Tendon ex vivo Mekanik Yükleniyor

Özet

In vitro sistemde aynı anda dört tendon kültür yüklemek için yeni bir tarif edilir.

Özet

Aşırı kullanıma bağlı olarak (örneğin, bilek tendinit, epicondyltis) tendon yaralanmaları, spor aktiviteleri ve işyerinde yaygındır. En çok tekrarlanan, yüksek kuvvet el faaliyetleri ile ilişkilidir. Döngüsel yükleme nedeniyle hücresel ve yapısal hasar mekanizmaları iyi bilinmemektedir. Bu videonun amacı, doku kültürü aynı anda dört tendonların yükleyebilirsiniz yeni bir sistem sunmak. Video steril doku hasat yöntemleri ve tendonları daha sonra medya içine dalmış ve 37 muhafaza sıkma sistemi ° C üzerine nasıl yüklenir Bir kelepçe, diğeri lineer aktüatör ile hareket ise sabittir. Tendon çekme kuvveti mobil kelepçe ile seri bir yük hücresi ile izlenir. Aktüatörler LabView program ile kontrol edilir. Arka arkaya dört tendon yükleme, tekrarlama oranı, yükleme hızı ve süresi farklı desenleri ile yüklenebilir. Yükleme birkaç dakika için 48 saat devam edebilir. Yükleme sonunda, tendonların kaldırılır ve orta maddenin biyokimyasal analizler için ayıklanır. Bu sistem, gen ekspresyonu ve tendon yapısal değişiklikler desenler yükleme etkileri soruşturma için izin verir. Sonuçta, aşırı kullanıma bağlı yaralanma mekanizmaları, bulguları ile tedavisi ve önlenmesi için uygulanan çalışmalar yapılabilir.

Protokol

1. Ek medya CO _{2-bağımsız} medya fetal sığır serumu, L-glutamin, antibiyotikler ve askorbik asit ile
2. Kısım 40 ml, 50 ml santrifüj tüpleri içine (her tendonu 1)
3. Kısım 10 ml, 15 ml santrifüj tüpleri içine (her tendonu 1)
4. ,, Cerrahi aletler, otoklav yaprak, cımbız ve tork anahtarı otoklavda sterilize
5. Bir gecede% 70 etanol iliklerine kelepçeler ve kuvvet mikrometre ipuçları sterilize
6. Tavşan arka pençeleri Hasat tendonları. Tavşan en fazla 2 saat önce ötenazi olması gerekirdi.
7. 15 ml santrifüj tüpüne koyun tendonları medya ile dolu
8. Steril bir alan oluşturulması için steril bir otoklav sac Lay
9. Tendon kesit alanı ölçün
   1. Mikrometre yerleştirin mikrometre ipuçları, düzgün hizalamak
   2. Yol Tutuş tendon biter
   3. Oluk ince tendon bölümü Fit
   4. Asistan yer 50g ağırlığa sahip
   5. 30 saniye bekleyin, kalınlığı okumak (CSA = kalınlığı x 1.3)
10. 15 ml santrifüj tüpüne koyun tendon geri
11. Yüklenecek her tendon tekrarlayın
12. Tabanından sökünüz
13. 3mm 5mm parça steril gazlı bez ile her tendon için 40mm şeritler ve bir iki 15mm Kes
14. Distal kelepçe oluklar arasındaki her sıkıca şerit yer ve Rulo
15. Kelepçe, distal proksimal kelepçe kelepçe ve tendon fibrokartilaj bölgesinde tendonun distal ucu santrifüj tüpüne tendon ve yeri çıkarın
16. Yeri tendonun distal ucu üstünde 3x5 gazlı bez parçası, ve kelepçe güvenli
17. Güvenli proksimal kelepçe, tendon sağlamak kelepçeler sıkılır zaman gerilim altında olmadığını kelepçeler arasında ve yeterince bolluk ile uyumlu kalır. 1N-m kelepçeler sıkın.
18. Yeri 50ml santrifüj tüpüne temel medya
19. Tabanda Yeri aktüatör
20. Yüklenecek her tendon tekrarlayın
21. Su banyosu üzerinde Yeri üssü
22. Yükleme Protokolü
    1. Önkoşul tendon
    2. 0.5N yük, ölçü tendon uzunluğu (Bu ölçü uzunluğu) uygulayın
    3. Tekrarlı yükleme uygulayın
23. Tabanından sökünüz
24. Kelepçeler dan Yayın tendon
25. Süreç tendon

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Tartışmalar

Video doku kültürü dört canlı tendonları kadar aynı anda yükleme için yeni bir sistem sunar. Tipik yükleme süreleri 2 ila 48 saat. Yükledikten sonra, tendonların kaldırılır ve gen ekspresyonu için işlenmiş. Sistemi yükleme desen etkisi tendon dejeneratif değişiklikler ile ilişkili genlerde değişiklikler hakkında soruşturma için izin verir. Bu deneyler, tekrarlayan yükleme ile ilişkili yaralanma mekanizmaları içine bazı bilgiler sağlayabilir. Ayrıca doku hasarına neden olabilir yükler içgörü sağlar. S...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Malzemeler