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Abstract

Biology

Intestinal Swiss Rolls 및 파라핀 포매 조직의 면역형광 염색에 최적화된 프로토콜

Published: July 19th, 2024

DOI:

10.3791/66977

1Department of Regenerative Medicine and Cell Biology, Medical University of South Carolina
* These authors contributed equally

장은 소장과 대장으로 구성된 복잡한 장기입니다. 소장은 십이지장(duodenum), 제주눔(jejunum), 회장(ileum)으로 더 나눌 수 있습니다. 장의 각 해부학적 영역은 세포 구조의 차이에 의해 반영되는 고유한 기능을 가지고 있습니다. 장의 변화를 조사하려면 다양한 조직 영역과 세포 변화에 대한 심층적인 분석이 필요합니다. 장을 연구하고 큰 조직 조각을 시각화하기 위해 연구자들은 일반적으로 장 스위스 롤로 알려진 기술을 사용합니다. 이 기술에서는 장을 각 해부학적 영역으로 나누어 평평한 방향으로 고정합니다. 그런 다음 조직을 조심스럽게 굴려 파라핀 포매를 위해 가공합니다. 적절한 조직 고정 및 배향은 종종 간과되는 실험실 기법이지만 다운스트림 분석에서는 매우 중요합니다. 또한 장 조직을 부적절하게 롤링하면 연약한 장 상피가 손상되어 면역염색을 위한 조직 품질이 저하될 수 있습니다. 온전한 세포 구조를 가진 잘 고정되고 적절하게 방향이 지정된 조직을 보장하는 것은 장 세포의 최적 시각화를 보장하는 중요한 단계입니다. 우리는 단일 파라핀 내장 블록에 장의 모든 부분을 포함하도록 스위스 롤을 만드는 비용 효율적이고 간단한 방법을 제시합니다. 또한 장 상피의 다양한 측면을 연구하기 위해 장 조직의 최적화된 면역형광 염색에 대해 설명합니다. 다음 프로토콜은 장 조직 고정, 스위스 롤 기법 및 면역염색을 통해 고품질 면역형광 이미지를 얻기 위한 포괄적인 가이드를 연구자에게 제공합니다. 이러한 정교한 접근법을 사용하면 장 상피의 복잡한 형태를 보존하고 장 생리학 및 병리생물학에 대한 더 깊은 이해를 촉진할 수 있습니다.

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