אספקה עקבית של וירוס הקשור לאדנו באמצעות הזרקת וריד זנב לרוחב בעכברים בוגרים

הפרעות רבות משפיעות על איברים מרובים או מערבות אזורים שונים בגוף, ולכן קריטי לספק טיפולים באופן מערכתי כדי להתמקד בתאים הפגועים הממוקמים באתרים שונים. הזרקה תוך ורידית היא נתיב אספקה מערכתי נפוץ במחקרים פרה-קליניים המעריכים טיפולים המיועדים למתן בכל הגוף. בעכברים בוגרים, זה כרוך ניהול תוך ורידי של סוכן טיפולי לתוך ורידים זנב לרוחב של העכבר. כאשר שולטים בהן, זריקות ורידים בזנב הן בטוחות ומהירות, ודורשות רק כלים פשוטים וזמינים בדרך כלל. עם זאת, זריקות ורידים זנב הן מאתגרות מבחינה טכנית ודורשות הכשרה מקיפה ותרגול מתמשך כדי להבטיח את המסירה המדויקת של המינון המיועד.

כאן אנו מתארים פרוטוקול הזרקה מפורט, אופטימלי ורוחבי של ורידים בזנב שפיתחנו בהתבסס על הניסיון שלנו ועל המלצות שדווחו בעבר על ידי קבוצות אחרות. מלבד ריסוני עכברים ומזרקי אינסולין, פרוטוקול זה דורש רק ריאגנטים וציוד הזמינים ברוב המעבדות. מצאנו כי ביצוע פרוטוקול זה מביא להעברה מוצלחת באופן עקבי תוך ורידי של וירוס הקשור באדנו (AAV) לתוך ורידי הזנב של עכברים לא מורדמים בני 7-9 שבועות. בנוסף, אנו מתארים את הפרוטוקולים הממוטבים לזיהוי היסטולוגי של חלבוני כתב פלואורסצנטיים וגנום וקטורי לכימות גנום דיפלואידי (vg/dg) המשמשים להערכת התמרה והפצה ביולוגית של AAV. מטרת פרוטוקול זה היא לסייע לנסיינים לבצע בקלות זריקות ורידים בזנב בהצלחה ובעקביות, מה שיכול להפחית את זמן התרגול הדרוש כדי לשלוט בטכניקה.