עבודה זו נתמכה על ידי המענקים ל- J.H. מהקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מס '81800207). הסיוע של Beckman Coulter, Inc. במתן תמיכה עבור ציטומטריית זרימה וכיול פרמטרים מוערך מאוד. אנו מודים לג'יאו צ'ן ממעבדת המפתח הממלכתית למחלות אוראליות, בית החולים לסטומטולוגיה במערב סין, אוניברסיטת סצ'ואן, ויו צ'י ממרכז המחקר לרפואה רגנרטיבית, בית החולים מערב סין, אוניברסיטת סצ'ואן, על עזרתם ברכישת נתוני ציטומטריה של זרימה.

הניסויים במחקר זה השתמשו בסך הכל ב-10 עכברי C57BL/6 בגילאי 8 עד 12 שבועות. פעולות הניסוי נערכו בהתאם לפרוטוקול שאושר על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת סצ'ואן (#201609309). חומרים ניסיוניים והפרמטרים של ציטומטריית זרימה המשמשים במאמר זה מפורטים בטבלת החומרים.
<p cla...

שיטת עירור לייזר חלופית לזיהוי קל של תאי אוכלוסיית צד

<ol>
	<li>Goodell, M. A., Brose, K., Paradis, G., Conner, A. S., Mulligan, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+functional+properties+of+murine+hematopoietic+stem+cells+that+are+replicating+in+vivo.">Isolation and functional properties of murine hematopoietic stem cells that are replicating in vivo.</a> J Exp Med. 183 (4), 1797-1806 (1996).</li><li>Zhou, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ABC+transporter+Bcrp1/ABCG2+is+expressed+in+a+wide+variety+of+stem+cells+and+is+a+molecular+determinant+of+the+side-population+phenotype.">The ABC transporter Bcrp1/ABCG2 is expressed in a wide variety of stem cells and is a molecular determinant of the side-population phenotype.</a> Nat Med. 7 (9), 1028-1034 (2001).</li><li>Camargo, F. D., Chambers, S. M., Drew, E., McNagny, K. M., Goodell, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematopoietic+stem+cells+do+not+engraft+with+absolute+efficiencies.">Hematopoietic stem cells do not engraft with absolute efficiencies.</a> Blood. 107 (2), 501-507 (2006).</li><li>Challen, G. A., Boles, N. C., Chambers, S. M., Goodell, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+hematopoietic+stem+cell+subtypes+are+differentially+regulated+by+TGF-beta1.">Distinct hematopoietic stem cell subtypes are differentially regulated by TGF-beta1.</a> Cell Stem Cell. 6 (3), 265-278 (2010).</li><li>Asakura, A., Seale, P., Girgis-Gabardo, A., Rudnicki, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myogenic+specification+of+side+population+cells+in+skeletal+muscle.">Myogenic specification of side population cells in skeletal muscle.</a> J Cell Biol. 159 (1), 123-134 (2002).</li><li>Terrace, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Side+population+cells+in+developing+human+liver+are+primarily+haematopoietic+progenitor+cells.">Side population cells in developing human liver are primarily haematopoietic progenitor cells.</a> Exp Cell Res. 315 (13), 2141-2153 (2009).</li><li>Martin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+lung+side+population+cells+have+mesenchymal+stem+cell+potential.">Adult lung side population cells have mesenchymal stem cell potential.</a> Cytotherapy. 10 (2), 140-151 (2008).</li><li>Challen, G. A., Bertoncello, I., Deane, J. A., Ricardo, S. D., Little, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kidney+side+population+reveals+multilineage+potential+and+renal+functional+capacity+but+also+cellular+heterogeneity.">Kidney side population reveals multilineage potential and renal functional capacity but also cellular heterogeneity.</a> J Am Soc Nephrol. 17 (7), 1896-1912 (2006).</li><li>Mouthon, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+stem+cells+from+mouse+forebrain+are+contained+in+a+population+distinct+from+the+'side+population'.">Neural stem cells from mouse forebrain are contained in a population distinct from the 'side population'.</a> J Neurochem. 99 (3), 807-817 (2006).</li><li>Cordon-Cardo, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+stem+cells.">Cancer stem cells.</a> Ann Oncol. 21 (Suppl 7), 93-94 (2010).</li><li>Lapidot, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cell+initiating+human+acute+myeloid+leukaemia+after+transplantation+into+SCID+mice.">A cell initiating human acute myeloid leukaemia after transplantation into SCID mice.</a> Nature. 367 (6464), 645-648 (1994).</li><li>Yun, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+cancer+stem+cells+in+castration-resistant+prostate+cancer.">Targeting cancer stem cells in castration-resistant prostate cancer.</a> Clin Cancer Res. 22 (3), 670-679 (2016).</li><li>Lupia, M., Cavallaro, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+cancer+stem+cells:+still+an+elusive+entity.">Ovarian cancer stem cells: still an elusive entity.</a> Mol Cancer. 16 (1), 64 (2017).</li><li>Zhao, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AQP5+complements+LGR5+to+determine+the+fates+of+gastric+cancer+stem+cells+through+regulating+ULK1+ubiquitination.">AQP5 complements LGR5 to determine the fates of gastric cancer stem cells through regulating ULK1 ubiquitination.</a> J Exp Clin Cancer Res. 41 (1), 322 (2022).</li><li>Liu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+lncRNA+ROPM-mediated+lipid+metabolism+governs+breast+cancer+stem+cell+properties.">A novel lncRNA ROPM-mediated lipid metabolism governs breast cancer stem cell properties.</a> J Hematol Oncol. 14 (1), 178 (2021).</li><li>Ho, M. M., Ng, A. V., Lam, S., Hung, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Side+population+in+human+lung+cancer+cell+lines+and+tumors+is+enriched+with+stem-like+cancer+cells.">Side population in human lung cancer cell lines and tumors is enriched with stem-like cancer cells.</a> Cancer Res. 67 (10), 4827-4833 (2007).</li><li>Chiba, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Side+population+purified+from+hepatocellular+carcinoma+cells+harbors+cancer+stem+cell-like+properties.">Side population purified from hepatocellular carcinoma cells harbors cancer stem cell-like properties.</a> Hepatology. 44 (1), 240-251 (2006).</li><li>Haraguchi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+side+population+of+cancer+cells+from+human+gastrointestinal+system.">Characterization of a side population of cancer cells from human gastrointestinal system.</a> Stem Cells. 24 (3), 506-513 (2006).</li><li>Zhou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+the+PTEN/mTOR/STAT3+pathway+in+breast+cancer+stem-like+cells+is+required+for+viability+and+maintenance.">Activation of the PTEN/mTOR/STAT3 pathway in breast cancer stem-like cells is required for viability and maintenance.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 104 (41), 16158-16163 (2007).</li><li>Ota, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ADAM23+is+downregulated+in+side+population+and+suppresses+lung+metastasis+of+lung+carcinoma+cells.">ADAM23 is downregulated in side population and suppresses lung metastasis of lung carcinoma cells.</a> Cancer Sci. 107 (4), 433-443 (2016).</li><li>Wang, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ALCAM+regulates+multiple+myeloma+chemoresistant+side+population.">ALCAM regulates multiple myeloma chemoresistant side population.</a> Cell Death Dis. 13 (2), 136 (2022).</li><li>Wang, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Homoharringtonine+synergizes+with+quizartinib+in+FLT3-ITD+acute+myeloid+leukemia+by+targeting+FLT3-AKT-c-Myc+pathway.">Homoharringtonine synergizes with quizartinib in FLT3-ITD acute myeloid leukemia by targeting FLT3-AKT-c-Myc pathway.</a> Biochem Pharmacol. 188, 114538 (2021).</li><li>Dong, X. L., Wei, Y. Y., Xu, T., Tan, X. Y., Li, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+side+population+in+solid+tumor+cell+lines.">Analysis of side population in solid tumor cell lines.</a> J Vis Exp. (168), e60658 (2021).</li><li>Bhowmick, D., Sheridan, R. T. C., Bushnell, T. P., Spalding, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Practical+guidelines+for+optimization+and+characterization+of+the+Beckman+Coulter+CytoFLEX+platform.">Practical guidelines for optimization and characterization of the Beckman Coulter CytoFLEX platform.</a> Cytom Part A. 97 (8), 800-810 (2020).</li></ol>

השתמשנו בפרוטוקול המתואר כדי לערוך שלושה ניסויים, כאשר כל ניסוי כלל 3-4 עכברים, והתוצאה הייתה בסך הכל 10 עכברים. חלקם של תאי SP נע בין 0.05% ל -0.76%. חשוב לציין כי נצפו וריאציות אינדיבידואליות בקרב העכברים. השתמשנו בארבעה ציטומטרים של זרימה כדי לנתח את דגימות Hoechst. נצפה כי עירור של צבע Hoechst על ידי ליי...

תאי אוכלוסיית הצד (SP) מזוהים באמצעות צביעת Hoechst 33342 ומנותחים באמצעות ציטומטריית זרימה (FCM). תאי SP מאופיינים בשאיבת צבע הדנ"א הפלואורסצנטי מתוך התאים דרך טרנספורטרקלטת קשירת ATP (ABC) 1,2. השיטה הוקמה במקור לבידוד תאי גזע המטופויטיים של מח עצם מורין (HSCs)1. תאי SP מח העצם הועשרו באוכלוסייה של HSCs המאופיינת בביטוינמוך CD117+Sca-1+Lin-Thy1 3,4. לאחר מכן, נעשה שימוש נרחב בשיטה כדי לבודד ולהעשיר תאי גזע מרקמות אחרות, כולל שריר הלב5, כבד6, ריאות7, כליות8 ומוח קדמי9. בפרט, השיטה יושמה לבידוד תאי גזע סרטניים (CSC) בעשור האחרון. CSCs מייצגים אוכלוסייה קטנה של תאים בעלי תכונות של התחלת גידול, התחדשות עצמית, עמידות לכימותרפיה ופוטנציאל גרורתי10. CSCs זוהו בתחילה בממאירויות המטופויטיות11 ולאחר מכן נצפו בגידולים מוצקים שונים כגון ערמונית12, שחלות13, קיבה14, שד15 וקרצינומה ריאות16. למרות זמינותן של טכניקות שונות לזיהוי CSC, טכניקת SP נותרה בחירה מועדפת בשל תחולתה הרחבה על פני רקמות וקווי תאים מגוונים. יתר על כן, זוהי טכניקה רבת ערך המבודדת CSCs באמצעות מיון תאים מופעל פלואורסצנטי (FACS)16,17,18. ממצאי הניסוי מראים כי תאי SP מפגינים גידוליות בולטת ומציגים רמות ביטוי גבוהות של גנים הקשורים לתאי גזע19,20. המחקר הקודם שלנו21 הראה גם כי ניתוח שעתוק של תאי SP מבודדים במיאלומה נפוצה מגלה העשרה של מסלולי איתות הקשורים לתאי גזע, כגון מסלול הקיפוד. בינתיים, ביצענו ניתוחי העשרת מסלולים על הגנים המתבטאים באופן דיפרנציאלי בתאי SP של לוקמיה מיאלוגנית חריפה22. הגנים שהשתנו הועשרו במסלולים הקשורים לתאי גזע (Wnt/β-catenin, TGF-β, Hedgehog, Notch). מצאנו כי 1 x 105 תאי SP יכולים ליצור גידולים בעכברי BALB/c null22, בעוד שתאים שאינם SP לא יכולים, מה שמצביע על כך שלתאי SP היו מאפיינים של תאי גזע לוקמיה. יעילותה של שיטת Hoechst SP בזיהוי CSCs ניכרת.
פרוטוקול Hoechst SP שוכלל ושופר באמצעות התקדמות המחקר. הפרוטוקול כולל בקרה קפדנית של ריכוז הצבע, צפיפות התא, טמפרטורת הדגירה ומשך, הרכב החיץ וערך ה- pH. דגימות התאים שהוכנו בהתאם לפרוטוקול זה עברו אנליזה ציטומטרית של זרימה. בשל העירור של צבע Hoechst עם לייזר UV ב 355 ננומטר וזיהוי הפליטה הפלואורסצנטית שלו באמצעות מסנן 690/50 ננומטר (Hoechst אדום) ומסנן 450/50 ננומטר (Hoechst Blue), לייזר 350 ננומטר נדרש עבור FCM. עם זאת, לייזרים של 350 ננומטר אינם מצוידים בדרך כלל ברוב מכשירי FCM בגלל עלותם הגבוהה. לפיכך, ניסינו למצוא גישה חלופית לעירור צבע לזיהוי יעיל של תאי SP על ידי ציטומטריית זרימה. במחקר זה, היכולת של לייזרים 375 ננומטר ו 405 ננומטר בגילוי תאי SP הושוותה לזו של לייזר 355 ננומטר. הממצאים שלנו מראים דמיון מדהים בין תאי SP שזוהו על ידי לייזרים של 355 ננומטר, 375 ננומטר ו-405 ננומטר. תוצאות אלה מצביעות על כך שהלייזרים בעוצמה גבוהה של 375 ננומטר ו- 405 ננומטר יכולים לשמש כחלופות אפשריות ללייזר 355 ננומטר לזיהוי תאי SP. הכללת מקורות אור עירור נוספים עבור Hoechst 33342 מקלה על השימוש במודלים נוספים של ציטומטריית זרימה.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Automatic cell counter</td>
			<td>Countstar</td>
			<td>1M1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Filter(100 &#181;m)</td>
			<td>BIOFIL</td>
			<td>CSS-013-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Daily quality control fluorospheres</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>B5230</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Modification of Eagle&#39;s Medium with 4.5g/L glucose (DMEM medium)</td>
			<td>CORNING</td>
			<td>10-013-CVRC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>CORNING</td>
			<td>35-081-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS</td>
			<td>Hyclone</td>
			<td>SH30030.02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoechst 33342</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>B2261</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propidium iodide (PI)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P4170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red blood cell lysis buffer</td>
			<td>Beyotime</td>
			<td>C3702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Verapamil</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>V4629</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

effective detection of hoechst side population cells by flow cytometry

תאי אוכלוסיית הצד (SP) מזוהים באמצעות צביעת Hoechst 33342 ומנותחים באמצעות ציטומטריית זרימה (FCM). שיטת Hoechst SP משמשת לבידוד תאי גזע בהתבסס על תכונות שטף הצבע של מובילי קלטות קושרות ATP (ABC). השיטה שימשה בתחילה לזיהוי ובידוד של תאי גזע המטופויטיים (HSCs), אך כעת היא התפתחה להתמקד בעיקר בזיהוי ובידוד של תאי גזע סרטניים (CSC). שיטת הזיהוי המסורתית של FCM משתמשת בלייזר 355 ננומטר כדי לעורר את הצבע כדי לזהות תאי SP. באמצעות מחקר זה, זיהינו בהצלחה גישות חלופיות לעירור צבע שיכולות להחליף ביעילות את הזיהוי של תאי SP באמצעות לייזר 355 ננומטר. זה מושג באמצעות שימוש בלייזרים בהספק גבוה של 375 ננומטר או 405 ננומטר. זה מאפשר לנו לתרגל סלקטיביות משופרת בזיהוי תאי SP במקום להיות מוגבלים אך ורק לציטומטריית זרימת לייזר של 355 ננומטר.

The side population (SP) cells are identified through Hoechst 33342 staining and analyzed using flow cytometry (FCM). The SP cells are characterized by the pumping of the fluorescent DNA dye out of the cells through their ATP-binding cassette (ABC) transporter1,2. The method was originally established for isolating murine bone marrow hematopoietic stem cells (HSCs)1. The bone marrow SP cells were enriched with a population of HSCs characterized by &#160;CD117+Sca-1+Lin-Thy1low&#160;expression3,4. Thereafter, the method was widely used to isolate and enrich stem cells from other tissues, including cardiac muscle5, liver6, lung7, kidney8, and forebrain9. In particular, the method has been applied to isolate cancer stem cells (CSCs) in the past decade. CSCs represent a small population of cells that possess the properties of tumor initiation, self-renewal, resistance to chemotherapy, and metastatic potential10. CSCs were initially identified in hematopoietic malignancies11 and subsequently observed in various solid tumors such as the prostate12, ovarian13, gastric14, breast15, and lung16 carcinomas. Despite the availability of various techniques for CSC identification, the SP technique remains a favored choice owing to its broad applicability across diverse tissues and cell lines. Moreover, it is a valuable technique that isolates CSCs using fluorescence-activated cell sorting (FACS)16,17,18. The experimental findings demonstrate that SP cells exhibit pronounced tumorigenicity and display elevated expression levels of stem cell-associated genes19,20. Our previous study21 has also demonstrated that transcriptomic analysis of isolated SP cells in multiple myeloma reveals enrichment of signaling pathways associated with stem cells, such as the hedgehog pathway. Meanwhile, we performed pathway enrichment analyses on the genes differentially expressed in the SP cells of acute myelogenous leukemia22. The altered genes were enriched in stem cell-related pathways (Wnt/&#946;-catenin, TGF-&#946;, Hedgehog, Notch). We found that 1 x 105 SP cells could form tumors in BALB/c null mice22, whereas non-SP cells could not, indicating that SP cells had characteristics of leukemia stem cells. The efficacy of the Hoechst SP method in the identification of CSCs is evident.
The Hoechst SP protocol has been refined and enhanced through the progression of research. The protocol entails stringent control of the dye concentration, cell density, incubation temperature and duration, buffer composition, and pH value. The cell samples prepared in accordance with this protocol were subjected to flow cytometric analysis. Due to the excitation of Hoechst dye with a UV laser at 355 nm and detection of its fluorescence emission using both a 690/50 nm filter (Hoechst Red) and 450/50 nm filter (Hoechst Blue), a 350 nm laser is required for FCM. However, 350 nm lasers are not commonly equipped in most FCMs because of their high cost. Hence, we attempted to find an alternate approach for&#160;dye excitation for the effective detection of SP cells by flow cytometry. In this study, the capability of the 375 nm and 405 nm lasers in detecting SP cells was assessed and compared with that of the 355 nm laser. Our findings demonstrate a remarkable similarity between the SP cells detected by the 355 nm, 375 nm, and 405 nm lasers. These results suggest that the high-power 375 nm and 405 nm lasers can serve as feasible alternatives to the 355 nm laser for SP cell detection. The inclusion of additional excitation light sources for Hoechst 33342 facilitates the use of more flow cytometry models.

מחבר זרקור: טכניקות לייזר חדשניות לצביעת Hoechst לניתוח תאי אוכלוסיית צד

זיהוי יעיל של תאי אוכלוסיית צד Hoechst על ידי ציטומטריית זרימה

באיור 2, קבוצת הביקורת טופלה באמצעות verapamil, אשר חוסם טרנספורטרים ABC בתאי גזע כדי למנוע את חיסול Hoechst 33342. בכך, תאי הגזע בקבוצה הלא-וראפמילית מגרשים את Hoechst 33342 ויוצרים אוכלוסיית תאים שלילית הידועה בשם תאי SP. לייזר 355 ננומטר עורר ביעילות את הצבע Hoechst 33342, וכתוצאה מכך תצפית ברורה על...

כאן, אנו מראים כי לייזרים בהספק גבוה של 375 ננומטר ו- 405 ננומטר יכולים לעורר ביעילות את Hoechst 33342 ולשמש חלופה בת קיימא ללייזר 355 ננומטר לזיהוי תאי אוכלוסיית צד (SP), ובכך להרחיב את טווח הלייזרים הזמינים ביישומי ציטומטריית זרימה.

The side population (SP) cells are identified through Hoechst 33342 staining and analyzed using flow cytometry (FCM). The Hoechst SP method is utilized ...

זיהוי יעיל של תאי אוכלוסיית צד Hoechst על ידי ציטומטריית זרימה

Abstract