Доклиническая модель сепсис-индуцированной миопатии с неприменением у мышей

Summary

Эта мышиная модель сочетает в себе септическое повреждение с отсутствием мышц задних конечностей, чтобы повторить прикованный к постели черту типичного пациента с сепсисом. Модель представляет собой значительный отход от предыдущих моделей для изучения мышечной дисфункции при сепсисе и является воспроизводимым подходом к рассмотрению терапевтических стратегий для лечения этого состояния.

Abstract

Сепсис является основной причиной смерти в больницах. Улучшение лечения приводит к увеличению числа выживших после сепсиса. Примерно у 75% выживших развивается мышечная слабость и атрофия, что увеличивает частоту повторных госпитализаций и смертности. Тем не менее, имеющиеся доклинические модели сепсиса не учитывают неиспользование скелетных мышц, что является ключевым компонентом развития миопатии, вызванной сепсисом. Наша цель в этом протоколе — предоставить пошаговое руководство для модели мыши, которое воспроизводит клинические условия, в которых находится прикованный к постели пациент с сепсисом. Для разработки этой модели были использованы самцы мышей C57Bl/6. Мышам проводили лигирование слепой кишки и пункцию (CLP) для индуцирования сепсиса. Через четыре дня после CLP мышей подвергали подвешиванию задних конечностей (HLS) в течение семи дней. Результаты сравнивали с симуляционными операциями и/или животными с нормальной способностью передвижения (НА). Мышцы были препарированы для механики мышц in vitro и морфологической оценки. Модель приводит к выраженной мышечной атрофии и слабости, аналогичному фенотипу, наблюдаемому у пациентов с сепсисом. Модель представляет собой платформу для тестирования потенциальных терапевтических стратегий для смягчения миопатии, вызванной сепсисом.

Introduction

Сепсис является опасным для жизни состоянием, вызванным гиперактивным иммунным ответом, который отрицательно влияет на множественные системы органов, что приводит к серьезной нагрузке на системы здравоохранения во всем мире¹. В последнее время госпитальная смертность, связанная с сепсисом, снизилась благодаря улучшению ведения в отделении интенсивной терапии (ОИТ) ^1,2. Тем не менее, примерно у 75% пациентов, переживших первичное септическое повреждение, развивается атрофия скелетных мышц (например, уменьшение площади поперечного сечения) и слабость (нап....

Protocol

Процедуры были рассмотрены и одобрены IACUC Университета Флориды (#202200000227). Для настоящего исследования были использованы самцы мышей C57BL/6J в возрасте 17 недель с массой тела от 27 г до 34 г. Экспериментальные процедуры и сроки, изложенные в этом протоколе, показаны на

Discussion

В действующем протоколе содержатся технические рекомендации по внедрению новой доклинической модели сепсис-индуцированной миопатии. Все материалы и важные этапы подробно описаны для воспроизведения модели. Этот подход может воспроизвести дисфункцию скелетных мыш.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
4-0 Ethicon Coated Vicryl	Ethicon	D5792	Absorbable suture used for closure of muscle layer and for ligation of the cecum.
4-0 Ethilon Black 18"	Ethicon	662G	Non absorbable suture for closure of the skin layer.
BD  PrecisionGlide Needle 26-28 G	BD	305136 for 27g needle	Needle for puncturing the cecum.
C57BL/6J mice	Jackson Laboratory	strain #000664
Cotton Tipped Applicators	Puritan	S-18991	Swabs for topical application of iodine.
Cryostat	(Leica CM1950)
Dynarex Povidone Iodine Prep Solution	Dynarex	1415	Topical Antiseptic Liquid for Skin and Mucosa
Ethanol 200 Proof (100%)	Fisher Scientific		To make 70% ethanol for cleaning skin.
Hindlimb Suspension Cages	Custom Made	N/A	These custom made cages will be highlighted in the video recordings of the MS.
Optixcare Eye Lube	Optixcare		Eye lube for protection during survival surgery.
Scalpel blades #11	Fine Science		Blade used to make incisions on skin and muscle.
Skin-Trac	Zimmer	736579	Foam tape for fixing the tail to the suspension apparatus.
SomnoSuite Low-Flow Digital Vaporizer	Kent Scientific Corporation	SS-01	Vaporizer for Isoflurane Anesthesia
Tissue bath apparatus	Aurora Scientific	Model 800A, Dual Mode Muscle Lever 300C