Детектирование взаимодействия белка CD40 с умбеллифероном с помощью дифференциальной сканирующей флуоресценции

Исследование взаимодействий между различными молекулами является важнейшим аспектом понимания патогенеза заболевания и скрининга мишеней для лекарств. Умбеллиферон, активный ингредиент тибетской медицины Vicatia thibetica, проявляет иммуномодулирующее действие с неизвестным механизмом. Белок CD40 является ключевой мишенью в иммунном ответе. Таким образом, в данном исследовании используется принцип технологии дифференциальной сканирующей флуоресценции для анализа взаимодействий между белком CD40 и умбеллифероном с использованием флуоресцентных ферментных маркеров. Первоначально экспериментально была проверена стабильность белка флуоресцентного оранжевого красителя, и определен оптимальный коэффициент разбавления 1:500. Впоследствии было замечено, что значение температуры плавления (Tm) белка CD40 имеет тенденцию к снижению с увеличением концентрации. Интересно, что взаимодействие между белком CD40 и умбеллифероном повышает термическую стабильность белка CD40. Это исследование представляет собой первую попытку обнаружить связывающий потенциал низкомолекулярных соединений и белков с помощью флуоресцентных микропланшетов и флуоресцентных красителей. Метод характеризуется высокой чувствительностью и точностью, обещая достижения в области стабильности белка, структуры белка и белок-лигандных взаимодействий, что облегчает дальнейшие исследования и разведку.