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Abstract
Biology
अंडा परजीवी, ट्राइकोग्रामा एसपीपी, कृषि और जंगलों में विभिन्न लेपिडोप्टेरान कीटों के खिलाफ कुशल जैविक नियंत्रण एजेंटों के रूप में पहचाने जाते हैं। ट्राइकोग्रामा संतानों के अपरिपक्व चरण मेजबान अंडे के भीतर विकसित होते हैं, जो उल्लेखनीय कमी (वयस्क लंबाई में लगभग 0.5 मिमी) प्रदर्शित करते हैं। आरएनए-हस्तक्षेप (आरएनएआई) पद्धति कई जीवों में जीन कार्यों को स्पष्ट करने के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण के रूप में उभरी है। हालांकि, ट्राइकोग्रामा जैसी कुछ छोटी परजीवी प्रजातियों में आरएनएआई में हेरफेर करने से आम तौर पर महत्वपूर्ण चुनौतियां सामने आई हैं। इस अध्ययन में, हम ट्राइकोग्रामा डेनोलिमी में एक कुशल आरएनएआई विधि प्रस्तुत करते हैं। उल्लिखित प्रक्रिया में मेजबान अंडे से व्यक्तिगत टी. डेंड्रोलिमी नमूनों का अधिग्रहण और अलगाव, डबल-स्ट्रैंडेड आरएनए (डीएसआरएनए) का डिजाइन और संश्लेषण, इन विट्रो प्रत्यारोपण और टी. डेंड्रोलिमी प्यूपा की खेती, डीएसआरएनए का माइक्रो-इंजेक्शन, और आरटी-क्यूपीसीआर विश्लेषण के माध्यम से लक्ष्य जीन नॉकडाउन का बाद का मूल्यांकन शामिल है। यह अध्ययन टी. डेंड्रोलिमी में आरएनएआई प्रयोगों के संचालन के लिए एक व्यापक, नेत्रहीन विस्तृत प्रक्रिया प्रस्तुत करता है, जिससे शोधकर्ताओं को इस प्रजाति में जीन विनियमन की जांच करने में सक्षम बनाया जा सके। इसके अलावा, यह पद्धति मामूली समायोजन के साथ अन्य ट्राइकोग्रामा प्रजातियों में आरएनएआई अध्ययन या सूक्ष्म इंजेक्शन के लिए अनुकूल है, जो इसे अन्य एंडोपैरासिटिक प्रजातियों में आरएनएआई प्रयोगों के संचालन के लिए एक मूल्यवान संदर्भ प्रदान करती है।
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