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Abstract

Biology

用于肠瑞士卷和石蜡包埋组织的免疫荧光染色的优化方案

Published: July 19th, 2024

DOI:

10.3791/66977

* These authors contributed equally

Abstract

肠道是一个复杂的器官,由小肠和大肠组成。小肠可进一步分为十二指肠、空肠和回肠。肠道的每个解剖区域都有独特的功能,这反映在细胞结构的差异上。研究肠道的变化需要对不同的组织区域和细胞改变进行深入分析。为了研究肠道并观察大块组织,研究人员通常使用一种称为肠道瑞士卷的技术。在这种技术中,肠道被分成每个解剖区域并固定在平坦的方向上。然后,小心地卷起组织并处理石蜡包埋。正确的组织固定和定向是一种经常被忽视的实验室技术,但对于下游分析至关重要。此外,肠道组织不适当的瑞士滚动会损害脆弱的肠上皮,导致免疫染色组织质量差。确保组织固定良好且方向正确、细胞结构完整是确保肠道细胞最佳可视化的关键步骤。我们提出了一种经济高效且简单的方法来制作瑞士卷,将肠道的所有部分包含在一个石蜡包埋块中。我们还描述了肠道组织的优化免疫荧光染色,以研究肠上皮的各个方面。以下方案为研究人员提供了通过肠道组织固定、Swiss-roll 技术和免疫染色获得高质量免疫荧光图像的综合指南。采用这些精细的方法可以保留肠上皮的复杂形态,并促进对肠道生理学和病理生物学的更深入理解。

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