שחזור כלי דם בטכניקת השרוול בהשתלת כבד אורתוטופית בעכבר

Summary

פרוטוקול זה מספק מידע טכני לשחזור כלי דם באמצעות טכניקת השרוול בהשתלת כבד אורתוטופית בעכבר.

Abstract

השתלת כבד אורתוטופית בעכבר היא מתודולוגיה יעילה לחקר המנגנונים הבסיסיים של איסכמיה בכבד ופגיעה ברפרפוזיה. עם זאת, האתגרים הטכניים מציבים מחסום לשימוש במודל ניסיוני יקר ערך זה ולהעברת מיומנויות אלה לדור הבא. ההיבט המאתגר ביותר של הליך זה הוא שחזור כלי דם, כולל וריד הפורטל (PV), וריד נבוב נחות אינפרא-הפטי (IHIVC), ווריד נבוב נחות על-הכבד. השימוש באזיקים מפלסטיק, במקום בתפרים, מאפשר שחזור PV ו-IHIVC חלק יותר. כלי הדם משוחזרים על ידי הצמדת שרוול העשוי מצנתר תוך ורידי לקצה כלי ההשתלה והחדרת השרוול לכלי המקבל. שני ההיבטים המכריעים ביותר הם לדמיין כראוי את לומן הפנימי של הכלי והימנעות משימוש בכוח מוגזם. מטרתנו היא לספק סקירה טכנית של שחזורי כלי דם באמצעות טכניקת השרוול בניתוח מושתל. טיפים טכניים אלה לטכניקת השרוול צפויים לסייע למיקרוכירורגים להקל על שחזור כלי הדם ולקדם את מחקרם.

Introduction

השתלת כבד אורתוטופית בעכבר (MOLT) היא שיטה ניסיונית יעילה שדווחה לראשונה בשנת 1991¹. מודל ניסיוני זה, המשתמש בעכברים מהונדסים גנטית וריאגנטים מחקריים שונים, מילא תפקיד מרכזי בחקירת איסכמיה חמה וקרה ופציעות רפרפוזיה. עם זאת, המורכבות הטכנית הגבוהה של המודל עיכבה את פיתוח הרפואה הבסיסית להשתלת כבד². MOLT כולל שלושה שלבים עיקריים: (1) שליפת הכבד מהעכבר התורם, (2) ניתוח שולחן אחורי, ו-(3) השתלת הכבד במקבל. מבין ההליכים המושתלים הללו, אנסטומוזה וסקולרית מהווה את האתגר הגדול ביותר. בעוד שהאנסטומוזה של הווריד הנבוב התחתון העל-כבד מסתיימת בדרך כלל על ידי תפירה ידנית², ניתן לשחזר את הווריד הנבוב התחתון האי....

Protocol

פרוטוקול הניסוי אושר על ידי הוועדה לניסויים בבעלי חיים באוניברסיטת קיוטו. במחקר נעשה שימוש בעכברי C57BL/6, בני יותר מ-10 שבועות ובמשקל שבין 25 גרם ל-30 גרם, שהתקבלו ממקור מסחרי (ראו טבלת חומרים). כל בעלי החיים הורדמו עם 2.5% איזופלורן (בהתאם לפרוטוקולים שאושרו על ידי מוסדות), נשמרו בתנאים ספ.......

Discussion

לימוד שחזור כלי דם הוא ההיבט המאתגר ביותר בהשגת MOLT מוצלח. איכות השרוול משפיעה באופן משמעותי על קושי השחזור, בהתחשב בגודל הקטן של עכברים⁵. מאמר זה מספק פרוטוקול מפורט להכנת השרוול, חיבורו ושחזורו.

אמנם אין הבדלים משמעותיים מדיווחים קודמים לגבי הכנת השרוול וחיבור.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
16 G intravenous catheter	TERUMO	SR-FF2032	IHIVC cuff
20 G intravenous catheter	TERUMO	SR-FF1651	PV cuff
8-0 braid silk	Natsume Seisakusho	CR9-80B2	8-0 silk
Belzer UW Cold Storage Solution	Astellas		Organ preservation fluid
Bulldog clamp	B BRAUN	FB329R	Bulldog clamp
C57BL/6 mice	Oriental Bio Service
Isoflurane inhalation solution	Viatris		Anesthesic
Micro Blunted Tips 0.1 mm x 0.06 mm	F.S.T	11253-20	Straight microforceps
Micro Serrefine Clamp Applicator with Lock	F.S.T	18056-14	Vessel clip applicator
Micro Serrefines	F.S.T	18055-4	Vessel clip
No.11 Spare Blades	FEATHER Safety Razor	11	Blades
Ophthalmic scissor, round handle	B BRAUN	FD103R	Microscissor
Plastic rectangular-shaped container	Daiso		10 cm long, 15 cm wide and 6 cm high
SuperGrip Tips	F.S.T	00649-11	Curved microforceps
SZX7	Olympus	SZX7	Microscope