A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Abstract
Medicine
Farklı moleküller arasındaki etkileşimlerin araştırılması, hastalık patogenezini anlamanın ve ilaç hedeflerinin taranmasının çok önemli bir yönüdür. Tibet tıbbı Vicatia thibetica'da aktif bir bileşen olan umbelliferon, bilinmeyen bir mekanizma ile immünomodülatör bir etki sergiler. CD40 proteini, bağışıklık tepkisinde önemli bir hedeftir. Bu nedenle, bu çalışma, floresan enzim belirteçleri kullanarak CD40 proteini ve umbelliferon arasındaki etkileşimleri analiz etmek için diferansiyel taramalı floresan teknolojisi ilkesini kullanmaktadır. Başlangıçta, protein floresan turuncu boyanın stabilitesi deneysel olarak doğrulandı ve 1:500'lük optimal seyreltme oranı belirlendi. Daha sonra, CD40 proteininin sıcaklıkta erime (Tm) değerinin, konsantrasyondaki bir artışla azalma eğiliminde olduğu gözlendi. İlginç bir şekilde, CD40 proteini ve umbelliferon arasındaki etkileşimin, CD40 proteininin termal stabilitesini arttırdığı bulundu. Bu çalışma, floresan mikroplakalar ve floresan boyalar kullanarak küçük moleküllü bileşiklerin ve proteinlerin bağlanma potansiyelini tespit etmeye yönelik ilk girişimi temsil etmektedir. Teknik, yüksek hassasiyet ve doğruluk, protein stabilitesi, protein yapısı ve protein-ligand etkileşimleri alanlarında umut verici ilerlemeler ile karakterize edilir, böylece daha fazla araştırma ve araştırmayı kolaylaştırır.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved