Модификация методов лечения синдрома истощающей мартышки транексамовой кислотой и поддерживающими мерами

Summary

В данной статье мы описываем модифицированные методы лечения синдрома истощающей мартышки (WMS, также известного как воспалительное заболевание кишечника (ВЗК)-подобное заболевание) транексамовой кислотой. Мы также расскажем, как вводить терапевтические средства перорально, подкожно и внутривенно.

Abstract

Синдром истощающих игрунок (WMS), серьезное заболевание в колониях обыкновенных игрунок (Callithrix jacchus), содержащихся в неволе, связан с высоким уровнем смертности. Конкретная причина WMS до сих пор неясна, и эффективных методов лечения мало. Ранее мы сообщали о терапии транексамовой кислотой с поддерживающими мерами как о полезном лечении WMS. В настоящем исследовании мы описываем модифицированный метод: комбинация 0,1 мл 5% транексамовой кислоты подкожно пять раз в неделю, 2,0 мл аминокислотного препарата внутривенно три раза в неделю, 5,0 мл лактата Рингера с 0,1 мл витаминного препарата подкожно три раза в неделю и пероральное введение 0,1 мл препарата железа пять раз в неделю. Мы также описываем, как вводить раствор внутривенно через подкожную вену с помощью удерживающего кончика животного, а также подробно описываем методы перорального и подкожного введения. Модифицированные методы имеют эффективность, сопоставимую с оригинальным методом лечения WMS.

Introduction

Синдром истощающих игрунок (WMS) — это серьезное заболевание, которое характерно только для колоний обыкновенных игрунок в неволе. Основными симптомами являются потеря веса, снижение мышечной массы, анемия, гипоальбуминемия и хронический энтерит 1,2,3,4. Некоторые исследования показали, что у 60,5% усыпленных в неволе мартышек были признаки хронического энтерита⁵, а 31-44% смертей были связаны с этой болезнью⁶. Высокая распространенность этого заболевания обусловила необходимость его эффективного лечения.

В 2016 году мы сообщили, что транексамовая кислота в сочетании с поддерживающими мерами является эффективным лечением WMS⁷. Кроме того, потеря белка в кишечнике у мартышек, пораженных WMS, была значительно ослаблена при этом лечении⁸. Хотя первоначальный протокол лечения был определенно эффективным, он включал в себя несколько большой объем внутривенных инъекций, высокую дозу витаминной формы и ежедневное сдерживание приема. Поскольку мартышки подвержены ручному захвату и удержанию, эти действия должны быть менее частыми. Таким образом, мы стремились снизить тяжелую нагрузку на животных с помощью некоторых модификаций.

В настоящей работе мы предложим модифицированные методы: подкожное введение неразбавленной транексамовой кислоты 5 раз в неделю (вместо внутрибрюшинного введения 5-кратно разведенного раствора транексамовой кислоты 7 раз в неделю), 2,0 мл аминокислотного препарата для внутривенного введения (вместо 3,0 мл), 0,1 мл витаминного препарата для подкожного введения (вместо 0,5 мл), и пероральный прием препарата железа 5 раз в неделю (вместо 7 раз в неделю).

Protocol

Настоящее исследование выполнено с одобрения (W2023-2-041) Комитета по экспериментам на животных RIKEN (Сайтама, Япония) и проведено в соответствии с Институциональными руководящими принципами для экспериментов с использованием животных. В настоящем исследовании использовались шесть самок мартышек (2-6 лет).

1. Критерии для начала лечения

1. Начинать лечение при соблюдении любого из следующих критериев: i) масса тела < 300 г или снижение массы тела на >20 г в месяц; ii) гипоальбуминемия (сывороточный альбумин < 3,8 г/дл); iii) анемия (гематокрит < 35%); iv) хроническая диарея без Clostridium difficile, энтеропатогенной кишечной палочки или кишечных простейших; и v) явное уменьшение мышечной массы.
   Примечание: Из-за обезвоживания и последующей гемоконцентрации, сопровождающейся WMS, значения сывороточного альбумина и гематокрита могут быть искусственно повышены у пораженных животных.

