JoVE Logo
Yazarlar
Bize Ulaşın

Oturum Aç

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Farelerde ortodontik diş hareketi oluşturmak için bir protokol ve periodontal ligamentin kollajen liflerinin ve kan damarlarının bölümlenmeden 3D görselleştirilmesi için yöntemler sunuyoruz.

Özet

Ortodontik diş hareketi, dış kuvvetlerin bir sonucu olarak değiştirilmiş yumuşak ve sert doku tadilatının karmaşık bir biyolojik sürecidir. Bu karmaşık tadilat süreçlerini anlamak için diş ve periodontal dokuların 3D bağlamlarında incelenmesi ve bu nedenle herhangi bir kesit ve doku yapıtının en aza indirilmesi kritik öneme sahiptir. Fare modelleri genellikle gelişimsel ve yapısal biyolojinin yanı sıra küçük boyutları, yüksek metabolizma hızları, genetikleri ve kullanım kolaylığı nedeniyle biyomekanikte de kullanılır. Prensip olarak bu aynı zamanda onları dişle ilgili çalışmalar için mükemmel modeller yapar. Bununla birlikte, büyük bir engel, küçük diş boyutları, özellikle azı dişleridir. Bu makale, ortodontik diş hareketinin oluşturulması için adım adım bir protokol ve bir fare mandibular azı dişinin periodontal ligament fibrus bileşeninin 3D görüntülenmesi için iki yöntem sağlamayı amaçlamaktadır. Sunulan ilk yöntem, taze kollajen dokuların faz geliştirme görüntülemesini sağlayan bir mikro-BT kurulumuna dayanmaktadır. İkinci yöntem, kesit olmadan kemikten görüntülemeyi sağlayan ve endojen floresanları koruyan etil cinnamat kullanan bir kemik temizleme yöntemidir. Bu temizleme yöntemini Flk1-Cregibi muhabir farelerle birleştirmek; TdTomato, PDL ve alveolar kemikteki 3D vaskülatları görüntüleme fırsatı sağladı.

Giriş

Ortodontik diş hareketinde (OTM) altta kalan temel biyolojik süreç kemik tadilatıdır. Bu tadilat işleminin tetikleyicisi, periodontal ligamentin (PDL) yapısındaki hücreler arası matris (ECM) stresi, nekroz, kan damarı yıkımı ve oluşumu 1 ,2,3gibideğişikliklereatfedilir. Alveolar kemik tadilatı için diğer olası tetikleyiciler, kemikteki osteositler tarafından zorla algılamanın yanı sıra alveolar kemiğin kendisinin mekanik deformasyonu ile ilgilidir; ancak OTM'deki rolleri hala tam olarak aydınlatılmamıştır4,5.

OTM sırasında PDL'nin yapı-işlev ilişkilerini ortaya çıkarmayı amaçlayan birçok çalışmaya rağmen, net bir fonksiyonel mekanizma henüz tanımlanmamıştır6,7. Bunun başlıca nedeni, iki sert doku (çimento ve alveolar kemik) arasında bulunan yumuşak bir dokunun (PDL) verilerinin alınarak ele geçirildir. Yapısal bilgi toplamak için kabul edilen yöntemler genellikle PDL yapısını bozan ve değiştiren sabitleme ve bölümleme gerektirir. Ayrıca, bu yöntemlerin çoğu, bozulmamış olsa bile, yalnızca kısmi ve yerelleştirilmiş bilgiler veren 2D veriler sağlar. PDL yapısında ve işlevinde tekdüze olmadığından, tüm diş-PDL-kemik kompleksinin sağlam 3D yapısını ele alan bir yaklaşım garanti edilir.

Bu makalede, farelerde bir OTM oluşturmak için bir yöntem ve pdl'deki kollajen liflerinin numunenin herhangi bir bölümü olmadan 3D görselleştirilmesini sağlayan iki yöntem açıklanmaktadır.

Murine modelleri tıp, gelişim biyolojisi, ilaç teslimi ve yapısal çalışmalarda in-vivo deneyler için yaygın olarak kullanılmaktadır. Belirli proteinleri ve fonksiyonları ortadan kaldırmak veya geliştirmek için genetik olarak değiştirilebilirler; hızlı, tekrarlanabilir ve öngörülebilir gelişimsel kontrol sağlarlar; ayrıca küçük boyutları nedeniyle görüntüleri kolaydır8. Birçok avantajlarına rağmen, diş araştırmalarındaki fare modelleri, özellikle klinik manipülasyonlar garanti edildiğinde, çoğunlukla küçük boyutlu dişler nedeniyle sık kullanılmaz. Sıçanlar9,10,11,köpekler12,13,domuzlar14 , 15,16ve maymunlar17 gibi hayvan modelleri farelerden daha sık kullanılır. Yüksek çözünürlüklü görüntüleme tekniklerinin son zamanlarda gelişmesiyle, OTM'deki dolambaçlı süreçleri çözmek için bir fare modeli kullanmanın avantajları çoktur. Bu makale, kemik tadilatını tetikleyen sabit kuvvet seviyelerine sahip mandibuladaki azı dişinin mesial hareketini oluşturmak için bir yöntem sunun. Kemirgenlerdeki OTM deneylerinin çoğu maksillada yapılır, çünkü mandibulanın hareketliliği ve dilin varlığı başka bir karmaşıklık seviyesi ekler. Bununla birlikte, 3D yapısal bütünlük istendiğinde mandibula birçok avantaja sahiptir. Bütün bir kemik olarak kolayca parçalanabilir; bazı türlerde lifli senfonik yoluyla iki hemi-mandibulaya ayrılabilir; kompakt, düzdür ve herhangi bir sinüs alanı olmayan sadece dişleri içerir. Buna karşılık, maksilla kafatasının bir parçasıdır ve diğer organlar ve yapılarla yakından ilgilidir, bu nedenle alveolar kemiği ilişkili dişlerle parçalamak için kapsamlı bir bölümleme gerekir.

