Ricostruzione vascolare con la tecnica della cuffia nel trapianto di fegato ortotopico di topo

Summary

Questo protocollo fornisce informazioni tecniche per la ricostruzione dei vasi utilizzando la tecnica della cuffia nel trapianto di fegato ortotopico di topo.

Abstract

Il trapianto ortotopico di fegato di topo è una metodologia efficace per studiare i meccanismi alla base dell'ischemia epatica e del danno da riperfusione. Tuttavia, le sfide tecniche rappresentano un ostacolo all'utilizzo di questo prezioso modello sperimentale e alla trasmissione di queste competenze alla generazione successiva. L'aspetto più impegnativo di questa procedura è la ricostruzione vascolare, compresa la vena porta (PV), la vena cava inferiore infraepatica (IHIVC) e la vena cava inferiore sopraepatica. L'uso di bracciali in plastica, piuttosto che di suture, consente una ricostruzione PV e IHIVC più agevole. I vasi vengono ricostruiti attaccando una cuffia costituita da un catetere endovenoso alla punta del vaso dell'innesto e interponendo la cuffia nel vaso ricevente. I due aspetti più cruciali sono la corretta visualizzazione del lume interno del vaso ed evitare l'uso di una forza eccessiva. Il nostro obiettivo è fornire una panoramica tecnica delle ricostruzioni vascolari utilizzando la tecnica della cuffia nella chirurgia del ricevente. Questi suggerimenti tecnici per la tecnica del bracciale dovrebbero aiutare i microchirurghi a facilitare la ricostruzione vascolare e far progredire la loro ricerca.

Introduction

Il trapianto di fegato ortotopico di topo (MOLT) è un metodo sperimentale efficace riportato per la prima volta nel 1991¹. Questo modello sperimentale, che utilizza topi geneticamente modificati e vari reagenti di ricerca, ha svolto un ruolo fondamentale nello studio delle lesioni da ischemia calda e fredda e da riperfusione. Tuttavia, l'elevata complessità tecnica del modello ha ostacolato lo sviluppo della medicina di base per il trapianto di fegato². La MOLT prevede tre fasi principali: (1) recupero del fegato dal topo donatore, (2) intervento chirurgico sul retro e (3) impianto del fegato nel ricevente. Tra queste pr....

Protocol

Il protocollo sperimentale è stato approvato dal Comitato per la sperimentazione animale dell'Università di Kyoto. Lo studio ha utilizzato topi C57BL/6, di età superiore a 10 settimane e di peso compreso tra 25 g e 30 g, ottenuti da una fonte commerciale (vedi Tabella dei materiali). Tutti gli animali sono stati anestetizzati con isoflurano al 2,5% (seguendo protocolli approvati istituzionalmente), mantenuti in specifiche condizioni prive di agenti patogeni e tutte le procedure sperimentali sono state.......

Discussion

L'apprendimento della ricostruzione vascolare è l'aspetto più impegnativo per ottenere una MUT di successo. La qualità del bracciale influenza in modo significativo la difficoltà della ricostruzione, date le piccole dimensioni dei topi⁵. Questo articolo fornisce un protocollo dettagliato per la preparazione, il fissaggio e la ricostruzione della cuffia.

Sebbene non ci siano grandi differenze rispetto ai rapporti precedenti per quanto riguarda la preparazione e la co.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
16 G intravenous catheter	TERUMO	SR-FF2032	IHIVC cuff
20 G intravenous catheter	TERUMO	SR-FF1651	PV cuff
8-0 braid silk	Natsume Seisakusho	CR9-80B2	8-0 silk
Belzer UW Cold Storage Solution	Astellas		Organ preservation fluid
Bulldog clamp	B BRAUN	FB329R	Bulldog clamp
C57BL/6 mice	Oriental Bio Service
Isoflurane inhalation solution	Viatris		Anesthesic
Micro Blunted Tips 0.1 mm x 0.06 mm	F.S.T	11253-20	Straight microforceps
Micro Serrefine Clamp Applicator with Lock	F.S.T	18056-14	Vessel clip applicator
Micro Serrefines	F.S.T	18055-4	Vessel clip
No.11 Spare Blades	FEATHER Safety Razor	11	Blades
Ophthalmic scissor, round handle	B BRAUN	FD103R	Microscissor
Plastic rectangular-shaped container	Daiso		10 cm long, 15 cm wide and 6 cm high
SuperGrip Tips	F.S.T	00649-11	Curved microforceps
SZX7	Olympus	SZX7	Microscope