Küçük ve Büyük Kemirgen Modelleri ile Barnes Labirent Test Stratejileri

Özet

Kuru toprak Barnes labirent yaygın tepki hafif caydırıcı uyaranlara mekansal navigasyon yeteneği ölçmek için kullanılır. Ardışık gün boyunca, kontrol grubuna performans (kaçış kafes bulmak için, örneğin gecikme), normal öğrenme ve hafıza göstergesi, geliştirir. Sıçanlar ve fareler arasındaki farklar burada ayrıntılı cihaz ve yöntem değişiklikleri gerektirmektedir.

Özet

Mekansal öğrenme ve laboratuvar kemirgenler bellek sık sık su ve kuru kara (Barnes) labirentine çoğu popüler olan labirentine, içinde seyir yeteneği ile değerlendirilir. Oturumları ya çalışmalarda üzerinde geliştirilmiş performans kaçış kafes / platform konumu öğrenme ve hafıza yansıttığı düşünülmektedir. Su labirentler daha az stresli kabul edilen, Barnes labirent eşit olarak çevre kenarı etrafında aralıklı birkaç delik ile dairesel bir platform üstüne nispeten basit bir tasarımdır. Tek bir kaçış kafes neden olurken deliklerden biri ama hepsi,-yanlış dipli veya kör-bitmeyen. Hafif caydırıcı uyaranlar (örneğin parlak havai ışıkları) kaçış kafesi bulmak için motivasyon sağlar. Kaçış kafesi bulmak için Gecikme oturumu sırasında ölçülebilir, ancak ek bitiş noktası genellikle video kaydını gerektirir. Bu video kayıtları, otomatik izleme yazılımı kullanımı su labirentine üretilen bu (örneğin, benzer uç noktaları çeşitli üretebilir </ Em> katedilen mesafe, hız / hız, doğru kadranda harcanan zaman, zaman) dinlenme ve gecikme onay / hareketli geçirdi. (Yani, rastgele seri, ya da doğrudan) arama stratejisi türü de kategorize edilebilir. Barnes labirent yapı ve test yöntemleri bu gibi sıçan, fare gibi küçük kemirgenler, ve büyük kemirgenler için farklı olabilir. Ekstra-labirent ipuçları fareler için etkili iken Örneğin, küçük vahşi kemirgenler labirent çevresinde görsel bir bariyer ile intra-labirent ipuçları gerekebilir. Uygun uyaranlara kaçış kafesi bulmak için kemirgen motive hangi tespit edilmelidir. Baykal ve su labirentine hem zaman 4-7 test eden çalışmalar genellikle gelişmiş, öğrenme ve hafıza performansı (örneğin kısa gecikmeleri veya yol kaçış platformu veya kafes bulmak için uzunlukları) ve / veya deney grupları arasındaki farklar tespit için gerekli olduğu gibi alıcı olabilir. Hatta bu yüzden, Barnes labirent mekansal seyir yeteneklerini ölçen bir yaygın olarak kullanılan davranışsal değerlendirme veGenetik, nöro-davranışsal manipülasyonlar, ya da ilaç / toksikan maruz potansiyel bozulma.

Giriş

Mekansal öğrenme ve laboratuar kemirgenlerde bellek ilk bir gıda güçlendiricidir ¹ bulmak için ara sokaklardan bir labirent navigasyon gıda yoksun fareler ile değerlendirildi. Birkaç yıl sonra, bir mekansal referans bellek sistem ² önerilmiştir. Bir test oturumu veya çalışma içinde belleği belirtir çalışan bellek aksine, referans hafıza testi oturumları veya deneme karşısında bellek anlamına gelir ve daha yakından uzun süreli bellek ile ilgilidir.