2. Пероральный прием

1. Смешайте 0,1 мл состава железа (см. Таблицу материалов) с кусочком бисквита.
2. Дайте мешанку обработанной мартышке.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Убедитесь, что обработанная мартышка полностью проглотила брагу.

3. Подкожное введение

1. Поймайте мартышку, пораженную WMS, в домашней клетке, осторожно придерживая ее за хвост.
2. Другой рукой возьмитесь за верхнюю часть туловища животного со спины.
3. Приведите животное в процедурный кабинет.
4. Пусть животное прильнет к груди или руке помощника.
5. Очистите область спины животного спиртовым тампоном.
6. Вводите 0,1 мл транексамовой кислоты (5% раствор, см. Таблицу материалов) в заднюю часть подкожно с помощью иглы 26 G 5 раз в неделю.
7. Вводите 5,0 мл лактата Рингера (см. Таблицу материалов) с 0,1 мл витаминной формулы (см. Таблицу материалов) подкожно с помощью иглы 26 G 3 раза в неделю.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Каждая инъекция должна быть сделана в каждое отдельное место в течение 1 минуты.

4. Внутривенное введение аминокислотного препарата

1. Поймайте мартышку, пораженную WMS, в домашней клетке, осторожно придерживая ее за хвост.
2. Другой рукой возьмитесь за верхнюю часть туловища животного со спины.
3. Приведите животное в процедурный кабинет.
4. Попросите помощника удерживать верхнюю часть тела животного, держа основание обеих рук, и удерживать нижнюю часть тела, удерживая основание обеих ног другой рукой. Попросите помощника поместить большой палец, удерживающий нижнюю часть тела животного, на переднюю сторону колена животного, чтобы оно не сгибалось.
5. Очистите теленка животного спиртовым тампоном.
6. Вводите 2,0 мл аминокислотного состава (см. Таблицу материалов) внутривенно через подкожную вену с помощью иглы-бабочки 27 г три раза в неделю.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Инъекцию необходимо делать как можно медленнее до 2 минут.
7. После укола попросите помощника прижать участок впитывающей ватой до упора кровотечения.

5. Измерение массы тела

1. После лечения (внутривенного и/или подкожного введения) раз в неделю взвешивайте животное с помощью переноски для контроля массы тела.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Взвешивайте мартышку примерно в одно и то же время, потому что вес тела зависит от наличия пищи.

6. Общий анализ крови (ОАК) и биохимический анализ сыворотки

1. Поймайте мартышку, пораженную WMS, в домашней клетке, осторожно придерживая ее за хвост.
2. Другой рукой возьмитесь за верхнюю часть туловища животного со спины.
3. Приведите животное в процедурный кабинет.
4. Попросите помощника удерживать верхнюю часть тела животного, держа основание обеих рук, и удерживать нижнюю часть тела, удерживая основание любой ноги другой рукой.
5. Попросите практикующего держать ногу животного так, чтобы она не была скована.
6. Очистите паховую область животного спиртовым тампоном.
7. Ежемесячно собирайте 0,4 мл крови из бедренной вены с помощью иглы 26 G.
8. Используйте 0,05 мл образца крови для анализа общего анализа крови, включая гематокрит.
9. Дайте остальная часть образца крови постоять в течение 1 часа при комнатной температуре и центрифугируйте при 1800 × г в течение 20 минут.
10. Используйте сыворотку для химических тестов, включая альбумин.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Объем образца крови может быть уменьшен путем минимизации количества параметров для биохимического теста сыворотки. Отрегулируйте объем образца крови в соответствии с индивидуальным состоянием мартышки.

