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Abstract
Biology
细胞死亡是所有生物体的基本过程。该方案建立了脂多糖 (LPS) 和三磷酸腺苷 (ATP) 诱导的佛波醇-12-肉豆蔻酸酯-13-乙酸酯 (PMA) 分化的人单核细胞 (THP-1) 巨噬细胞中的脂质沉积模型,以观察细胞死亡。LPS联合ATP是一种经典的炎症诱导方法,常用于研究焦亡,但细胞凋亡和坏死性凋亡也对LPS/ATP的刺激有反应。在正常情况下,磷脂酰丝氨酸仅局限于质膜的内小叶中。然而,在细胞焦亡、凋亡和坏死性凋亡的早期阶段,细胞膜保持完整并暴露于磷脂酰丝氨酸,而在后期阶段,细胞膜失去其完整性。本文采用流式细胞术分析膜联蛋白V和7-氨基放线菌素D(AAD)双染色,检测全细胞的细胞死亡情况。结果显示,在用LPS/ATP刺激后,大量细胞死亡。使用扫描电子显微镜,我们观察了单个细胞中细胞死亡的可能形式。结果表明,在用LPS/ATP刺激后,细胞可能会发生焦亡、凋亡或坏死性凋亡。该协议的重点是观察用LPS / ATP刺激后巨噬细胞的死亡。结果表明,LPS和ATP刺激后的细胞死亡不仅限于焦亡,还可以发生凋亡和坏死性细胞凋亡,有助于研究人员更好地了解LPS和ATP刺激后的细胞死亡,并选择更好的实验方法。
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