SLAC Laboratory Animal Co, Ltd.MaleAnimal
Barbed skullcap herbShanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd.20230606Decoction-ready medicines 
Basement Membrane MatrixShanghai Uning BioscienceTechnology Co., Ltd356234, BD, Matrigelre-suspende cells
Centrifuge tube (15 mL)Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd430790, CorningCentrifuge the cells
Elbow gavage needle (12-gauge/ 55 mm)RWD Life Science Co., Ltd.C21014-12Component of gastric perfusion device
GauzeHaishi Hainuo Group Co., Ltd.LC45Decoction filter
GinsengShanghai Wanshicheng Pharmaceutical Co., Ltd.20220704-2Decoction-ready medicines 
Hedyotis diffusaShanghai Yanghetang Traditional Chinese Medicine Tablet Co., Ltd.2023071107Decoction-ready medicines 
isofluraneShenzhen RWD Life Technology Co., LtdVETEASYAnesthesia mice
Micro-volume syringeShanghai high pigeon industry and trade Co., Ltd0-50 μLInject precise cells into the tibia
Phosphate-buffered salineBeyotime BiotechnologyST447wash the human osteosarcoma cells
Rubber bandsShanghai Hengfei Biotechnology Co., Ltd.XPJFixing gauze on the measuring cup
Syringe (1 mL )Shanghai Mishawa Medical Industry Co., Ltd.SBM0040Component of gastric perfusion device
Trypsin (0.25%)Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd25200056, Gibcotrypsin treatment of cells

References

  1. Gao, S. Discussion on advantages and improvement of traditional Chinese medicine decoction. Chinese Community Physicians (Comprehensive Edition). (21), 12 (2005).
  2. Chinese Pharmacopoeia Commission. . Pharmacopoeia of the People's Republic of....

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