Discussion

В 2016 году мы сообщили, что транексамовая кислота с поддерживающими мерами является эффективным лечением WMS, что стало первым отчетом, продемонстрировавшим терапию WMS без использования глюкокортикоидов. У человека глюкокортикоиды считаются наиболее эффективным средством для лечения ВЗК. Тем не менее, предонизолон, один из наиболее часто используемых глюкокортикоидов, не подходит для лечения WMS из-за его побочных эффектов. Несмотря на то, что сообщалось о применении будесонида, глюкокортикоида, для лечения WMS⁹, терапия была относительно неэффективной у животных с острыми формами WMS. Транексамовая кислота является ингибитором плазмина, который обладает противовоспалительным действием, и в наших оригинальных методах не наблюдалось заметных побочных эффектов. Однако, несмотря на то, что первоначальный протокол лечения был определенно эффективным, он налагал большую нагрузку на животных и опекунов.

В настоящем исследовании были проведены модифицированные методы лечения WMS для снижения как физиологической нагрузки животного, так и нагрузки на лиц, осуществляющих уход. При модифицированных методах путь введения транексамовой кислоты был изменен (с внутрибрюшинного на подкожный), что способствовало снижению риска травмирования органов брюшной полости. Раствор транексамовой кислоты не разбавляли в этом протоколе для снижения риска загрязнения и времени приготовления. В оригинальных методах 3,0 мл аминокислотного состава вводили внутривенно. Тем не менее, объем был несколько большим, поскольку рекомендуется вводить 5,0 мл/кг в виде болюса¹⁰. Поэтому при модифицированных методах объем уменьшали.

Витаминная форма, используемая в этом протоколе, содержит витамины группы В и С. В первоначальном методе 0,5 мл витаминной формулы содержит 2,5 мг гидрохлорида тиамина, что в 2,5 раза превышало потребность^{приматов,} содержащихся в лабораторных условиях после отъема. В настоящем способе вводили 0,1 мл витаминной композиции, которая содержит 1,0 мг тиамина хлорида гидрохлорида. Частота введения препарата железа и раствора транексамовой кислоты была снижена в модифицированных методах, что способствовало снижению нагрузки как на животных, так и на лиц, осуществляющих уход.

Как указано в разделе «Репрезентативные результаты», модифицированные методы показали значительные эффекты лечения. Средний срок лечения составил 37,8 ± 25,34 дня, что было меньше, чем у оригинальных методов (56 дней). Поскольку мартышки чувствительны к умственным нагрузкам, длительные процедуры оказывают на животное обратный эффект, например, снижают аппетит. Таким образом, мы рекомендуем лицам, осуществляющим уход, всесторонне принимать решение о сроках прекращения лечения, основываясь не только на значении каждого параметра, но и на поведении животного.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
1.0 mL Syringe	Terumo Corporation, Tokyo, Japan	SS-01T	For subcutaneously injection of Tranexamic acid
10 mL Syringe	Terumo Corporation, Tokyo, Japan	SS-10SZ	For Intravenous Administration of Amino acid formulation
26 G Needle	Terumo Corporation, Tokyo, Japan	NN-2613S	For subcutaneously injection
27 G Butterfly Needle Type D	Terumo Corporation, Tokyo, Japan	SV-27DL	For Intravenous Administration of Amino acid formulation
5 mL Syringe	Terumo Corporation, Tokyo, Japan	SS-05SZ	For subcutaneously injection of Ringer's lactate and Vitamin formulation
Aminoleban Injection	Otsuka Pharma Factory Inc., Tokyo, Japan	1942	For subcutaneously injection of Ringer's lactate and Vitamin formulation
C-PARA	Takata Pharma Co., Ltd., Saitama, Japan	120-31960-0	Vitamin formulation
FCV Liquid	Minerva Corporation, Saitama, Japan		Iron formulation
Lactec Injection	Otsuka Pharma Factory Inc., Tokyo, Japan	0714	Ringer’s lactate
Vasolamin Injection	Meiji Seika Pharma Co., Ltd., Tokyo, Japan	DBASOS	Tranexamic acid