Karbon Nanotüpler tarafından Stabilize İçeriden Kendinden monte Lipid Parçacıklar uyduruk hazırlanması

Özet

We report on a smart application of carbon nanotubes for kinetic stabilization of lipid particles that contain self-assembled nanostructures in their cores. The preparation of lipid particles requires rather low concentrations of carbon nanotubes permitting their use in biomedical applications such as drug delivery.

Özet

Biz karbon nanotüpler (CNT) tarafından stabilize nano yapılı lipid parçacıkları hazırlamak için bir kolay yöntem mevcut. duvarlı Yalnız (saf) ve çok duvarlı (fonksiyonalize) CNT Pickering tipi yağ-içinde-su (W / O) emülsiyonları üretmek için stabilize edici olarak kullanılır. Lipidler, yani Dimodan U ve fitantriol fazla suyun çift sürekli kübik Pn3m faz halinde kendi kendine birleşebilen emülgatörler kullanılmaktadır. Bu yüksek viskoz faz, geleneksel yüzey aktif madde stabilizatörler ya da CNTs Burada yapıldığı gibi mevcudiyetinde bir prob ultrasonikatör kullanılarak küçük parçacıklara parçalanır. Başlangıçta, CNT (toz halinde), son emülsiyonun oluşturulması için, erimiş lipid daha ultrasonikasyon ve ardından su içinde disperse edilir. Bu işlem sırasında CNT da ay stabil olan bir parçacık halinde bir emülsiyon meydana getirmek üzere, lipid damlacıkları çevreleyen olduğu kabul edilir lipit molekülleri ile kaplanmasıyla. CNT-stabilize nano yapılı lipid parçacıkların ortalama boyutu mikron altı r olanparçacıklar ile karşılaştırır ange, geleneksel yüzey aktif kullanılarak stabilize. Saf lipid fazı (dökme devlet) ile karşılaştırıldığında küçük açı X-ışını saçılması veri CNT-stabilize lipid dispersiyonlan orijinal Pn3m kübik faz tutma doğruluyor. Maviye kayma ve karakteristik G ve Raman spektroskopisi gözlenen CNTs G 'bantlarında yoğunlukları düşürülmesi CNT yüzeyi ve lipid molekülleri arasındaki etkileşimi karakterize eder. Bu sonuçlar, CNTs ve lipid arasındaki etkileşimler, sulu çözeltiler içinde, karşılıklı stabilizasyonu için sorumlu olduğunu göstermektedir. stabilizasyon için kullanılan CNTs konsantrasyonu çok düşüktür ve lipit molekülleri CNT işlevselleştirilmesi mümkün olduğu gibi, CNTs toksisitesi kendi biyouyumluluk oldukça gelişmiş ise önemsiz olduğu tahmin edilmektedir. Bu nedenle, bu yaklaşım, m verilmesi için hibrid nanocarrier sistemleri geliştirmek için, örneğin, çeşitli biyomedikal uygulamalarda büyük bir potansiyele bulurultiple bileşik tedavide ya da çoklu tedaviye olarak işlevsel moleküller.

Giriş

Son birkaç yılda, nanoteknoloji, özellikle kanser ¹ olarak azılı hastalıklarla mücadele için ilaç klinik öncesi geliştirme alanında güçlü bir araç olarak ortaya çıkmıştır. Bu bağlamda, yoğun böyle ilaçların, proteinler, nükleik asitler, gen ve teşhis görüntüleme maddeleri ^1-4 olarak çeşitli aktif biyomoleküllerin dağıtım aracı olarak incelenmiştir mil boyutu <1.000 ile nano ölçekli yapılar. Bu biyomoleküllerin da nanopartiküller kapsüllenen veya nanopartiküllerin yüzeyi üzerine konjüge edilmiş ve bu pH ya da ısı ^5,6 şekilde tetikleyiciler tarafından etki yerinde bırakılır edilir. boyut olarak çok küçük olmasına rağmen, bu nanopartiküller büyük yüzey alanı, aktif biyomoleküllerin hedeflenmiş dağılım için büyük ölçüde avantajlı olduğunu kanıtlamaktadır. Parçacık boyutu ve biyolojik uyumluluk üzerinde kontrol terapötik etkinliği ve dolayısıyla nanopartiküller ^7,8 uygulanabilirliğini optimize etmek için büyük önem taşımaktadır.Lipidler ^9-13, polimerler ^14,15, metaller ^16,17 ve karbon nanotüpler ^18,19 sık çeşitli biyomedikal ve ilaç uygulamaları için nanocarriers olarak istihdam edilmiştir.

Ayrıca, lipit kendi kendini monte nanoyapıların dayalı nanocarrier uygulamaları, gıda ve kozmetik endüstrileri ^20,21 dahil olmak üzere birçok diğer disiplinlerde geniş bir öneme sahiptir. Örneğin, bu tatlılar ^24, örneğin gıda stabilizatörleri olarak, protein kristalleştirme ²² biyomoleküllerin ²³ ayrılmasında kullanılan ve bu besin maddeleri, aromalar ve parfümler ^25-31 aktif moleküllerin teslim edilir. Kendinden monte lipit nanoyapılar ancak kontrollü ve hedeflenen bir şekilde ^32-38 biyoaktif molekülleri serbest yeteneğine sahip değil ama onlar da kimyasal ve enzimatik yıkımı ^39,40 fonksiyonel molekülleri korumak edebiliyoruz. düzlemsel akışkan iki tabakalı en comm olmasına rağmensuyun mevcudiyetinde amfifilik lipit moleküllerinin oluşturduğu nano üzerinde örneğin altıgen ve kübik gibi diğer yapılar da genel olarak ^20,41,42 görülmektedir. Oluşan nano tipi Lipitler "moleküler şekil yapısı, su içinde yağ bileşimi hem de sıcaklık ve basınç ⁴³ gibi kullanılan fiziko-kimyasal koşullarına bağlıdır. düzlemsel olmayan lipid nano uygulanabilirliği özellikle de kübik fazlarının, çünkü onların yüksek viskozite ve homojen olmayan etki tutarlılık sınırlıdır. Bu sorunlar, bir yağ-içinde-su (W / O) mikron veya mikron altı boyutta lipid parçacıkları içeren emülsiyonlar oluşturmak üzere su içinde büyük miktarda lipid nano dağıtılmasıyla yenilmektedir. dağılmış parçacıklar içindeki orijinal yağ kendi kendine monte edilmiş yapısını koruyarak Bu şekilde, düşük bir viskozite uygun bir ürün hazırlanabilir. ISAsomes ⁴⁴ olarak kısaltılmıştır, bu dahili kendi kendini monte parçacıkların oluşumu ( Örneğin, kübik fazlar ve altıgen fazlardan hexosomes) gelen cubosomes yaygın olarak, yüksek enerji girişinin adımı ve bu tür yüzey aktif veya polimerler gibi stabilizatörler ilave bir kombinasyonunu gerektirir. Bu doğrultuda son araştırmalar silika nanopartiküller ^46, uygun Pickering ⁵¹ veya Ramsden-Pickering emülsiyonlar ⁵² olarak adlandırılan Anılan emülsiyonlar, stabilizasyonu için kil ^47-49 ve karbon nanotüpler ⁵⁰ dahil olmak üzere çeşitli katı parçacıkların ⁴⁵ uygulamasını göstermektedir.

Son yıllarda, karbon gibi tek duvarlı karbon nanotüpler (SWCNTs) olarak nano tabanlı, çok duvarlı karbon nanotüpler (MWCNTs) ve fulleren yeni biyomalzeme ^53,54 olarak dikkat büyük bir aldık. Ana endişeleri onların toksisite ^55-58, su insolubility ⁵⁹ ve dolayısıyla onların biyouyumluluk ⁵⁶ vardır. Bu sorunları çözmek için etkili bir yöntem yüzey işleviBu lipidler gibi toksik olmayan ve biyo-uyumlu molekülleri kullanarak layan serbestleştirme. Suyun varlığında, lipidler, lipid hidrofilik baş grupları su ^60,61 bunların çözünürlüğü veya dağılmasına yardımcı ise CNTs hidrofobik yüzey polar sulu ortamdan korunacak şekilde CNTs etkileşim. Lipidler dolayısıyla dekorasyon ideal CNTs in vivo toksisite azaltmalıdır, hücresel organellere yanı sıra bazı gıda maddelerinin ayrılmaz bileşenleridir. CNTs ^18,19 ve lipid nano ^9-13 bağımsız Dayalı Biyomedikal uygulamalar geniş geliştirilme aşamasındadır ama iki özelliklerini birleştiren uygulamalar henüz iyi araştırılmış değildir.

