توضيح # 946 ؛ -1،3-الجلوكاناز والبيروكسيديز الخصائص الفيزيائية والكيميائية لآلية الدفاع عن جدار خلية القمح ضد الإصابة بالديورافيس نوكسيا

تحفز نباتات القمح الموبوءة بحشرات من القمح الروسي (RWA) سلسلة من الاستجابات الدفاعية ، بما في ذلك الاستجابات شديدة الحساسية (HR) وتحريض البروتينات المرتبطة بالإمراض (PR) ، مثل β-1،3-glucanase و peroxidase (POD). تهدف هذه الدراسة إلى توصيف الخواص الفيزيائية والكيميائية لجدار الخلية المرتبطة ب POD و β-1،3-glucanase وتحديد تآزرها على تعديل جدار الخلية أثناء تفاعل RWASA2-wheat. تم إنبات أصناف Tugela-Dn1 الحساسة ، و Tugela-Dn1 المقاومة بشكل معتدل ، وأصناف Tugela-Dn5 المقاومة مسبقا وزرعها في ظروف الدفيئة ، وتم تخصيبها بعد 14 يوما من الزراعة ، وتم ريها كل 3 أيام. كانت النباتات موبوءة ب 20 فردا بارثينوجينيا من نفس استنساخ RWASA2 في مرحلة 3 أوراق ، وتم حصاد الأوراق في 1 إلى 14 يوما بعد الإصابة. تم استخراج سائل الغسيل بين الخلايا (IWF) باستخدام الترشيح الفراغي وتخزينه عند -20 درجة مئوية. تم سحق بقايا الأوراق إلى مسحوق واستخدامها لمكونات جدار الخلية. تم تحديد نشاط وتوصيف POD باستخدام ركيزة 5 mM guaiacol و H₂O₂ ، ومراقبة التغير في الامتصاص عند 470 نانومتر. تم إثبات نشاط β-1،3-glucanase ودرجة الحموضة والظروف المثلى لدرجة الحرارة من خلال قياس إجمالي السكريات المختزلة في التحلل المائي باستخدام كاشف DNS باستخدام ركائز β-1،3-glucan و β-1،3-1،4-glucan ، وقياس الامتصاص عند 540 نانومتر ، واستخدام منحنى الجلوكوز القياسي. تم تحديد الأس الهيدروجيني الأمثل بين الرقم الهيدروجيني 4 إلى 9 ، ودرجة الحرارة المثلى بين 25 و 50 درجة مئوية ، والاستقرار الحراري بين 30 درجة مئوية و 70 درجة مئوية. تم تحديد خصوصية ركيزة β-1،3-glucanase عند 25 درجة مئوية و 40 درجة مئوية باستخدام ركائز curdlan و barley β-1،3-1،4-glucan. بالإضافة إلى ذلك ، تم تحديد طريقة عمل β-1،3-glucanase باستخدام laminaribiose إلى laminaripentaose. تم تحليل أنماط منتجات التحلل المائي قليل السكاريد نوعيا باستخدام كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة (TLC) وتحليلها كميا باستخدام HPLC. توضح الطريقة المقدمة في هذه الدراسة نهجا قويا لغزو القمح ب RWA ، واستخراج البيروكسيديز و β-1،3-glucanase من منطقة جدار الخلية وتوصيفها الكيميائي الحيوي الشامل.