Optimización de la recolección de lágrimas en ratones para el análisis de ARNm y proteínas

La película lagrimal es un biofluido altamente dinámico capaz de reflejar cambios moleculares asociados a la patología, no solo en la superficie ocular sino también en otros tejidos y órganos. El análisis molecular de este biofluido ofrece una forma no invasiva de diagnosticar o controlar enfermedades, evaluar la eficacia del tratamiento médico e identificar posibles biomarcadores. Debido al volumen limitado de muestras, la recolección de muestras de lágrimas requiere habilidades específicas y herramientas adecuadas para garantizar una alta calidad y la máxima eficiencia. Se han descrito varias metodologías de muestreo de lágrimas en estudios en humanos. En este artículo, se presenta una descripción completa de un protocolo optimizado, diseñado específicamente para extraer información de proteínas relacionadas con el desgarro de modelos animales experimentales, especialmente ratones. Este método incluye la estimulación farmacológica de la producción de lágrimas en ratones de 2 meses de edad, seguida de la recolección de muestras mediante tiras de Schirmer y la evaluación de la eficacia y eficiencia del protocolo a través de procedimientos estándar, SDS-PAGE, qPCR y PCR digital (dPCR). Este protocolo se puede adaptar fácilmente para la investigación de la firma de la proteína lagrimal en una variedad de paradigmas experimentales. Al establecer un protocolo de muestreo de lágrimas asequible, estandarizado y optimizado para modelos animales, el objetivo era cerrar la brecha entre la investigación en humanos y animales, facilitando los estudios traslacionales y acelerando los avances en el campo de la investigación de enfermedades oculares y sistémicas.