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  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • Representative Results
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

A microdureza é uma propriedade mecânica e um parâmetro informativo para avaliar a fisiopatologia do tecido duro. Aqui, demonstramos um protocolo padronizado (preparação de amostras, polimento, superfície plana e locais de indentação) para análise de microdureza em dente e osso alveolar em modelos de doença bucal de roedores, ou seja, fluorose dentária e reabsorção óssea periodontal induzida por ligadura.

Abstract

A propriedade mecânica, microdureza, é avaliada no esmalte dentário, dentina e osso em modelos de doenças bucais, incluindo fluorose dentária e periodontite. A micro-CT (μCT) fornece informações de imagem 3D (volume e densidade mineral) e a microscopia eletrônica de varredura (MEV) produz imagens de microestrutura (prisma de esmalte e lacuna-canalicular óssea). Complementarmente à análise estrutural por μCT e MEV, a microdureza é um dos parâmetros informativos para avaliar como as mudanças estruturais alteram as propriedades mecânicas. Apesar de ser um parâmetro útil, os estudos sobre a microdureza do osso alveolar em doenças bucais são limitados. Até o momento, métodos divergentes de medição de microdureza foram relatados. Como os valores de microdureza variam dependendo da preparação da amostra (polimento e superfície plana) e dos locais de indentação, diversos protocolos podem causar discrepâncias entre os estudos. A padronização do protocolo de microdureza é essencial para uma avaliação consistente e precisa em modelos de doenças bucais. No presente estudo, demonstramos um protocolo padronizado para análise de microdureza em dente e osso alveolar. Os espécimes utilizados são os seguintes: para o modelo de fluorose dentária, os incisivos foram coletados de camundongos tratados com/sem água contendo flúor por 6 semanas; para o modelo de reabsorção óssea periodontal induzida por ligadura (L-PBR), ossos alveolares com reabsorção óssea periodontal foram coletados de camundongos ligados no molar superior. Com 2 semanas após a ligadura, a maxila foi coletada. A dureza Vickers foi analisada nesses corpos de prova de acordo com o protocolo padronizado. O protocolo fornece materiais e métodos detalhados para incorporação de resina, polimento em série e locais de indentação para incisivos e alveolares. Até onde sabemos, este é o primeiro protocolo de microdureza padronizado para avaliar as propriedades mecânicas do dente e do osso alveolar em modelos de doenças bucais de roedores.

Introduction

A dureza é uma das propriedades mecânicas (por exemplo, elasticidade, dureza, viscoelasticidade e comportamento de fratura) e é comumente usada para caracterizar a capacidade de resistir à deformação por compressão e fratura de uma área local de um material. O teste de dureza de indentação estática é o método mais utilizado, incluindo dureza Vickers e dureza Knoop1. O teste de dureza Vickers é implementado pressionando um penetrador de diamante na superfície sob uma carga de teste fixa. O penetrador é em forma de pirâmide, com uma base quadrada e um ângulo de 136° entre faces opostas. O comprimento de ambas as diagonais formadas na superfície d....

Protocol

Todos os procedimentos descritos neste protocolo foram realizados de acordo com as diretrizes e regulamentos para o uso de animais vertebrados aprovados pelo Comitê Institucional de Uso de Cuidados com Animais (IACUC) da Augusta University e da Nova Southeastern University, que é credenciado pela Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care International (AAALAC). Observe que o Dr. Suzuki foi contratado pela Universidade de Augusta, onde os experimentos de fluorose dentária de camundongos for.......

Representative Results

Modelo de fluorose dentária: A Figura 1 mostra imagens representativas de μCT de incisivos em camundongos controle e tratados com flúor. No controle (Figura 1B-D), a região cervical apresentou menor densidade mineral do esmalte (EMD) de 1,188 g/cm3 (Figura 1B) em comparação com a média (1,924 g/cm3) e ponta (1,819 g/cm3; Figura 1C,D

Discussion

A microdureza é realizada para avaliar as propriedades mecânicas de tecidos duros como dente e osso. Até o momento, métodos divergentes de medição de microdureza foram relatados. A maioria das informações de medição, especialmente as preparações de amostras e os locais de indentação, provavelmente são insuficientes. Este estudo teve como foco o protocolo de microdureza para esmalte e osso alveolar em modelos de fluorose dentária e doenças periodontais. Para obter resultados consistentes e precisos, as et.......

Acknowledgements

A pesquisa relatada nesta publicação foi apoiada pela JSPS KAKENHI JP21K09915 (MO) e pelo Instituto Nacional de Ciências Médicas Gerais; T34GM145509 (MM) e o Instituto Nacional de Pesquisa Odontológica e Craniofacial; R01DE025255 e R21DE032156 (XH); R01DE029709, R21DE028715 e R15DE027851 (TK); R01DE027648 e K02DE029531 (MS).

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Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Braided Silk Suture 6-0Teleflex
Canica Small Animal Surgery SystemKent Scientific Corporation SURGI 5001
CarbiMet PSA 120/P120Buehler30080120
CarbiMet PSA 60/P60Buehler36080060
CarbiMet PSA 600/P1200Buehler36080600
Castroviejo Micro Needle hilderF.S.T12060-01
Epofix cold setting embeding ResinElectron Microscopey ScienceCAT-1237
Fisherbrand 112xx Series Advanced Ultrasonic CleanerFisher BrandFB11201
Fluoride-free Rodent dietBio ServF1515 AIN-76A, 1/2" Pellets
in-vivo microCT Skyscan 1176Bruker
Isomet 1000 Precison sawBuehlerMA112180
Lapping film 0.3µmMaruto instrument co, LTD. Japan26-4203Alternative 
A3-0.3 SHT, 3M USA
Lapping film 1µmMaruto instrument co, LTD. Japan26-4206Alternative
A3-1 SHT, 3M USA
Lapping film 12µmMaruto instrument co, LTD. Japan26-4211Alternative
A3-12 SHT, 3M USA
Lapping film 3µmMaruto instrument co, LTD. Japan26-4204Alternative
A3-3 SHT, 3M USA
Lapping film 9µmMaruto instrument co, LTD. Japan26-4201Alternative
A3-9 SHT, 3M USA
Leica wild microscope LeicaLEIC M690
Metaserv 2000 Variable speed Grinder polisherBuehlerNo: 557-MG1-1160
MicroCut PSA 1200/P2500Buehler36081200
MicroCut PSA P4000Buehler36084000
Microhardness tester, ALPHA-MHT-1000Z PACE Technologies
SamplKups  1 inchBuehlerNo: 209178
Sodium FluorideFisher ScientificS299-100
West cott Stitch ScissorJEDMEDCat. #25-1180
ZooMed Repti Thern Undertank heater (U.T.H)Zoo Med Laboratories, Inc.RH-4

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