生成和共培养小鼠原代小胶质细胞和皮质神经元

小胶质细胞是中枢神经系统 （CNS） 的组织驻留巨噬细胞，执行支持神经元健康和 CNS 稳态的许多功能。它们是与 CNS 疾病活动相关的免疫细胞的主要群体，采用反应性表型，在慢性神经退行性疾病（如多发性硬化症 （MS））期间可能导致神经元损伤。由于解决小胶质细胞、神经元和其他 CNS 环境因素之间复杂的 体内 相互作用的挑战，小胶质细胞在健康和疾病期间调节神经元功能和存活的不同机制仍然有限。因此，共培养小胶质细胞和神经元的 体外 方法仍然是研究小胶质细胞-神经元相互作用的宝贵工具。在这里，我们提出了一种从小鼠生成和共培养原代小胶质细胞和神经元的方案。具体来说，在出生后 0-2 天之间，从来自新生小鼠脑匀浆的混合胶质细胞培养物 中 分离出小胶质细胞。在胚胎第 16-18 天之间从小鼠胚胎的脑皮层中分离出神经元细胞。 体外 4-5 天后，将神经元细胞接种在 96 孔板中，然后加入小胶质细胞以形成共培养物。仔细的时间安排对于该方案至关重要，因为两种细胞类型都需要达到实验成熟度才能建立共培养。总体而言，这种共培养可用于研究小胶质细胞-神经元相互作用，并且可以提供多种读数，包括免疫荧光显微镜检查、实时成像以及 RNA 和蛋白质检测。