Konsekvent leverans av adenoassocierat virus via lateral svansvensinjektion hos vuxna möss

Många sjukdomar påverkar flera organ eller involverar olika regioner i kroppen, så det är viktigt att leverera terapier systemiskt för att rikta in sig på de drabbade cellerna som finns på olika platser. Intravenös injektion är en allmänt använd systemisk administreringsväg i prekliniska studier som utvärderar behandlingar avsedda för administrering i hela kroppen. Hos vuxna möss innebär det intravenös administrering av läkemedlet i musens laterala svansvener. När man behärskar svansvensinjektioner är de säkra och snabba och kräver endast enkla och allmänt tillgängliga verktyg. Injektioner av svansvener är dock tekniskt utmanande och kräver omfattande utbildning och kontinuerlig övning för att säkerställa korrekt tillförsel av den avsedda dosen.

Här beskriver vi ett detaljerat, optimerat, lateralt svans-veninjektionsprotokoll som vi har utvecklat baserat på vår erfarenhet och på rekommendationer som tidigare rapporterats av andra grupper. Förutom mushållare och insulinsprutor kräver detta protokoll endast reagenser och utrustning som är lätt tillgängliga i de flesta laboratorier. Vi fann att om man följer detta protokoll resulterar det i konsekvent framgångsrik intravenös tillförsel av adenoassocierat virus (AAV) i svansvenerna hos osederade 7-9 veckor gamla möss. Dessutom beskriver vi de optimerade protokollen för histologisk detektion av fluorescerande reporterproteiner och vektorgenom per diploid genom (vg/dg) kvantifiering som används för att bedöma AAV-transduktion och biodistribution. Målet med detta protokoll är att hjälpa experimentatorer att enkelt utföra svansvensinjektioner framgångsrikt och konsekvent, vilket kan minska den övningstid som behövs för att behärska tekniken.