A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Abstract
Developmental Biology
Studiet av oocyternas utveckling har betydande konsekvenser inom utvecklingsbiologin. Zebrafisken (Danio rerio) har använts i stor utsträckning som modellorganism för att undersöka tidiga utvecklingsprocesser från oocyt till embryo. Hos zebrafiskar är oocyterna omgivna av ett enda lager av somatiska granulosaceller. Att separera granulosaceller från oocyter är dock en utmaning, eftersom det är avgörande för exakt analys att uppnå rena oocyter. Även om olika metoder har föreslagits för att isolera zebrafiskoocyter i olika utvecklingsstadier, är nuvarande tekniker otillräckliga när det gäller att helt avlägsna granulosaceller och därmed begränsa noggrannheten i genomanalyser som enbart fokuserar på oocyter. I denna studie utvecklade vi framgångsrikt en snabb och effektiv process för att isolera rena stadium I-oocyter i zebrafisk samtidigt som granulosacellkontaminering eliminerades. Denna teknik underlättar biokemisk och molekylär analys, särskilt för att utforska epigenetiska och genomstrukturaspekter som är specifika för oocyter. Noterbart är att metoden är användarvänlig, minimerar äggskador och ger en praktisk lösning för efterföljande forskning och analys.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved