म्यूरिन प्राइमरी माइक्रोग्लिया और कॉर्टिकल न्यूरॉन्स का निर्माण और सह-संवर्धन

माइक्रोग्लिया केंद्रीय तंत्रिका तंत्र (सीएनएस) के ऊतक-निवासी मैक्रोफेज हैं, जो न्यूरोनल स्वास्थ्य और सीएनएस होमियोस्टेसिस का समर्थन करने वाले कई कार्य करते हैं। वे सीएनएस रोग गतिविधि से जुड़ी प्रतिरक्षा कोशिकाओं की एक प्रमुख आबादी हैं, प्रतिक्रियाशील फेनोटाइप को अपनाते हैं जो संभावित रूप से मल्टीपल स्केलेरोसिस (एमएस) जैसे क्रोनिक न्यूरोडीजेनेरेटिव रोगों के दौरान न्यूरोनल चोट में योगदान करते हैं। अलग-अलग तंत्र जिसके द्वारा माइक्रोग्लिया न्यूरोनल फ़ंक्शन को विनियमित करता है और स्वास्थ्य और बीमारी के दौरान जीवित रहता है, माइक्रोग्लिया, न्यूरॉन्स और अन्य सीएनएस पर्यावरणीय कारकों के बीच विवो इंटरैक्शन में जटिल को हल करने में चुनौतियों के कारण सीमित रहता है। इस प्रकार, माइक्रोग्लिया और न्यूरॉन्स के सह-संवर्धन के इन विट्रो दृष्टिकोण माइक्रोग्लिया-न्यूरोनल इंटरैक्शन का अध्ययन करने के लिए एक मूल्यवान उपकरण बना हुआ है। यहां, हम चूहों से प्राथमिक माइक्रोग्लिया और न्यूरॉन्स उत्पन्न करने और सह-संस्कृति करने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं। विशेष रूप से, माइक्रोग्लिया को प्रसवोत्तर दिनों 0-2 के बीच नवजात चूहों से प्राप्त मस्तिष्क समरूप से स्थापित मिश्रित ग्लिया संस्कृति से इन विट्रो में 9-10 दिनों के बाद अलग किया गया था। न्यूरोनल कोशिकाओं भ्रूण दिन 16-18 के बीच माउस भ्रूण के मस्तिष्क cortices से अलग थे. इन विट्रो में 4-5 दिनों के बाद, न्यूरोनल कोशिकाओं को 96-अच्छी प्लेटों में वरीयता दी गई थी, इसके बाद सह-संस्कृति बनाने के लिए माइक्रोग्लिया के अतिरिक्त किया गया था। सावधान समय इस प्रोटोकॉल के लिए महत्वपूर्ण है के रूप में दोनों प्रकार के सेल सह संस्कृति स्थापित करने के लिए प्रयोगात्मक परिपक्वता तक पहुँचने की जरूरत है. कुल मिलाकर, यह सह-संस्कृति माइक्रोग्लिया-न्यूरॉन इंटरैक्शन का अध्ययन करने के लिए उपयोगी हो सकती है और इम्यूनोफ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी, लाइव इमेजिंग, साथ ही आरएनए और प्रोटीन परख सहित कई रीडआउट प्रदान कर सकती है।