रीढ़ की हड्डी की चोट में सेल प्रत्यारोपण को मान्य करने के लिए एक मंच के रूप में दीर्घकालिक माउस रीढ़ की हड्डी ऑर्गेनोटाइपिक स्लाइस संस्कृति

जटिल पैथोफिज़ियोलॉजी के कारण रीढ़ की हड्डी की चोटों (एससीआई) के लिए दृढ़ इलाज अभी भी कमी है। सबसे आशाजनक पुनर्योजी दृष्टिकोणों में से एक खोए हुए ऊतक को बदलने और कार्यात्मक वसूली को बढ़ावा देने के लिए स्टेम सेल प्रत्यारोपण पर आधारित है। इस दृष्टिकोण को और अधिक महंगा और समय लेने वाली पशु परीक्षण के साथ आगे बढ़ने से पहले सुरक्षा और प्रभावकारिता के लिए इन विट्रो और पूर्व विवो में बेहतर पता लगाया जाना चाहिए। इस काम में, हम एससीआई के लिए सेलुलर प्रतिस्थापन चिकित्सा का परीक्षण करने के लिए मानव तंत्रिका स्टेम कोशिकाओं के साथ प्रत्यारोपित माउस रीढ़ की हड्डी (एससी) ऑर्गेनोटाइपिक स्लाइस के आधार पर एक दीर्घकालिक मंच की स्थापना दिखाते हैं।

मानक एससी ऑर्गेनोटाइपिक संस्कृतियों को इन विट्रो में लगभग 2 या 3 सप्ताह तक बनाए रखा जाता है। यहां, हम 90 दिनों तक दीर्घकालिक रखरखाव (≥30 दिन) के लिए एक अनुकूलित प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं। एससी स्लाइस के दीर्घकालिक संवर्धन के लिए उपयोग किए जाने वाले माध्यम को तंत्रिका स्टेम कोशिकाओं को ऑर्गेनोटाइपिक मॉडल में प्रत्यारोपित करने के लिए भी अनुकूलित किया गया था। मानव एससी-व्युत्पन्न न्यूरोपीथेलियल स्टेम (एच-एससी-एनईएस) कोशिकाओं को एक हरे फ्लोरोसेंट प्रोटीन (जीएफपी) रिपोर्टर ले जाने वाले माउस एससी स्लाइस में प्रत्यारोपित किया गया था। प्रत्यारोपण के तीस दिन बाद, कोशिकाएं अभी भी जीएफपी अभिव्यक्ति और कम एपोप्टोटिक दर दिखाती हैं, यह सुझाव देती हैं कि अनुकूलित वातावरण ने ऊतक के अंदर उनके अस्तित्व और एकीकरण को बनाए रखा। यह प्रोटोकॉल एससी ऊतक में सेल प्रतिस्थापन उपचारों का कुशलतापूर्वक परीक्षण करने के लिए एक मजबूत संदर्भ का प्रतिनिधित्व करता है। यह मंच शोधकर्ताओं को विभिन्न सेल प्रत्यारोपण उपचारों की पूर्व विवो प्री-स्क्रीनिंग करने की अनुमति देगा, जिससे उन्हें विवो प्रयोगों में आगे बढ़ने से पहले सबसे उपयुक्त रणनीति चुनने में मदद मिलेगी।