التوصيل المستمر للفيروس المرتبط بالغدي عن طريق حقن الوريد الجانبي في الفئران البالغة

تؤثر العديد من الاضطرابات على أعضاء متعددة أو تشمل مناطق مختلفة من الجسم ، لذلك من الأهمية بمكان تقديم العلاجات بشكل منهجي لاستهداف الخلايا المصابة الموجودة في مواقع مختلفة. الحقن في الوريد هو طريق توصيل جهازي يستخدم على نطاق واسع في الدراسات قبل السريرية التي تقيم العلاجات المخصصة للإعطاء على مستوى الجسم. في الفئران البالغة ، فإنه ينطوي على إعطاء عن طريق الوريد للعامل العلاجي في عروق الذيل الجانبية للفأر. عند إتقانها ، تكون حقن الوريد الخلفي آمنة وسريعة ، ولا تتطلب سوى أدوات بسيطة ومتاحة بشكل شائع. ومع ذلك ، فإن حقن الوريد الذيل يمثل تحديا تقنيا ويتطلب تدريبا مكثفا وممارسة مستمرة لضمان التسليم الدقيق للجرعة المقصودة.

نصف هنا بروتوكولا مفصلا ومحسنا ومحكما لحقن الوريد الجانبي الذي طورناه بناء على تجربتنا والتوصيات التي سبق أن أبلغت عنها مجموعات أخرى. بخلاف قيود الفئران ومحاقن الأنسولين ، يتطلب هذا البروتوكول فقط الكواشف والمعدات المتوفرة بسهولة في معظم المختبرات. وجدنا أن اتباع هذا البروتوكول يؤدي إلى توصيل ناجح باستمرار عن طريق الوريد للفيروس المرتبط بالغدي (AAV) في أوردة الذيل للفئران غير المخدرة التي تبلغ من العمر 7-9 أسابيع. بالإضافة إلى ذلك ، نصف البروتوكولات المثلى للكشف النسيجي عن بروتينات المراسل الفلوري وجينوم الناقل لكل جينوم ثنائي الصبغيات (vg / dg) يستخدم لتقييم نقل AAV والتوزيع الحيوي. الهدف من هذا البروتوكول هو مساعدة المجربين في إجراء حقن الوريد الذيل بسهولة بنجاح وثبات ، مما قد يقلل من وقت الممارسة اللازم لإتقان هذه التقنية.