細菌の細胞骨格タンパク質を標的とする抗菌薬スクリーニングのプラットフォームとしての分裂酵母

FtsZやMreBなどの細菌の細胞骨格タンパク質は、細胞分裂や細胞形状の維持など、本質的な機能を果たしています。さらに、FtsZとMreBは、新規抗菌薬発見の重要な標的として浮上しています。これらの細胞骨格タンパク質のヌクレオチド結合と重合を標的とする化合物を同定するために、主にFtsZに焦点を当てたいくつかのアッセイが開発されています。さらに、アッセイの多くは手間がかかるか、費用がかかるため、これらのタンパク質が薬物の細胞標的であるかどうかを確認するには、多くの場合、複数の方法が必要です。最後に、真核細胞に対する薬物の毒性も問題を引き起こします。ここでは、細菌の細胞骨格を標的とする新しい分子を発見し、真核細胞に潜在的に毒性がある可能性のあるヒットを最小限に抑えるためのシングルステップの細胞ベースのアッセイについて説明します。分裂酵母は、顕微鏡法に基づくハイスループットスクリーニングに適しており、視覚的スクリーニングにより、FtsZまたはMreBの重合を変化させる分子を容易に同定できます。私たちのアッセイは、標準的な96ウェルプレートを利用し、分裂酵母などの真核細胞で重合する細菌の細胞骨格タンパク質の能力に依存しています。ここに記載されているプロトコルは分裂酵母用であり、 黄色ブドウ球菌 由来のFtsZおよび 大腸菌由来のMreBを利用していますが、真核生物の発現宿主でポリマーに容易に集合する他の細菌細胞骨格タンパク質に容易に適応できます。ここで説明する方法は、細菌の細胞骨格タンパク質を標的とする新規抗菌薬のさらなる発見を促進するのに役立つはずです。