Effektiv detektion av Hoechst sidopopulationsceller genom flödescytometri

Sidopopulationscellerna (SP) identifieras genom Hoechst 33342-färgning och analyseras med hjälp av flödescytometri (FCM). Hoechst SP-metoden används för att isolera stamceller baserat på färgutflödesegenskaperna hos ATP-bindande kassetttransportörer (ABC). Metoden användes ursprungligen för identifiering och isolering av hematopoetiska stamceller (HSC), men den har nu utvecklats till att främst fokusera på identifiering och isolering av cancerstamceller (CSC). Den traditionella detektionsmetoden för FCM använder en 355 nm laser för att excitera färgämnet för att detektera SP-celler. Genom denna studie har vi framgångsrikt identifierat alternativa metoder för färgämnesexcitation som effektivt kan ersätta detektion av SP-celler med hjälp av en 355 nm laser. Detta uppnås genom användning av högeffekts 375 nm eller 405 nm lasrar. Detta gör det möjligt för oss att utöva förbättrad selektivitet i detektionen av SP-celler snarare än att enbart vara begränsad till 355 nm laserflödescytometri.