Bu çalışmada, lipidlerin iki farklı tip ve MWCNTs hidroksil ve karboksil gruplarıyla beraber çalışanlar- oysa SWCNTs bozulmamış biçimde olmak üzere CNTs üç tip kullanmaktadır. Bu yazıda, dispersiyonlar hazırlamak için CNTs çok düşük konsantrasyonlarda kullanılmışStabilite çeşitli faktörler, örneğin, lipid türü CNT Çeşidi CNT kullanılan, hem de güç ve süresi gibi kullanılan sonikasyon parametreleri üzerinde lipidin oranına bağlıdır. Bu video protokolü kinetik çeşitli CNT-stabilize edici maddeler kullanılarak lipit nanopartiküller stabilize bir yöntemin teknik detayları sağlar.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protokol

Dikkat: Bu çalışmada kullanılan CNT hacim olarak muadillerine göre daha fazla tehlike olabilir nanopartikülat formunda bulunmaktadır. Grafit solunması, hem doğal hem sentetik, kömür işçilerinde görülen pnömokonyoz benzer pnömokonyoz ⁶² neden olabilir. Ayrıca, CNTs ^63-68 inhalasyonu ile ilişkili akut ve kronik toksisite karbon bazlı nanoyapılarda toksisitesi ve önceki çalışmaların bazıları ile ilgili endişeler var öneririz olmuştur. Bu nedenle, ince CNT tozu solumaktan kaçınmak ve büyük bir özenle ele. Solunması durumunda, temiz havaya çıkın. Nefes almakta güçlük çekiyorsa, saf oksijen yerine kullanmak ve tıbbi danışma başvurun. CNTs Çözümü / dağılma formülasyonları yerine işlemek için güvenlidir.

Dikkat: Lipidler ve bu çalışmada kullanılan yüzey aktif maddeler gıda sınıfı malzemeleri ve genel olarak bu şekilde tehlikeli olmayan, ama onlar son derece yanıcı da Gözleri ve cildi tahriş edici ve vardır. Dolayısıyla, bu tür tr kullanımı gibi tüm uygun güvenlik uygulamalarını kullanınMühendisliði denetimleri (davlumbaz) ve kişisel koruyucu donanımlar (koruyucu gözlük, eldiven, laboratuvar önlüğü, tam uzunlukta pantolon, kapalı-toe ayakkabılar) taşıma veya hazırlamak nanoparçacık örnekleri. ciltte veya gözlerde, en az 15 dakika boyunca bol miktarda su ile yıkayın cilde ve göze temas etmesi halinde. Gerekirse bir doktora başvurun.

Lipid / Su Toplu Aşama 1. Hazırlık

Dikkat: 4 ° C'de buzdolabında lipidleri saklayın. Saf derece lipidler dondurucuda muhafaza edilmelidir (-20 ° C). Bütün hisse senedi ve kullanım rahatlığı kirlenmesini önlemek için küçük cam şişe içine onları alikotu. CNTs ve yüzey aktif dahil olmak üzere diğer kimyasallar oda sıcaklığında saklanan ama direkt güneş ışığından uzak tutmak olabilir.

