FRET를 사용한 살아있는 세포의 고삼투압 스트레스에 대한 반응으로 본질적으로 무질서한 영역의 구조적 민감도 추정

내재적 무질서 영역(IDR)은 중요한 세포 과정에 관여하는 단백질 영역입니다. 스트레스 조건 동안 세포 환경의 물리화학적 특성이 변하여 IDR의 구조적 앙상블에 직접적인 영향을 미칩니다. IDR은 본질적으로 환경 섭동에 민감합니다. 세포의 물리화학적 특성이 IDR의 구조적 앙상블을 어떻게 조절하는지 연구하는 것은 IDR 기능의 환경적 제어를 이해하는 데 필수적입니다. 여기에서는 고삼투압 스트레스 조건에 반응하여 살아있는 맥주효모균 세포 에서 IDR의 구조적 민감도를 측정하는 단계별 방법을 설명합니다. 앙상블 형광 공명 에너지 전달(FRET)을 사용하여 삼투질이 있는 세포에 가해지는 고삼투압 스트레스가 점진적으로 증가하는 동안 IDR의 전체 치수가 어떻게 변하는지 추정합니다. 또한 형광 측정을 처리하고 다양한 IDR에 대한 구조적 감도를 비교하기 위한 스크립트를 제공합니다. 이 방법을 따름으로써 연구자들은 환경 변화에 따라 복잡한 세포 내 환경에서 IDR이 겪는 구조적 변화에 대한 귀중한 통찰력을 얻을 수 있습니다.