A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Abstract
Immunology and Infection
Plateepitelet i spiserøret er direkte utsatt for miljøet, og står kontinuerlig overfor fremmede antigener, inkludert matantigener og mikrober. Å opprettholde integriteten til epitelbarrieren er avgjørende for å forhindre infeksjoner og unngå betennelse forårsaket av ufarlige matavledede antigener. Denne artikkelen gir forenklede protokoller for generering av humane spiserørsorganoider og luft-væske-grensesnittkulturer fra pasientbiopsier for å studere epitelrommet i spiserøret i sammenheng med vevshomeostase og sykdom. Disse protokollene har vært betydelige vitenskapelige milepæler det siste tiåret, og beskriver tredimensjonale organlignende strukturer fra pasientavledede primærceller, organoider og luft-væske-grensesnittkulturer. De gir muligheten til å undersøke funksjonen til spesifikke cytokiner, vekstfaktorer og signalveier i spiserørsepitelet innenfor et tredimensjonalt rammeverk samtidig som de fenotypiske og genetiske egenskapene til giveren opprettholdes. Organoider gir informasjon om vevsmikroarkitektur ved å vurdere transkriptomet og proteomet etter cytokinstimulering. I motsetning til dette tillater luft-væske-grensesnittkulturer vurdering av epitelbarrierens integritet gjennom transepitelmotstand (TEER) eller makromolekylfluksmålinger. Å kombinere disse organoidene og luft-væske-grensesnittkulturene er et kraftig verktøy for å fremme forskning på svekkede esophageal epitelbarrieretilstander.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved