Модифицированная модельная подготовка для реперфузии окклюзии средней мозговой артерии

Summary

Этот протокол описывает процесс подготовки к реперфузии окклюзии средней мозговой артерии через общую сонную артерию.

Abstract

Модель реперфузии окклюзии средней мозговой артерии (MCAO/R) имеет решающее значение для понимания патологических механизмов инсульта и разработки лекарственных препаратов. Тем не менее, среди широко используемых методов моделирования метод Коидзуми часто подвергается тщательному изучению из-за его лигирования общей сонной артерии (ОСА) и его неспособности достичь адекватной реперфузии. Аналогичным образом, метод Лонга подвергался критике за отсоединение и перевязку наружной сонной артерии (ЭХА). Данное исследование направлено на внедрение модифицированного метода подготовки модели, который сохраняет целостность ЭХА, включает в себя введение монофиламентного нейлонового шва через ОСА, восстановление лигированного разреза ОСА и поддержание реперфузии от ОСА. Реперфузия кровотока подтверждена с помощью лазерной спекл-визуализации. Методы оценки, такие как шкала Лонга, модифицированная шкала неврологической тяжести, окрашивание трифенилтетразолия хлорида (ТТС) и иммунофлуоресцентное мечение нейронов, продемонстрировали, что этот подход может индуцировать стабильное ишемическое повреждение нервов. Этот модифицированный протокол модели MCAO/R прост и стабилен, предоставляя ценные рекомендации для практикующих врачей в области ишемии головного мозга.

Introduction

По данным Всемирной организации здравоохранения, инсульт остается второй по значимости причиной смерти во всем мире в течение последнего десятилетия, с высоким уровнем заболеваемости, высокой смертностью и высоким коэффициентом инвалидности ^1,2. По мере старения населения мира ожидается, что заболеваемость инсультом в развивающихся странах будет расти, что потенциально может стать основной причиной преждевременной смерти и инвалидности среди взрослых. Кроме того, существует тенденция к тому, что инсульты случаются в более раннем возрасте³ лет. Потеря рабочей силы после инсульта также ло....

Protocol

Протокол эксперимента был проведен в соответствии с рекомендациями Комитета по использованию лабораторных животных и Комитета по уходу и использованию институциональных животных Университета традиционной китайской медицины Чэнду (регистрационный номер: 2019-DL-002). Все данные исследов.......

Discussion

Модель окклюзии средней мозговой артерии (MCAO), индуцированная монофиламентным нейлоновым швом, является наиболее распространенным методом, используемым для подготовки моделей MCAO. Этот подход широко применяется в доклинических исследованиях и получил признание многих практикующих в?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Animal anesthesia system	Rayward Life Technology Co., Ltd	R500IE
Animal temperature maintainer	Rayward Life Technology Co., Ltd	69020
Cy3 secondary antibody	Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd	GB21303
DAP1 antibody	Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd	G1012
DCX antibody	Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd	GB13434
Goat serum	Beyotime Biotechnology Co., LTD	C0265
GraphPad Prism	GraphPad Software	GraphPad Prism 8.0
ImageJ	National Institutes of Health	ImageJ software
Isofluran	Rayward Life Technology Co., Ltd	R510-22
Laser speckle blood flow imaging system	Rayward Life Technology Co., Ltd	PeriCam PSI NR
MAP-2 antibody	Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd	GB11128
Miniature hand-held skull drill	Rayward Life Technology Co., Ltd	87001
monofilament suture	Rayward Life Technology Co., Ltd	250-280g
NeuN antibody	Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd	GB11138
OCT embedding agent	BIOSHARP	BL557A
Penicillin sodium	Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd.	17121709-2
Quick Antigen Retrieval Solution for Frozen Sections	Beyotime Biotechnology Co., LTD	P0090
SD rats	SPF ( Beijing ) Biotechnology Co.,Ltd.	250-280g
Triton X-100	Beyotime Biotechnology Co., LTD	ST795
TTC	Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd.	2019030101