Optimering af tåreopsamling i mus til mRNA og proteinanalyse

Tårefilmen er en meget dynamisk biovæske, der er i stand til at reflektere patologi-associerede molekylære ændringer, ikke kun i øjenoverfladen, men også i andre væv og organer. Molekylær analyse af denne biovæske tilbyder en ikke-invasiv måde at diagnosticere eller overvåge sygdomme på, vurdere medicinsk behandlingseffektivitet og identificere mulige biomarkører. På grund af den begrænsede prøvemængde kræver indsamling af tåreprøver specifikke færdigheder og passende værktøjer for at sikre høj kvalitet og maksimal effektivitet. Forskellige tåreprøvetagningsmetoder er blevet beskrevet i menneskelige undersøgelser. I denne artikel præsenteres en omfattende beskrivelse af en optimeret protokol, der er specielt skræddersyet til at udvinde tårerelateret proteininformation fra eksperimentelle dyremodeller, især mus. Denne metode omfatter farmakologisk stimulering af tåreproduktion i 2 måneder gamle mus, efterfulgt af prøvetagning ved hjælp af Schirmer-strimler og evaluering af protokollens effektivitet og effektivitet gennem standardprocedurer, SDS-PAGE, qPCR og digital PCR (dPCR). Denne protokol kan let tilpasses til undersøgelse af tåreproteinsignaturen i en række eksperimentelle paradigmer. Ved at etablere en overkommelig, standardiseret og optimeret tåreprøvetagningsprotokol for dyremodeller var målet at bygge bro mellem forskning på mennesker og dyr, lette translationelle undersøgelser og fremskynde fremskridt inden for forskning i øjensygdomme og systemiske sygdomme.