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Biology

आंतों के स्विस रोल और पैराफिन एम्बेडेड ऊतक के इम्यूनोफ्लोरोसेंट धुंधला के लिए अनुकूलित प्रोटोकॉल

Published: July 19th, 2024

DOI:

10.3791/66977

* These authors contributed equally

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आंत एक जटिल अंग है जो छोटी और बड़ी आंतों से बना होता है। छोटी आंत को आगे ग्रहणी, जेजुनम और इलियम में विभाजित किया जा सकता है। आंत के प्रत्येक शारीरिक क्षेत्र में एक अनूठा कार्य होता है जो सेलुलर संरचना में अंतर से परिलक्षित होता है। आंत में परिवर्तन की जांच के लिए विभिन्न ऊतक क्षेत्रों और सेलुलर परिवर्तनों के गहन विश्लेषण की आवश्यकता होती है। आंत का अध्ययन करने और ऊतक के बड़े टुकड़ों की कल्पना करने के लिए, शोधकर्ता आमतौर पर आंतों के स्विस रोल नामक तकनीक का उपयोग करते हैं। इस तकनीक में, आंत को प्रत्येक शारीरिक क्षेत्र में विभाजित किया जाता है और एक सपाट अभिविन्यास में तय किया जाता है। फिर, ऊतक को ध्यान से लुढ़काया जाता है और पैराफिन एम्बेडिंग के लिए संसाधित किया जाता है। उचित ऊतक निर्धारण और अभिविन्यास एक अक्सर अनदेखी प्रयोगशाला तकनीक है, लेकिन बहाव विश्लेषण के लिए गंभीर रूप से महत्वपूर्ण है. इसके अतिरिक्त, आंतों के ऊतकों का अनुचित स्विस रोलिंग नाजुक आंतों के उपकला को नुकसान पहुंचा सकता है, जिससे इम्यूनोस्टेनिंग के लिए खराब ऊतक गुणवत्ता हो सकती है। बरकरार सेलुलर संरचनाओं के साथ अच्छी तरह से तय और ठीक से उन्मुख ऊतक सुनिश्चित करना आंतों की कोशिकाओं के इष्टतम दृश्य सुनिश्चित करता है कि एक महत्वपूर्ण कदम है. हम एक एकल पैराफिन-एम्बेडेड ब्लॉक में आंत के सभी वर्गों को शामिल करने के लिए स्विस रोल बनाने के लिए एक लागत प्रभावी और सरल विधि प्रस्तुत करते हैं। हम आंतों के उपकला के विभिन्न पहलुओं का अध्ययन करने के लिए आंतों के ऊतकों के अनुकूलित इम्यूनोफ्लोरेसेंस धुंधला का भी वर्णन करते हैं। निम्नलिखित प्रोटोकॉल आंतों के ऊतकों के निर्धारण, स्विस-रोल तकनीक और इम्यूनोस्टेनिंग के माध्यम से उच्च गुणवत्ता वाले इम्यूनोफ्लोरेसेंस छवियों को प्राप्त करने के लिए शोधकर्ताओं को एक व्यापक मार्गदर्शिका प्रदान करता है। इन परिष्कृत दृष्टिकोणों को नियोजित करना आंतों के उपकला की जटिल आकृति विज्ञान को संरक्षित करता है और आंतों के शरीर विज्ञान और पैथोबायोलॉजी की गहरी समझ को बढ़ावा देता है।

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