1. Yani lipidler, tutmak, Dimodan U (DU) ve nem yoğunlaşmasını önlemek için şişe / şişe kapağı açmadan önce 15-20 dakika boyunca oda sıcaklığında fitantriol (PT).
   (Not: DU% 96 monogliseritleri ve içeren bir damıtılmış gliserittirgeri kalanı digliserid ve serbest yağ asitleridir. DU iki büyük monogliserid bileşenleri linoleati (% 62) ve oleat (% 25) 'dir. Bu nedenle, DU hidrofobik kısmı esas olarak aşağıdaki gibidir tam bileşimi olan C18 zincirleri (% 91), ihtiva etmektedir; C18: 2 (% 61.9), C18: 1 (% 24.9), ve C18: 0 (% 4.2), C18 18C-zinciri ve kolon sonrası sayısını gösterir C = C bağlarının sayısını gösterir. PT 3,7,11,15-tetrametil-1,2,3-hexadecanetriol optik izomerlerin bir karışımıdır. Bir ester işlevsel grubunu ihtiva etmeyen, fakat bir tri-hidroksi baş grubu ile yüksek ölçüde dallı phytanyl kuyruk oluşur etmez. DU ve PT her ikisi de kararlı lipid parçacıkları ^{13, 45)} çekirdek için de geçerlidir fazla suyun mevcudiyetinde kübik fazlar oluşturur.
2. bir sıcak su banyosu ya da 60 ° C üzerinde tutulan bir bardak içeren su içinde şişeleri koyarak lipitler eriyik (manyetik karıştırıcı ısıtma: 230 V, 50 Hz, 630 W veya benzeri bir çanak içinde su ısıtmak için kullanılır).
3. Alternatif ısı şişeler blok ısıtıcılar kullanarak. Isı akışı ve daha sonra lipit ayrışmasını önlemek için, sıcak bir plaka üzerinde, doğrudan şişe ihtiva eden bir lipidin ısı verme.
4. bir lateks ampullü Pasteur cam pipet kullanılarak, (konik ek kap, 1.5 mi) ile, daha önce tartılmış mikrosantrifüj tüpü içinde erimiş lipid 500 mg, tartılır.
5. Yukarıdaki mikrosantrifüj tüpüne ultra saf su 500 ml (su direnci = 18.2 • cm) ekleyin.
6. küçük (özel inşa edilmiş) spatula kullanılarak 15 dakika elle bileşenleri karıştırın. Bir Pense kullanarak bir şırınga iğnesi (0.9 mm x 40 mm kanül uzunluğu) keskin ucunu düzleşme böyle bir spatula yapın.
7. Santrifüj 2,000 X g hızda 10 dakika için lipit / su karışımı. Yine daha sonra 24 saat için dengelenmeye, 10 dakika boyunca elle karıştırın. örnekleri karakterize önce, 5 dakika boyunca her karıştırıldı ve daha sonra oda sıcaklığında bırakın.
8. Tüm boru boyunca bir denge lipit fazının oluşmasını sağlamak için, yaklaşık 10 donma-erime döngülerinden ve inte gerçekleştirmek rmittently yukarıda tanımlandığı gibi bir santrifüjleme adımı yürütmek. Hem DU ve PT formu yüksek viskoz toplu lipit fazları zor elle (Şekil 1) bunları işlemek için yapım.
   Not: Bir yığın lipit fazı ile nanostructural davranış (kafes tipi ve öz-montaj boyutları) dağılmış parçacıkların karşılaştırmak gibi ve / veya onaylamak için bir kontrol olarak kullanmak olsaydı yukarıdaki protokol (bölüm 1), sadece gerekli olan orijinal nano tutma.

Farklı CNT-stabilizatörler, yani SWCNT kullanılarak yüksek enerji girişini (ultrasonikasyon) kullanılarak yüksek ölçüde zor akışlı lipit fazı akışkan kıvamda O / W emülsiyonunun ayrı parçacıklı Şekil 1. Hazırlık MWCNT -OH, MWCNT-COOH (referanstan yeniden rakam [50] ) Kimya Royal Society izni ile._upload / 53489 / 53489fig1large.jpg "target =" _ blank "> bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Lipit partiküllerinin stabilize sürfaktan 2. Hazırlık

1. su içinde (ağırlık / ağırlık) yüzey aktif madde (Pluronic F 127) çözeltisi, 0.2% hazırlayın.
   1. (Manyetik bir karıştırma çubuğu kullanılarak, manyetik plaka), 20-30 dakika için karıştırma ile 100 mi ultra saf su içinde yüzey aktif madde (beyaz yumuşak bir toz) 200 mg eritin. Pluronic F 127 iyonik olmayan bir yüzey aktif madde ve genellikle emülsiyon stabilize edici madde olarak kullanılmaktadır. Bu PEO ₉₉ -PPO ₆₇ -PEO ₉₉ bir üç-bloklu kopolimerdir, ve bu nedenle, su içinde çözülür, uzun bir zaman alır.
2. Bir cam şişeye (folyo kaplı üre kap, 20 mi ile donatılmış sintilasyon soda-kireç) (Pasteur cam pipet kullanarak) eritilmiş DU veya PT 500 mg ekleyin.
3. % 0.2 F127 çözeltisi 9.5 g ekleyin.
4. Sonda ultrasonication makinede, sıkıca imbik flakon çene standı kelepçe (Balon ile Set Standıo sonication tarafından oluşturulan titreşimleri dayanabilir ki, kelepçe, taban, çubuk, kauçuk 3 çene ve nivo) standı.
5. Hücre Sonikatör bağlı katı titanyum alaşımlı probu (13 mm çap x 139 mm uzunluk) yerleştirin. onun yanında ve alt prob temas etmediğinden emin olmak için şişenin yüksekliğini ve konumunu ayarlayın. prob ucu cam şişenin dibinde arasında 0.5 cm'lik bir mesafe iyi sonuçlar verir.
6. güç (maksimum) 35% 1 sn gecikme süresi ile aracılı 1 sn darbe ile bir atımlı modda, 10 dakika boyunca karışımın sonikasyon. flakon nedeniyle sonication sırasında oluşan ısı çok ısınır. Bu nedenle, kelepçe kapalı çekmeden önce oda sıcaklığına soğumaya bırakın.
7. en az 24 saat önce, daha sonraki kullanım için oda sıcaklığında süt oluşturulmuş dispersiyon saklayın. Bu faz ayrılmasına karşı stabilitesini sağlamaktır.
   Not: Bir kağıt havlu ile, aseton ile kuru temizlemek öncesi ve prob kullandıktan sonra, daha sonra saf su ile durulayın Anbir kez daha kurulayın d.

Su saf CNTs dispersiyonlarının 3. hazırlanması

1. iki ayrı kap içinde, siyah renkli, her ikisi de MWCNT-OH, ve MWCNT -COOH toz 4 mg, tartın.
2. Her behere 500 mi ultra saf su ilave edilir. güç (maksimum) 40%, sürekli bir sinyal modunda 2 dakika boyunca ses dalgalarına maruz karışımları ultrasonikatör bir prob kullanılarak. MWCNT dispersiyonun elde edilen konsantrasyon 8 mg / ml (stok solüsyon) 'dir.
3. 6.25, 5, 4, 2 ug / ml MWCNT dispersiyonlar elde etmek için, aşırı saf su, uygun miktarda MWCNT stok çözeltisi ile seyreltilir.
4. daha önce açıklandığı gibi bu dağılımlar (3.2) ses dalgalarına maruz.
5. Benzer bir şekilde, 6 ug / ml SWCNT dispersiyonu (stok çözelti) yapmak için 500 mi ultra saf su içinde toz haline getirilmiş SWCNT 3 mg (renkli da siyah) dağıtılır.
6. SWCNT stok çözelti seyreltilir ve (3.2) yukarıda tarif edildiği gibi, 0.5, 0.4, 0.3125, 0.2 ug / ml SWCNT dağılma elde etmek için bunları sonikasyonrsions.
   Not: Tüm dispersiyonlar, yaklaşık 30 dakika boyunca açık sonra CNT dibinde biriken başlar.

CNT stabilize Nano yapılı lipid parçacıkları 4. hazırlanması (Şekil 1)

1. Bir cam şişe içinde eritilmiş DU 500 mg tartılır.
2. şişeye 6 ug / ml SWCNT dispersiyon 9.5 ml.
3. Saf CNT dağılımların (3.2) yapımında kullanılan ile aynı parametreler kullanılarak CNT-DU karışımı sonikasyon. Oda sıcaklığına soğutulduktan sonra, korunmuş dahili kendi kendini monte nano ile CNT-stabilize lipid parçacıkları hazır olur.
4. Benzer bir şekilde, 0.4 ug / ml ve 0.2 ug / ml SWCNT dispersiyonları kullanarak lipid parçacıkları hazırlamak.
5. MWCNT-OH ve MWCNT-COOH kullanılarak fakat farklı konsantrasyonları CNT yani 8, 4, 2 ug / ml kullanarak lipid parçacıkları yapmak için protokolleri 4.4'e 4.1 izleyin.
6. Benzer bir şekilde, 4 ug / ml MWCNT-OH ve MWCNT kullanılarak üç farklı CNT-PT dispersiyonların hazırlanması-COOH Olarak 0.4 ug / ml SWCNT. CNT-PT dağılımları daha az güç (maksimum% 35) ama sürekli pulse modunda uzun süre (15 dk) gerektirdiğini unutmayın. RT'ye dağılımların soğutun ve onları karakterize önce 24 saat boyunca onları terk.
   Not: Sonikasyon parametreleri (DU burada PT gibi) ve farklı bileşimler için farklı lipidler için farklı olabilir; bunlar iyi stabilize dispersiyonları elde etmek için optimize edilmelidir.

5. CNT-stabilize Lipid Dispersiyon İstikrar İzleme

1. görsel gözlem ile dağılımların istikrarı Monitör: dağılımlar istikrarsızlaştırdı olup olmadığını kontrol edebilir veya topaklar dispersiyonlar oluşan varsa.
2. düzenli aralıklarla (dijital kamera ile) fotoğraf çekin. Örneğin, şartının gibi bir ay sonunda bir kez daha sonra bir hafta boyunca her gün önümüzdeki iki hafta boyunca haftada bir kez, ardından ilk haftasında her gün dağılımlarının fotoğraf çekmek ve.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Sonuçlar

Aşağıdaki sonuçlar dispersiyonların a) stabilite, lipid parçacıkları b) boyutu dağılımına, kendini montaj ve D C) tipi) CNTs lipid kaplama için kanıt oluşturmaktadır. Dağılımların kararlılık (Şekil 2) otomatik odaklama ve LED flaşlı 5 MP kamera ile izlendi.

Şekil 2. Durağan emülsiyonlar sadece b...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Tartışmalar

Lipit partiküllerinin stabilizasyonu
Üç farklı CNT lipid dispersiyonlarının stabilize etmek için kullanılırlar; iki çok duvarlı ve -OH ve -COOH grupları kullanılarak işlevselleştirilmiş olan ve bir duvarlı ve (bozulmamış) işlevselleştirilmemiş tektir. MWCNT-COOH: (çap x uzunluk) aşağıda CNTs içinde gösterilmekte 9.5 mil x 1.5 um; MWCNT-OH: 15/8 nm x 50 mm; SWCNT x 1-3 um 1-2 mil. toz haline getirilmiş CNT prob ultrasonikasyonla su içinde dağıtılmıştır. CNTs yuk...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Dimodan U	Danisco	15312	Store at 4 °C. Non-hazardous. Irritant to eyes and skin.
Phytantriol (> 95%, GC)	TCI Europe N.V.	P1674	Store at 4 °C. Non-hazardous. Irritant to eyes and skin.
Single walled Carbon Nanotubes (90%)	Nanostructured & Amorphous Materials, Inc.	1246YJS	Store at room temperature. Away from direct light. Irritating to eyes, skin and respiratory system.
Multi-walled carboxylic acid functionalized Carbon Nanotubes (> 80% Caron basis, > 8% carboxylic acid functionalized)	Sigma-Aldrich Co. LLC	755125	Store at room temperature. Away from direct light. Causes serious eye irritation. May cause respiratory irritation.
Graphitized Multi-walled hydroxy functionalized Carbon Nanotubes (99.9%)	Nanostructured & Amorphous Materials, Inc. (NanoAmor)	1224YJF	Store at room temperature. Away from direct light. Irritating to eyes, skin and respiratory system.
Pluronic F127	Sigma-Aldrich Co. LLC	P2443	BioReagent, suitable for cell culture. Not a hazardous substance or mixture. Store at room temperature.
Acetone (99.5%)	Fisher Scientific	10134100	Highly flammable liquid. Causes serious eye irritation. May cause drowsiness or dizziness.
Jars with loose, enfolding lids (375 ml)	VWR International Ltd	216-3308
Beaker, 1,000 ml	Fisher Scientific	12942161	heavy duty, low form, with spout and graduations
Pasteur glass pipette (150 mm length) with latex bulb	Fisher Scientific	10006021
Microcentrifuge tube conical snap cap 1.5 ml	Fisher Scientific	11558232
Spatula	Fisher Scientific	11352204
Heating magnetic stirrer	Fisher Scientific	11715704
Magnetic stirrer bars (cylindrical, opaque PTFE, 30 mm x 7 mm (l x diameter))	Fisher Scientific	10011792
Needle (0.9 mm x 40 mm cannula length)	Terumo UK Ltd	MN-2038MQ
Retort Stand Set - With stand, clamp, base, rod, rubber 3 jaw and bosshead	Camlab Ltd, UK	1177157
Millipore water equipment	Barnstead Nanopure, Thermoscientific, USA
Progen Genfuge 24D Digital Microcentrifuge	Progen Scientific	C-2400
Probe ultra-sonicator, with 13 mm	SONICS, Vibracell,  USA
5 MP camera with auto-focus and LED flash	Samsung Galaxy Fame Mobile camera
Raman Spectrometer	Horiba Jobin-Yvon LabRAM HR800 spectrometer
Mastersizer 3000	Malvern Instruments Ltd, Malvern, United Kingdom
Small angle X-ray scattering (SAXS)	SAXSpace camera (Anton Paar, Graz, Austria), X-ray generating equipment (ISO-DEBYEFLEX3003, GE Inspection Technologies GmbH), closed water circuit (Chilly 35, HYFRA, Germany).