Labirentine çeşitli türleri bu hipokampus bağımlı uzaysal öğrenme ve bellek, küçük ve büyük kemirgenler (örneğin su labirenti, birden fazla T-labirent, radyal kollu labirent ve kuru kara labirentine) ^3-6 noninvaziv değerlendirmeler olarak geliştirilmiştir. Burada, ilk Dr Carol Barnes ⁷ tarafından 1979 yılında açıklanan dairesel platform veya Barnes labirent, odaklanın. Bu labirent sıçanlarda (Ra da dahil olmak üzere, kemirgen modellerinde geniş bir mekansal seyir öğrenme ve hafıza test etmek için kullanılmıştırttus norvegicus), fareler (Mus musculus), fareler (Peromyscus maniculatus bairdii) geyik Kaliforniya fareler (Peromyscus californicus) ve hystricomorph kemirgenler (örneğin Degus [Octodon Degus]) ^8-13. Barnes labirent kullanılarak değerlendirildi Diğer türler Amerikan hamamböceği (Periplaneta Americana) ^14, mısır yılanları (Elaphe guttata guttata) ^15, dahil   pullu sürüngenler (örn. yan blotched kertenkele [Uta stansburiana]) ^16, ve insan olmayan primatlarda (örneğin fare lemur [Microcebus murinus]) ^17. Bizim laboratuvarlarında, Barnes labirent performans gelişim bisfenol A (BPA) veya etinil estradiol (EE2) maruz ^9-1113 sonra nörotoksisitenin bir göstergesi olarak kullanılmaktadır. Ayrıca yaygın Alzheimer Hastalığı ile ilgili def çeşitli fare suşları ^18-21, yaşlanma etkilerinin ^7,22-28 değerlendirilmesi davranışı fenotipleme için kullanılır ve^3,29-33 hayvan modellerinde, hem de egzersiz ve diyet çevresel ve metabolik değişiklikler ^34-42 etkilerinde icits.

Barnes labirent bir kullanım önemli avantajı hem farelerde ⁴⁴ plazma kortikosteron konsantrasyonları, akut artışı neden olabilir, ancak bu, bu tür Morris su labirenti ⁴³ gibi su labirentine, göreli olarak kişilerde daha az stres neden olmasıdır. Bir kuru toprak labirent gibi, Barnes labirent karasal kemirgenler ⁴⁵ daha ethologically-alakalı olabilir. Su labirenti performans farelerde ^3,46,47 genetik değişikliklerin daha duyarlı olduğu gösterilmiş olmasına rağmen, Barnes labirent performans diğer bazı değişiklikler ^48,49 karşı daha duyarlıdır. Su labirenti kullanılması mümkün değildir kemirgen modellerinde, Barnes labirent uzamsal bellek tutma ³¹ bir ince ayarlı bir değerlendirme sağlayabilir. Tipik Barnes Labirent (yani parlak ışıklar) kullanılan hafif caydırıcı uyaranlar,Ancak, kaçış kafesi ⁴⁵ bulmak için kemirgen için yeterli motivasyon sağlamak olmayabilir. Dahası, kemirgenler onlar kaçış kafesi girmezseniz hiçbir ceza oluştuğunu öğrenebilirsiniz. Böylece, yerine aktif kaçış kafes ararken, bazı kemirgenler aktif her deneme uzun süreler için labirenti keşfetmek. Kennard ve Woodruff-Pak ²⁴ tarafından gözden olarak, bu artan keşif kaçış kafesi, yol uzunluğunu bulmak için gecikme uzatmak, ve hataların sayısını artıracaktır. Böylece, gecikme, hata oranı, doğru ve yanlış kadran, hız harcanan zaman, zaman hareketli, zaman dinlenme ve arama stratejisi de dahil olmak üzere birden fazla parametrelerin ölçümü, topluca her deneğin mekansal seyir öğrenme ve hafıza yeteneği ⁸ daha iyi bir gösterge sağlayabilir ^-10. Ayrıca, performansı ilk kaçış kafesini (birincil önlemler) veya kaçış kafesi (toplam ölçü) girmek için gecikme bulmak için gecikme olarak ölçülebilir. Bazı argU varperformans birincil önlemlerin toplam önlemler ⁵⁰ daha uzamsal öğrenme daha doğru bir yansıması olduğunu ed. Burada anlatılan örnekler de dahil olmak üzere çoğu çalışma, hata oranını ve arama stratejisini belirlemek için kaçış kafesi girmek için gecikme kullanın. Ayrıca, bazı izleme yazılım sistemleri doğru vs yanlış delik koklama frekansları ölçebilen bir üç nokta vücut algılama sistemi var. Son olarak, labirent iyice yardımlar sağlamak veya sonraki hayvanlara dikkat dağıtıcı olabilecek koku ipuçlarını kaldırmak için çalışmalar arasındaki etanol ile temizlenmesi gerekir.

