Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • Representative Results
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

В статье представлены методы культивирования личинок брюхоногих моллюсков Crepidula fornicata в малообъемной лабораторной системе и в системе мезокосма окружающей среды и морской воды, которые могут быть развернуты в полевых условиях.

Abstract

Брюхоногий моллюск Crepidula fornicata широко используется для изучения биологии, физиологии и экологии развития личинок. Выводковые личинки велигера этого вида собирали путем сифона на сито после естественного выпуска взрослыми особями, распределяли по культуре в плотности 200/л и скармливали Isochrysis galbana (штамм T-ISO) в концентрации 1 x 105 клеток/мл. Рост скорлупы и приобретение способности к метаморфозу были задокументированы у личинок братьев и сестер, выращенных в вентилируемых культурах объемом 800 мл, предназначенных для уравновешивания с окружающим воздухом или определенными атмосферными газовыми смесями. В отличие от этих лабораторных условий культивирования; Данные о росте и компетентности также были собраны для личинок, выращенных в проточном мезокосме морской воды объемом 15 л, расположенном в полевой популяции репродуктивных взрослых особей. Темпы роста и сроки метаморфической компетентности в лабораторных культурах были аналогичны тем, о которых сообщалось в ранее опубликованных исследованиях. Личинки, выращенные в полевых условиях, росли гораздо быстрее и метаморфизировались раньше, чем сообщалось о каких-либо лабораторных исследованиях. В совокупности эти методы подходят для изучения развития личинок в заранее определенных контролируемых условиях в лаборатории, а также в естественных условиях в полевых условиях.

Introduction

Тапочка, Crepidula fornicata (Gastropoda: Calyptraeidae), широко представлена в современной и исторической исследовательской литературе из-за ее полезности в качестве модели развития и из-за ее широкого воздействия в качестве инвазивного вида. Она послужила основополагающим примером спирального развития в классическую эпоху экспериментальной эмбриологии1 и пережила возрождение интереса с применением современных инструментов визуализации и геномики для анализа механизмов раннего развития лофотрохозоидов 2,3. С другой стороны, другие исследования были сосредоточены на воздействии....

Protocol

1. Рутинные маневры по созданию и поддержанию личиночных культур C. fornicata

ПРИМЕЧАНИЕ: Этот метод начинается с галлона (3,8 л) банки морской воды, содержащей взрослых особей C. fornicata , которые только что выпустили выведенных личинок велигера. Взрослые особи мо?.......

Representative Results

Рост личинок и приобретение способности к метаморфозу измеряли в 4 одновременных репликациях культур объемом 800 мл, каждая из которых содержала 160 личинок, полученных из родственной партии личинок, которые вылупились из одной яичной массы и которых кормили Isochrysis galbana с плотностью 1 .......

Discussion

Несмотря на то, что личинки C. fornicata относительно легко поддаются культивированию по сравнению с другими планктотрофными морскими личинками, внимание к основам надлежащей практики культивирования по-прежнему имеет важное значение17,19. Здоровые личи?.......

Acknowledgements

Первоначальная разработка системы вентиляции в небольших объемах была частично поддержана Национальным научным фондом (CRI-OA-1416690 для Колледжа Дикинсона). Д-р Лорен Муллино любезно предоставила лабораторные помещения в Океанографическом институте Вудс-Хоул, где были собраны данные, представленные для этой системы (рис. 4).

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Bucket, Polyethylene, 7 gallonUS Plastic16916for mesocosm
Crepidula fornicataMarine Biological Laboratory, Marine Resources Center760adult broodstock
Hotmelt glue, Infinity Supertac 500Hotmelt.comINFINITY IM-SUPERTAC-500-12-1LBgood for bonding polyethylene
Jar, glass, 32 oz, with polypropylene lidUlineS-19316P-Wfor 800 mL ventilated cultures
Nitex mesh, 236 µmDynamic Aqua Supply Ltd.NTX236-136for mesocosm
Nut, hex, nylon, 10-32 threadHome Depot1004554441for fastening tubing barbs
Rivets, nylon, blind, 15/64" diameter, 5/32"-5/16" grip range, pack of 8NAPA auto partsBK 66528444 packs needed per mesocosm
Tubing barb 1/8" x 10-32 threadUS Plastic655932 needed per culture jar
Tubing, polyethylene, 2.08 mm ODFisher Scientific14-170-11Gfor ventilating gas stream inside culture jar
Tubing, Tygon, 1/8"x3/16"x1/32"US Plastic57810fits barbs for ventilating cultures

References

  1. Conklin, E. G. The embryology of Crepidula: a contribution to the cell lineage and early development of some marine gastropods. Gasteropods. , (1897).
  2. Henry, J. J., Collin, R., Perry, K. J.

Explore More Articles

Crepidula fornicataIsochrysis galbana

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved