تحسين جمع الدموع في الفئران لتحليل mRNA والبروتين

الفيلم المسيل للدموع هو سائل حيوي ديناميكي للغاية قادر على عكس التغيرات الجزيئية المرتبطة بالأمراض ، ليس فقط في سطح العين ولكن أيضا في الأنسجة والأعضاء الأخرى. يوفر التحليل الجزيئي لهذا السائل الحيوي طريقة غير جراحية لتشخيص الأمراض أو مراقبتها ، وتقييم فعالية العلاج الطبي ، وتحديد المؤشرات الحيوية المحتملة. نظرا لحجم العينة المحدود ، يتطلب جمع عينات المسيل للدموع مهارات محددة وأدوات مناسبة لضمان الجودة العالية والكفاءة القصوى. تم وصف منهجيات مختلفة لأخذ عينات الدموع في الدراسات البشرية. في هذه المقالة ، يتم تقديم وصف شامل لبروتوكول محسن ، مصمم خصيصا لاستخراج معلومات البروتين المرتبطة بالدموع من النماذج الحيوانية التجريبية ، وخاصة الفئران. تتضمن هذه الطريقة التحفيز الدوائي لإنتاج الدموع في الفئران البالغة من العمر شهرين ، تليها جمع العينات باستخدام شرائط شيرمر وتقييم فعالية وكفاءة البروتوكول من خلال الإجراءات القياسية ، SDS-PAGE ، qPCR ، و PCR الرقمي (dPCR). يمكن تكييف هذا البروتوكول بسهولة للتحقيق في توقيع البروتين المسيل للدموع في مجموعة متنوعة من النماذج التجريبية. من خلال إنشاء بروتوكول لأخذ عينات الدموع بأسعار معقولة وموحدة ومحسنة للنماذج الحيوانية ، كان الهدف هو سد الفجوة بين البحوث البشرية والحيوانية ، وتسهيل الدراسات الانتقالية وتسريع التقدم في مجال أبحاث أمراض العين والجهازية.