Barnes labirent tasarımları değişebilir fakat genel olarak her bir ev ya da bir çıkış kafes neden sadece bir tanesi, 12 veya 20 olası çıkış delikleri vardır. Escape kafes (duvarsız labirentine için) doğrudan labirent üst kaçış deliğinin altında ya yer ya da labirentin çevreleyen duvarın içine inşa edilebilir. Ipuçları m mesafede, yaklaşık 16.5 cm yükseklik veya genişlik (büyüklüğü değişebilirAze) yatay bir çizgi yerden labirentin dışında oda duvar tavana yerleştirilen genişliği 21,6 cm. Peromyscus türler için Barnes labirent tasarımlar 1-5 gösterisi örnekleri (Şekil 1) ve sıçanlarda (Şekil 2-5) Rakamlar. Fiş veya yanlış dipleri labirentten dışarı düşmesini hayvan önlemek için nonescape delikleri kapatmak gerekir. Test Oda büyüklüğü değişebilir (~ 20 m ²⁾ ama o, odasına hayvanları habituating Video set-up (eğer kullanılıyorsa) ile bir bilgisayar, uzlaşmacı ve bir yer, labirent için yeterli yer sağlamak için yeterince büyük olması gerekir deneyci onların varlığı hayvanın performansı ile karışmaz böyle labirent aparatının bir mesafede (en az ~ 122 cm) oturmak için. Kaçış kafes konumu atama tedavi grupları ve cinsiyet arasında dengeli olmalıdır. Burada anlatılan belirli prosedürler içi labirent koku ipuçları, bazı çalışmalar kullanımını vazgeçirmek için çalışmalar arasındaki labirent dönen dahil yok ikenBu işlemi ⁵⁰ dahil. Bizim prosedürlerde, labirent koku ipuçlarını ortadan kaldırmak için çalışmalar arasındaki etanol ile silinerek temizlenir.

1) rastgele, operasyonel olarak tanımlanan labirent merkezini geçerek yolları ayrılmış deliklerin lokalize aramalarda, 2) seri olarak tanımlanır: kaçış kafesi yerini, arama stratejileri üç tip (Barnes ⁷ tarafından orijinal olarak adlandırılan "desen") tanımlanmış sistematik bir saat yönünde ya da saat yönünün tersine ardışık delik arama, ve 3) doğrudan veya mekansal, birden fazla kez ve üç ya da daha az hata ile labirent merkezini geçmeden doğru kadranda doğrudan navigasyon olarak tanımlanır. Genel olarak, tekrarlanan test ile, kemirgenler tipik (rastgele seri ve direkt) ⁵¹ listelenen sırayla arama stratejileri yoluyla ilerleme. Kaçış kafes olmadan bir prob deneme de bellek ⁵⁰ ilave bir önlem olarak kullanılabilir.

Protokol ve temsilBurada sonuç kemirgenler iki tür (Peromyscus türe aksi adlandırılan küçük kemirgenler) ve sıçanlar için geliştirilmiştir. Bu genel prosedürler ayrıca doğuştan ve / veya outbred farelerde (Mus musculus) tutun da, diğer çalışmalar bu ikincisi türler ^18-21 potansiyel metodoloji farklılıkları danışılmalıdır.

Protokol

1.. Küçük Kemirgenler için Barnes Maze Prosedürü

1. Labirent ve yerin üstünde havai ışıkları açın laboratuvar kapı dış işaretleri "Girmeyin".
2. Yaklaşık 30 dakika önce alışma izin ilk deneme başlamadan test odasına normal ev kafeslerde fareler getirin. Oda sessiz ise, aksi takdirde bu tedbir, kabul edilebilir, beyaz gürültü dahil etmek gerekli olmayabilir.
3. Izleme programı kurmak.
4. Yavaşça kendi ev kafesinden ilk fareyi çıkarın ve uzun boylu kapalı plastik kutuda yerleştirin. Belirlenen kaçış deliğinin altında kaçış (temiz ev) polipropilen kafesini (29 cm x 19 cm x 13 cm) yerleştirin.
   1. Bu çıkış deliğinden çıkarılır ve diğer tüm delikleri takılı tüp engelleyen kağıdı emin olun.
   2. Labirent çevresinde perde çizin.
5. Labirent merkezinde içinde fare ile plastik kutu yerleştirin ve yaklaşık 8 saniye sonra, yavaşça takafesinden hayvan ke ve labirent üzerine yerleştirin.
   1. Labirentin merkezindeki hayvan yerleştirdikten sonra, sessizce bilgisayar alanında (labirent ~ 150 cm) hareket ettirin.
   2. Zaten program kendi performansını belgeleyen başlayıncaya kadar hayvan labirent sürüldüğü zaman geçtikten (birkaç saniye içinde) en az zaman sağlamak için açık olmalı, uygun yazılım programı izleme başlatın.
6. Bilgisayar monitörü ve rekor delik sayısı, deneme sayısına, arama stratejisi ve yapılan hataların sayıda hayvanın performansı gözlemlemek. Bir hata yanlış bir deliğinin koklama olarak tanımlanır. Arama stratejisinin Değerlendirilmesi izleme modeline dayanarak canlı veya daha sonra yapılabilir.
   1. Arama strateji Doğrudan olarak kategorize edilmektedir (3 ya da daha az hata ile kaçış kafesin içine doğrudan giderek),
   2. Seri (kaçış kafes bulunduğu kadar labirent çevresi boyunca seyahat), ya da
   3. Rastgele </ Strong> (çeşitli deliklerini kontrol labirent merkezini birden çok kez kapısı).
7. Hayvan kaçış kafesin içinde dört pençeleri olduğunda izleme programı durdurun.
8. Fare, 5 dakika içinde kaçış kafesini girmek için başarısız olursa, nazikçe doğru konuma ve kaçış kafesin içine kılavuz. Fare 2 dakika için çıkış kafes içinde kalmasına izin verin.
9. Kaçış kafesten fareyi çıkarın ve ev kafes yerleştirin.
10. Labirent üst sprey ve% 70 etanol ile kafes kaçış ve kurulayın. Ikinci deneme çalıştırmadan önce 30 dakika için bir kenara ilk kafes / fare ayarlayın.
11. Sonraki fareyi başlamadan önce, önceden doğru kaçış deliği takın ve bir sonraki konu için belirlenmiş kaçış deliğinden delik engelleme kağıt fişini çıkarın.
12. Her bir fare, yaklaşık 30 dakika arası bir çalışma aralığı ile / gün 2 denemeleri için test edilir.
13. Tüm fareler yedi gün boyunca test edilmiştir kadar o olasılığını artırabilir, hangi adımları tekrarlayınf geliştirilmiş performans ve / veya veri sadece dört gün göre tedavi grupları arasındaki farklılıklar gözlem.

2. Rats Barnes Labirent Testi Bir Takip Programı Not Available olduğunda

1. Labirent (doğrudan ışıkları altında ortalanmış) onun doğru yerleşim olduğundan emin olun, nonescape deliklerini ve düşmesini hayvan önlemek sahte dipleri labirent güvenli, ve kaçış kafes ilk konu için belirlenen konumda. Labirent Yukarıdaki havai ışıkları açık olmalıdır.
2. Sağlamak, bilgisayar ve kamera hazır ve bir kronometre mevcuttur.
3. Diğer yakın yerlerde herhangi bir gürültü azaltmak için beyaz gürültü açmak. Tester sandalyesi labirent üst yakın kenarından yaklaşık 122 cm ve test boyunca aynı konumda kalır.
4. (2 dk ayarlı) bir zamanlayıcı (sadece test 1. Gününde gerekli) mevcut olmalıdır. Timer "bip" ya da başka gürültü yapmamalıyız. R test etmek için kapı (lar)oom dışarıda oturum "Girmeyin" olmalıdır.
5. Konular için bir test sipariş levha gecikme ve her konu için günün saatini yanı sıra herhangi bir alanı kaydetmek için konu testleri, oturum sayısı, her bir konu için kaçış kafesin delik sayısı konumu, ve alanların sırasını listeler gerekli notları (Şekil 6).
6. İlk sıçan test edilecek önce 30-60 dak, alışkanlık sağlamak için test odasına evlerinde kafeslerde hayvan getirmek.
7. Sıçan bir deneme başında içine yerleştirilen merkezi boru labirent merkezinde yer almaktadır. Üstüne ilk hayvan kimliğini gösteren karton sayfasını ayarlayın. Bu video kayıt videonun ilk birkaç saniye gözlemleyerek her konunun kolay tanımlanması için hayvan kimlik yakalayabilirsiniz.

