A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
В статье представлены методы культивирования личинок брюхоногих моллюсков Crepidula fornicata в малообъемной лабораторной системе и в системе мезокосма окружающей среды и морской воды, которые могут быть развернуты в полевых условиях.
Брюхоногий моллюск Crepidula fornicata широко используется для изучения биологии, физиологии и экологии развития личинок. Выводковые личинки велигера этого вида собирали путем сифона на сито после естественного выпуска взрослыми особями, распределяли по культуре в плотности 200/л и скармливали Isochrysis galbana (штамм T-ISO) в концентрации 1 x 105 клеток/мл. Рост скорлупы и приобретение способности к метаморфозу были задокументированы у личинок братьев и сестер, выращенных в вентилируемых культурах объемом 800 мл, предназначенных для уравновешивания с окружающим воздухом или определенными атмосферными газовыми смесями. В отличие от этих лабораторных условий культивирования; Данные о росте и компетентности также были собраны для личинок, выращенных в проточном мезокосме морской воды объемом 15 л, расположенном в полевой популяции репродуктивных взрослых особей. Темпы роста и сроки метаморфической компетентности в лабораторных культурах были аналогичны тем, о которых сообщалось в ранее опубликованных исследованиях. Личинки, выращенные в полевых условиях, росли гораздо быстрее и метаморфизировались раньше, чем сообщалось о каких-либо лабораторных исследованиях. В совокупности эти методы подходят для изучения развития личинок в заранее определенных контролируемых условиях в лаборатории, а также в естественных условиях в полевых условиях.
Тапочка, Crepidula fornicata (Gastropoda: Calyptraeidae), широко представлена в современной и исторической исследовательской литературе из-за ее полезности в качестве модели развития и из-за ее широкого воздействия в качестве инвазивного вида. Она послужила основополагающим примером спирального развития в классическую эпоху экспериментальной эмбриологии1 и пережила возрождение интереса с применением современных инструментов визуализации и геномики для анализа механизмов раннего развития лофотрохозоидов 2,3. С другой стороны, другие исследования были сосредоточены на воздействии....
1. Рутинные маневры по созданию и поддержанию личиночных культур C. fornicata
ПРИМЕЧАНИЕ: Этот метод начинается с галлона (3,8 л) банки морской воды, содержащей взрослых особей C. fornicata , которые только что выпустили выведенных личинок велигера. Взрослые особи мо?.......
Рост личинок и приобретение способности к метаморфозу измеряли в 4 одновременных репликациях культур объемом 800 мл, каждая из которых содержала 160 личинок, полученных из родственной партии личинок, которые вылупились из одной яичной массы и которых кормили Isochrysis galbana с плотностью 1 .......
Несмотря на то, что личинки C. fornicata относительно легко поддаются культивированию по сравнению с другими планктотрофными морскими личинками, внимание к основам надлежащей практики культивирования по-прежнему имеет важное значение17,19. Здоровые личи?.......
Первоначальная разработка системы вентиляции в небольших объемах была частично поддержана Национальным научным фондом (CRI-OA-1416690 для Колледжа Дикинсона). Д-р Лорен Муллино любезно предоставила лабораторные помещения в Океанографическом институте Вудс-Хоул, где были собраны данные, представленные для этой системы (рис. 4).
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
Bucket, Polyethylene, 7 gallon | US Plastic | 16916 | for mesocosm |
Crepidula fornicata | Marine Biological Laboratory, Marine Resources Center | 760 | adult broodstock |
Hotmelt glue, Infinity Supertac 500 | Hotmelt.com | INFINITY IM-SUPERTAC-500-12-1LB | good for bonding polyethylene |
Jar, glass, 32 oz, with polypropylene lid | Uline | S-19316P-W | for 800 mL ventilated cultures |
Nitex mesh, 236 µm | Dynamic Aqua Supply Ltd. | NTX236-136 | for mesocosm |
Nut, hex, nylon, 10-32 thread | Home Depot | 1004554441 | for fastening tubing barbs |
Rivets, nylon, blind, 15/64" diameter, 5/32"-5/16" grip range, pack of 8 | NAPA auto parts | BK 6652844 | 4 packs needed per mesocosm |
Tubing barb 1/8" x 10-32 thread | US Plastic | 65593 | 2 needed per culture jar |
Tubing, polyethylene, 2.08 mm OD | Fisher Scientific | 14-170-11G | for ventilating gas stream inside culture jar |
Tubing, Tygon, 1/8"x3/16"x1/32" | US Plastic | 57810 | fits barbs for ventilating cultures |
Explore More Articles
This article has been published
Video Coming Soon
ABOUT JoVE
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved