Effektiv påvisning av Hoechst-sidepopulasjonsceller ved flowcytometri

Sidepopulasjonscellene (SP) identifiseres gjennom Hoechst 33342-farging og analyseres ved hjelp av flowcytometri (FCM). Hoechst SP-metoden brukes til isolering av stamceller basert på fargestoffutstrømningsegenskapene til ATP-bindende kassetttransportører (ABC). Metoden ble opprinnelig brukt for identifisering og isolering av hematopoietiske stamceller (HSC), men den har nå utviklet seg til først og fremst å fokusere på identifisering og isolering av kreftstamceller (CSC). Den tradisjonelle deteksjonsmetoden til FCM bruker en 355 nm laser for å eksitere fargestoffet for å oppdage SP-celler. Gjennom denne studien har vi med suksess identifisert alternative tilnærminger for fargestoffeksitasjon som effektivt kan erstatte deteksjon av SP-celler ved hjelp av en 355 nm laser. Dette oppnås gjennom bruk av høyeffekts 375 nm eller 405 nm lasere. Dette gjør at vi kan utøve økt selektivitet i påvisningen av SP-celler i stedet for å være utelukkende begrenset til 355 nm laserflowcytometri.