İlk Test 1. Gün:

1. Bilgisayar video kaydı başlar (eğer kullanılıyorsa) ve Subj için hayvan kimlik levha ile deneme yaklaşık 5 saniye dahilvb tanımlama. Dosya adı (ya da oluşturulan tarih) testi gün / zaman belirleyecektir.
2. (Birden çok hayvanlar kafeste ise kimliğini kontrol edin) ve yavaşça kaçış kafesin içine kafa ilk yer onun ev kafesinden ilk hayvan çıkarın. Ekstra bir sahte dip kaçış kafesi örtün ve 2 dk sayacını başlatmak. Bu hayvan kaçış kafese alıştırmak için izin verir.
3. 2 dakika zamanlayıcı sona erdikten sonra, yavaşça, (hem de yanlış alt kapağı çıkarın ve uzak labirent set) kaçış kafesinden hayvan kaldırmak asansör kimliği levha ve hemen merkez tüp içindeki sıçan yerleştirin. Karton ID levha ile merkez tüp üst kapağı.
4. Ve yavaşça karton kapaklı merkezi tüp kaldırın ve bir kenara koyun. Merkezi boru hayvan üzerinde kaldırıldığında olarak kronometreyi başlatın. Tester sandalyede oturmak taşı.
5. Hayvan ve kronometre hem izlerken, sandalyede sessizce oturun. Her bir hayvan, çıkış kafes bulmak için 5 dakikalık bir maksimum vardır.
6. Sıçan de çıkış kafes bulursa daha ucuz5 dk test sipariş kağıda kronometre ve kayıt gecikme ve günün zamanı durdurmak. Kaçış Kafesinden hayvan kaldırmak ve eve geri kafesin içine yerleştirin.
7. Sıçan 5 dakika içinde kaçış kafesi bulamazsa, yavaşça kaçış kafesine hayvan rehberlik ve 15 sn kaldırılması ve ev kafesine hayvan dönmeden önce geçmesine izin verir.
   1. Bu 15 sn süre deney odasının duvarına ikinci el ile bir saat kullanarak zamanlı olabilir.
   2. Sıçan kaçış kafesi bulamadık test düzeni levha ve rekor günün rekor zamanı.
8. Rat düşerse / süre kronometre de test gerektiği bakışta, labirent kapalı atlar. Tester sonra hızlı hayvanı almak için çalışmalıdır.
   1. Bu 10 saniye içinde yapılabilir eğer, labirentin merkezine üzerine hayvan değiştirin ve test sayfasına (tester bir düşme veya atlama ayırt edebilir, bu ifade edilmelidir) üzerindeki sonbahar / atlama zamanını kaydetmek. Denemeye devam edin.
   2. Ani almak durumundamal, 10 saniye daha uzun sürer kronometreyi durdurmak ve geri eve kafese hayvan koymak. Sonbahar / atlama kayıt zamanı (test cihazı bu not, düşme veya atlama ayırt eğer).
   3. Bir hayvan / düştü atladı ve 10 saniye içinde alınamadı hangi çalışmalardan elde edilen veriler istatistiksel analizler çıkarılmıştır.
9. Bilgisayarınızda video kaydı durdurun. Dava hakkında herhangi bir yorum kaydedin.
10. , Labirent üst herhangi bir idrar veya dışkı çıkarmak% 70 etanol ile sprey, ve iyice kurulayın. Kaçış kafesini çıkarın ve% 70 etanol ile temizleyin.
11. Sonraki konu için belirlenen yerleşim temiz bir kaçış kafes koydu. Birden fazla çıkış kafes sahip kuru hava her etanol kokuyu azaltmak için izin verir. (Bir delik ama yanlış bir tabana sahiptir ve bir delik kaçış kafesi içerecek şekilde) Önceki deliğe temiz bir yanlış alt koydu.
12. Labirent merkezinde sonraki konu ID levha ile merkez tüp ayarlayın. Bilgisayarınızda video kaydı başlar.
13. (Gün / Oturum 1 ise) ve 2 dk zamanlayıcıyı başlatmak, test edilecek bir sonraki hayvan çıkarın kaçış kafesin içine yerleştirin (yalnızca Gün / Oturum 1 ise). Yukarıdaki 2. adımdan devam edin. Her konu 1 deneme / gün alır.
14. Tüm hayvanlar test edildikten sonra, labirent temizlemek ve kafes kaçış, havai ışıklar ve beyaz gürültü kapatın. Kapı (lar) dan işaretini (ler) "Girmeyin" çıkarın.

Gün 2 7 Test yoluyla

1. Test odası kurmak ve yukarıda açıklandığı gibi test için labirent.
2. Üstüne ID levha ile labirent merkezinde merkezi tüp ayarlayın. Video kaydı başlar. Evde kafes ilk hayvan çıkarın ve merkez tüp içine yerleştirin.
3. Bu adım Gün 1 Gün 2-7 farklılaştıran, özellikle gün 2-7, konu yapılmaz evde kafes kaldırma ve kaçış kafes içinde 2 dk alışma süresinden sonra merkez tüp içine doğrudan yerleştirilir.
4. Yukarıdaki adım 4 itibaren işlemi tekrarlayın.

3. İstatistiksel AnalizBarnes Labirent bitiş noktaları için

1. Veri analizleri çeşitli istatistiksel testler gerekebilir. Bu tür gecikme ve hata oranı gibi sürekli değişkenler, uzay ve zaman ⁵² bölünmüş bir arsa olarak analiz edilebilir.
2. Bazı hayvanların maksimum ayrılan süre içinde kaçış veya ev kafesi bulun yoksa, gecikme veri maksimum olarak atanan ve SAS versiyon 9.2 yazılım analizi de ProcLife test kullanılarak analiz edilebilir.
   1. Bu yöntem, istatistiksel bir üst sınır kesim var olan davranış verileri için yararlıdır.
3. Arama strateji veri PROC GLIMMIX ve SAS 9.2 sürümü yazılım analizi ile bir tekrarlanan ölçü tasarım kullanılarak analiz edilebilir.
   1. Bu ilk analiz kümülatif bunu log linki ve her üç arama stratejileri (rastgele seri ve direkt) bu analize dahil olduğu böyle bir terimli dağılımı kullanır.
   2. Hayvanlar daha verimli arama stratejisi (doğrudan), bir secon kullanmayı öğrenme olup olmadığını belirlemek içinİki daha az verimli strateji (random ve seri) bir araya getirilmiş ve daha verimli bir doğrudan arama stratejisi ile mukayese edildiği arama stratejisi d analizi gerçekleştirilebilir.
   3. Bu ikinci yöntem, bir binom dağılımı ile sonuçlanır ve aynı zamanda İŞLEM GLIMMIX kullanır.

Sonuçlar

Cinsel olgun erkek geyik fareler yaygın çevre boyunca dissemine potansiyel üreme ortakları bulmak için gelişmiş mekansal seyir yeteneği bağlıdır. Prenatal ve testosteron yetişkin maruz Hem bu daha sonra yetişkin erkek davranışı ⁵³ organize ve aktive gereklidir. Bunun gibi, endokrin bozucu bileşiklere erken maruz kalma erkeklerde daha sonra bu özellik rahatsız olabileceği tahmin edildi. Bu hipotezi test etmek için, erkek ve dişi geyik fareler gelişimsel bir fitoöstrojen ücretsiz diyet,...

Tartışmalar

Barnes labirent test prosedürlerinde kritik adımlar şunlardır: 1), kaçış kafes bulmak için hayvan motive etmek için uygun hafif caydırıcı bir uyarı sağlayan 2) personel, dış gürültü kontrolü, test (tekdüze koşullar hayvan deneylerinde boyunca korunur örneğin test zaman sağlanması ve performansını etkileyebilecek diğer uyaranlara), 3) deneyleri Video optimize ve sağlanması uygun video kayıt ve geri dosya, kayıt, ve 4)% 70 etanol ile labirentin temizlik denemeleri arasında koku i...

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
NOTE: Those items that are for small rodents only are bolded. Those items that are for large rodents only are italicized. Items neither bolded nor italicized are for both.
Barnes Maze platform with 12 or 20 escape holes every 30°. For rats, each hole is 10.5 cm in diameter and 4 cm from the maze top edge. For use with automated tracking programs, a black top for white rodents or a white top for pigmented rodents is needed. For mice and rats, this circular top is 95 and 122 cm in diameter, respectively.	US Plastics Corp, Lima, OH	42625	This is the top of the Barnes Maze and the surface that the rodent is placed upon. It can be constructed from a variety of materials (e.g., Plexiglas), but for endocrine disruptor work, polypropylene BPA-free material is optimal. One of the holes leads to the an escape cage; all other holes are blind-ending or false-bottomed. For the rat maze, small slides on the underside of the maze platform allow the escape cage and false bottoms to slide in.
2 in Polypropylene pipe plug (24) 2 in 90° Black polypropylene elbow (12) 2 in x 6 in Polypropylene pipe nipple (1)	US Plastics Corp, Lima, OH	30724 32086 30712	These are only necessary for the small rodent (e.g. mouse) Barnes Maze. These adaptations are either blind-ending tubes/elbows or one of the tubes is connected to the pipe nipple that then leads to the escape cage.
False bottoms for rat Barnes Maze			These were custom made of ABS plastic and vacuum molded for the rat maze apparatus.
Circular aluminum wall/barrier (50 cm high) around the maze	Ace Hardware, Columbia, MO		In the case of small rodents (e.g., mice), this barrier prevents them from falling off the maze; the rat apparatus generally does not require this. The wall may not be needed for laboratory mice that are relatively tame.
Support stand for maze platform top	US Plastics Corp, Lima, OH	42625	The stand supports the maze platform top such that it is elevated above the floor (typically, 70-100 cm) to motivate the rodent to locate the escape cage. The stand can be constructed of any material.
White noise	SleepMate Sound Conditioner, Marpac, Rocky Point, NC	980A	Background noise may be used to block out peripheral acoustic cues that may confound Barnes Maze testing across trials and animals
Light fixtures and 300-500 W bulbs encased in aluminum shells. For example, Utilitech 500 W halogen portable work lights.	Ace Hardware or Lowes		Bright lights provide a mildly aversive stimulus which motivate the rodent to locate the escape cage. The lights are generally suspended ~150 cm above the maze top.
Escape cage. For small rodents, this can be a polypropylene cage (27.8 cm x 7.5 cm x 13 cm).	Ancare, Bellmore, NY	N40 PP	The rat escape cage here was custom built and has a ramp leading into the escape cage.
Opaque tube (rats only) (27 cm diameter; 23 cm height) with a piece of thick cardboard to cover the top.			The tube is placed in the center of the maze and the rat is placed into the tube from the top which is covered with the cardboard. A handle on the outside of the tube allows easier lifting of the tube, which then begins the trial. The tube can be constructed of any material, but should be opaque.
High resolution video camera (e.g., Panasonic Digital Video Camera)	Panasonic, Secaucus, NJ	ICV19458	The video camera is positioned overhead and records trials for later analysis.
Extra- or intra-maze geometric cues made of high quality cardboard construction paper	any office supply store, such as Staples		These visual cues orient the animal within the maze environment, providing cues as to the spatial location of the escape cage; in rats, extra-maze cues on the walls work well, whereas in small rodents that require a wall around the maze, intra-maze cues must be used.
Black curtain to surround the maze (small rodents only)	any fabric and crafts store, such as Jo-Ann Fabrics		A black curtain is used in small rodents (especially wild species, e.g. Peromyscus) to maintain attention within the maze confines.
70% Ethanol	Fisher Scientific	BP2818-4	After each trial, the maze top and escape cage are cleaned to eliminate potential odor cues for consecutively tested rodents.
Tracking software program, such as Ethovision, and computer with appropriate video card and substantial (1 TB or more) hard-drive space. Alternatively, videos can be recorded directly to the computer for later analysis using a program such as Win TV (Hauppauge Computer Works, Inc.).	Noldus (Leesburg, VA)		Tracking software is required to analyze trials for latency to locate the escape cage, velocity, distance traveled, time spent resting, time spent moving, time spent in the correct versus incorrect quadrants, time spent around the escape hole, number of errors or entries into incorrect holes, and overall search strategy employed to find the escape cage.
External hard drives, such as Seagate or WD, with a minimum 1-2 TB of memory	Any office supply store, such as Staples.		Videorecordings should be backed up in at least one separate location.
Videorecording program, e.g. WinTV program	Hauppauge Computer Works, Inc., Hauppauge, NY		If tracking software is not available at the time of the testing, the trials should be video-recorded for later analysis