Medidas de microdureza no dente e no osso alveolar em modelos de doenças bucais de roedores

Summary

A microdureza é uma propriedade mecânica e um parâmetro informativo para avaliar a fisiopatologia do tecido duro. Aqui, demonstramos um protocolo padronizado (preparação de amostras, polimento, superfície plana e locais de indentação) para análise de microdureza em dente e osso alveolar em modelos de doença bucal de roedores, ou seja, fluorose dentária e reabsorção óssea periodontal induzida por ligadura.

Abstract

A propriedade mecânica, microdureza, é avaliada no esmalte dentário, dentina e osso em modelos de doenças bucais, incluindo fluorose dentária e periodontite. A micro-CT (μCT) fornece informações de imagem 3D (volume e densidade mineral) e a microscopia eletrônica de varredura (MEV) produz imagens de microestrutura (prisma de esmalte e lacuna-canalicular óssea). Complementarmente à análise estrutural por μCT e MEV, a microdureza é um dos parâmetros informativos para avaliar como as mudanças estruturais alteram as propriedades mecânicas. Apesar de ser um parâmetro útil, os estudos sobre a microdureza do osso alveolar em doenças bucais são limitados. Até o momento, métodos divergentes de medição de microdureza foram relatados. Como os valores de microdureza variam dependendo da preparação da amostra (polimento e superfície plana) e dos locais de indentação, diversos protocolos podem causar discrepâncias entre os estudos. A padronização do protocolo de microdureza é essencial para uma avaliação consistente e precisa em modelos de doenças bucais. No presente estudo, demonstramos um protocolo padronizado para análise de microdureza em dente e osso alveolar. Os espécimes utilizados são os seguintes: para o modelo de fluorose dentária, os incisivos foram coletados de camundongos tratados com/sem água contendo flúor por 6 semanas; para o modelo de reabsorção óssea periodontal induzida por ligadura (L-PBR), ossos alveolares com reabsorção óssea periodontal foram coletados de camundongos ligados no^2º molar superior. Com 2 semanas após a ligadura, a maxila foi coletada. A dureza Vickers foi analisada nesses corpos de prova de acordo com o protocolo padronizado. O protocolo fornece materiais e métodos detalhados para incorporação de resina, polimento em série e locais de indentação para incisivos e alveolares. Até onde sabemos, este é o primeiro protocolo de microdureza padronizado para avaliar as propriedades mecânicas do dente e do osso alveolar em modelos de doenças bucais de roedores.

Introduction

A dureza é uma das propriedades mecânicas (por exemplo, elasticidade, dureza, viscoelasticidade e comportamento de fratura) e é comumente usada para caracterizar a capacidade de resistir à deformação por compressão e fratura de uma área local de um material. O teste de dureza de indentação estática é o método mais utilizado, incluindo dureza Vickers e dureza Knoop¹. O teste de dureza Vickers é implementado pressionando um penetrador de diamante na superfície sob uma carga de teste fixa. O penetrador é em forma de pirâmide, com uma base quadrada e um ângulo de 136° entre faces opostas. O comprimento de ambas as diagonais formadas na superfície d....

Protocol

Todos os procedimentos descritos neste protocolo foram realizados de acordo com as diretrizes e regulamentos para o uso de animais vertebrados aprovados pelo Comitê Institucional de Uso de Cuidados com Animais (IACUC) da Augusta University e da Nova Southeastern University, que é credenciado pela Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care International (AAALAC). Observe que o Dr. Suzuki foi contratado pela Universidade de Augusta, onde os experimentos de fluorose dentária de camundongos for.......

Discussion

A microdureza é realizada para avaliar as propriedades mecânicas de tecidos duros como dente e osso. Até o momento, métodos divergentes de medição de microdureza foram relatados. A maioria das informações de medição, especialmente as preparações de amostras e os locais de indentação, provavelmente são insuficientes. Este estudo teve como foco o protocolo de microdureza para esmalte e osso alveolar em modelos de fluorose dentária e doenças periodontais. Para obter resultados consistentes e precisos, as et.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Braided Silk Suture 6-0	Teleflex
Canica Small Animal Surgery System	Kent Scientific Corporation	SURGI 5001
CarbiMet PSA 120/P120	Buehler	30080120
CarbiMet PSA 60/P60	Buehler	36080060
CarbiMet PSA 600/P1200	Buehler	36080600
Castroviejo Micro Needle hilder	F.S.T	12060-01
Epofix cold setting embeding Resin	Electron Microscopey Science	CAT-1237
Fisherbrand 112xx Series Advanced Ultrasonic Cleaner	Fisher Brand	FB11201
Fluoride-free Rodent diet	Bio Serv	F1515	AIN-76A, 1/2" Pellets
in-vivo microCT Skyscan 1176	Bruker
Isomet 1000 Precison saw	Buehler	MA112180
Lapping film 0.3µm	Maruto instrument co, LTD. Japan	26-4203	Alternative  A3-0.3 SHT, 3M USA
Lapping film 1µm	Maruto instrument co, LTD. Japan	26-4206	Alternative A3-1 SHT, 3M USA
Lapping film 12µm	Maruto instrument co, LTD. Japan	26-4211	Alternative A3-12 SHT, 3M USA
Lapping film 3µm	Maruto instrument co, LTD. Japan	26-4204	Alternative A3-3 SHT, 3M USA
Lapping film 9µm	Maruto instrument co, LTD. Japan	26-4201	Alternative A3-9 SHT, 3M USA
Leica wild microscope	Leica	LEIC M690
Metaserv 2000 Variable speed Grinder polisher	Buehler	No: 557-MG1-1160
MicroCut PSA 1200/P2500	Buehler	36081200
MicroCut PSA P4000	Buehler	36084000
Microhardness tester, ALPHA-MHT-1000Z	PACE Technologies
SamplKups  1 inch	Buehler	No: 209178
Sodium Fluoride	Fisher Scientific	S299-100
West cott Stitch Scissor	JEDMED	Cat. #25-1180
ZooMed Repti Thern Undertank heater (U.T.H)	Zoo Med Laboratories, Inc.	RH-4