Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • Representative Results
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

В статье представлены методы культивирования личинок брюхоногих моллюсков Crepidula fornicata в малообъемной лабораторной системе и в системе мезокосма окружающей среды и морской воды, которые могут быть развернуты в полевых условиях.

Abstract

Брюхоногий моллюск Crepidula fornicata широко используется для изучения биологии, физиологии и экологии развития личинок. Выводковые личинки велигера этого вида собирали путем сифона на сито после естественного выпуска взрослыми особями, распределяли по культуре в плотности 200/л и скармливали Isochrysis galbana (штамм T-ISO) в концентрации 1 x 105 клеток/мл. Рост скорлупы и приобретение способности к метаморфозу были задокументированы у личинок братьев и сестер, выращенных в вентилируемых культурах объемом 800 мл, предназначенных для уравновешивания с окружающим воздухом или определенными атмосферными газовыми смесями. В отличие от этих лабораторных условий культивирования; Данные о росте и компетентности также были собраны для личинок, выращенных в проточном мезокосме морской воды объемом 15 л, расположенном в полевой популяции репродуктивных взрослых особей. Темпы роста и сроки метаморфической компетентности в лабораторных культурах были аналогичны тем, о которых сообщалось в ранее опубликованных исследованиях. Личинки, выращенные в полевых условиях, росли гораздо быстрее и метаморфизировались раньше, чем сообщалось о каких-либо лабораторных исследованиях. В совокупности эти методы подходят для изучения развития личинок в заранее определенных контролируемых условиях в лаборатории, а также в естественных условиях в полевых условиях.

Introduction

Тапочка, Crepidula fornicata (Gastropoda: Calyptraeidae), широко представлена в современной и исторической исследовательской литературе из-за ее полезности в качестве модели развития и из-за ее широкого воздействия в качестве инвазивного вида. Она послужила основополагающим примером спирального развития в классическую эпоху экспериментальной эмбриологии1 и пережила возрождение интереса с применением современных инструментов визуализации и геномики для анализа механизмов раннего развития лофотрохозоидов 2,3. С другой стороны, другие исследования были сосредоточены на воздействии....

Protocol

1. Рутинные маневры по созданию и поддержанию личиночных культур C. fornicata

ПРИМЕЧАНИЕ: Этот метод начинается с галлона (3,8 л) банки морской воды, содержащей взрослых особей C. fornicata , которые только что выпустили выведенных личинок велигера. Взрослые особи мо?.......

Representative Results

Рост личинок и приобретение способности к метаморфозу измеряли в 4 одновременных репликациях культур объемом 800 мл, каждая из которых содержала 160 личинок, полученных из родственной партии личинок, которые вылупились из одной яичной массы и которых кормили Isochrysis galbana с плотностью 1 .......

Discussion

Несмотря на то, что личинки C. fornicata относительно легко поддаются культивированию по сравнению с другими планктотрофными морскими личинками, внимание к основам надлежащей практики культивирования по-прежнему имеет важное значение17,19. Здоровые личи?.......

Disclosures

Нет никаких конфликтов интересов, о которых можно было бы сообщить.

Acknowledgements

Первоначальная разработка системы вентиляции в небольших объемах была частично поддержана Национальным научным фондом (CRI-OA-1416690 для Колледжа Дикинсона). Д-р Лорен Муллино любезно предоставила лабораторные помещения в Океанографическом институте Вудс-Хоул, где были собраны данные, представленные для этой системы (рис. 4).

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Bucket, Polyethylene, 7 gallonUS Plastic16916for mesocosm
Crepidula fornicataMarine Biological Laboratory, Marine Resources Center760adult broodstock
Hotmelt glue, Infinity Supertac 500Hotmelt.comINFINITY IM-SUPERTAC-500-12-1LBgood for bonding polyethylene
Jar, glass, 32 oz, with polypropylene lidUlineS-19316P-Wfor 800 mL ventilated cultures
Nitex mesh, 236 µmDynamic Aqua Supply Ltd.NTX236-136for mesocosm
Nut, hex, nylon, 10-32 threadHome Depot1004554441for fastening tubing barbs
Rivets, nylon, blind, 15/64" diameter, 5/32"-5/16" grip range, pack of 8NAPA auto partsBK 66528444 packs needed per mesocosm
Tubing barb 1/8" x 10-32 threadUS Plastic655932 needed per culture jar
Tubing, polyethylene, 2.08 mm ODFisher Scientific14-170-11Gfor ventilating gas stream inside culture jar
Tubing, Tygon, 1/8"x3/16"x1/32"US Plastic57810fits barbs for ventilating cultures

References

  1. Conklin, E. G. The embryology of Crepidula: a contribution to the cell lineage and early development of some marine gastropods. Gasteropods. , (1897).
  2. Henry, J. J., Collin, R., Perry, K. J.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

Crepidula fornicataIsochrysis galbana

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved