Optimalisert protokoll for tarm sveitsiske ruller og immunfluorescerende farging av parafininnebygd vev

Tarmen er et komplekst organ som består av tynntarmen og tykktarmen. Tynntarmen kan videre deles inn i tolvfingertarmen, jejunum og ileum. Hver anatomiske region i tarmen har en unik funksjon som gjenspeiles av forskjeller i cellulær struktur. Å undersøke endringer i tarmen krever en grundig analyse av forskjellige vevsregioner og cellulære endringer. For å studere tarmen og visualisere store biter av vev, bruker forskere ofte en teknikk kjent som tarm sveitsiske ruller. I denne teknikken er tarmen delt inn i hver anatomiske region og festet i en flat retning. Deretter rulles vevet forsiktig og behandles for parafininnstøping. Riktig vevsfiksering og orientering er en ofte oversett laboratorieteknikk, men er kritisk viktig for nedstrømsanalyse. I tillegg kan feil sveitsisk rulling av tarmvev skade det skjøre tarmepitelet, noe som fører til dårlig vevskvalitet for immunfarging. Å sikre godt fiksert og riktig orientert vev med intakte cellestrukturer er et avgjørende skritt som sikrer optimal visualisering av tarmceller. Vi presenterer en kostnadseffektiv og enkel metode for å lage sveitsiske ruller for å inkludere alle deler av tarmen i en enkelt parafininnstøpt blokk. Vi beskriver også optimalisert immunfluorescensfarging av tarmvev for å studere ulike aspekter av tarmepitelet. Følgende protokoll gir forskere en omfattende veiledning for å skaffe høykvalitets immunfluorescensbilder gjennom tarmvevsfiksering, sveitsisk rulleteknikk og immunfarging. Ved å bruke disse raffinerte tilnærmingene bevares den intrikate morfologien til tarmepitelet og fremmer en dypere forståelse av tarmfysiologi og patobiologi.