Faz geliştirme sağlayan yüksek çözünürlüklü bir mikro BT içindeki bir yükleme sistemine bağlı bir ev içi nem odası kullanarak, daha önce açıklandığı gibi3Dtaze lifli dokuları görselleştirmek için bir yöntem geliştirdik 9 , 18,19,20,21,22,23. Taze dokular, hayvan herhangi bir lekelenme veya fiksasyon olmadan kurban edildikten hemen sonra taranır, bu da doku eserlerini ve biyomekanik özelliklerin değişikliklerini azaltır. Bu 3D veriler, başka bir yerde açıklandığı gibi liflerin dağıtım ve yön analizleri için kullanılabilir19.

Burada sunulan ikinci 3D tüm doku görüntüleme yöntemi, PDL liflerinin herhangi bir kesit olmadan kemik yoluyla görüntülenmesini sağlayan mandibulanın optik olarak temizlenmesine dayanmaktadır. İlginçtir ki, kemiğin kollajen liflerinin görselleştirilmesini de sağlar, ancak bu burada tartışılmaz. Genel olarak, doku temizleme için iki yöntem vardır. Birincisi, numunenin basit bir daldırma, hiperhidrasyon veya hidrojel gömme yoluyla 1,4'ten büyük bir kırılma indeksine sahip sulu bir çözeltiye batırıldığı sulu bazlı temizlemedir. Bununla birlikte, bu yöntem şeffaflık düzeyinde olduğu kadar dokunun yapısal korunmasında da sınırlıdır ve bu nedenle dokunun sabitlenerek yapılmasını gerektirir. Son derece şeffaf numuneler veren ve fiksasyon gerektirmeyen ikinci yöntem solvent bazlı temizleme yöntemi24,25. Mandibular numuneler için etil-3-fenilprop-2-enoate (etil cinnamat, ECi) bazlı modifiye solvent bazlı bir temizleme yöntemi oluşturduk. Bu yöntem toksik olmayan gıda sınıfı temizleme maddesi, minimum doku büzülmesi ve floresan proteinlerin korunması avantajlarına sahiptir.

Protokol

Tüm hayvan deneyleri, NIH'nin Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımına ilişkin Yönergeleri ve Harvard Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi'nin yönergelerine uygun olarak gerçek gerçekleştirildi (Protokol no. 01840).

1. Ortodontik Diş Hareketi

  1. Bir fare yatağı oluşturmak için, kama şeklinde, 45 ° açılı bir başlık ile düz bir plastik platform kullanın. Başlık plastik bir kutu kesilerek oluşturulabilir.
    1. Başlık ve masa düzlemi arasında yaklaşık 30° açı oluşturmak için platformun baş ucunu yükseltin. Üst kesici dişleri tutmak için baş yan uca bükülmüş kalın bir ataş (0,036" çapında) takın.
    2. Kuyruk ucunda, alt kesici dişleri tutmak için ortodontik bir güç zincirinin takılabileceği yükseltilmiş bir yüzey oluşturun. Örnek bir platform için Şekil 1'e bakın.
  2. 10 mg/ kg'da intraperitoneal ksilazin enjeksiyonu ve 1 mL şırınga ve 27 Gauge iğne kullanarak ketamin 100mg / kg ile fareyi uyuşturun.
  3. Uyuşturuldu fareyi özel yapım platforma yerleştirin ve üst kesici dişleri ataç halkasına bağlayarak üst çeneyi hareketsiz hale getirin. Alt kesici dişlere bağlı ortodontik güç zinciri ile fare alt çenesini açın. Mini-colibri ağız retraktörü ile yanakları geri çekin.
  4. Platformu cerrahi bir mikroskop veya 5-6x büyütmeye ulaşabilen başka bir stereoskop altına yerleştirin.
  5. Kornea dehidrasyonunu önlemek için fare gözlerine 50 μL salin (kabaca 1 damla) uygulayın. Her 20 dakikada bir salin doldur.
  6. 1 cm uzunluğunda alüminyum telin bir parçasını (0,08 mm çapında) kesin. Mikrocerrahi iğne tutucu kullanarak birinci ve ikinci azı dişleri arasındaki temas noktasını lingual olarak bukkal taraftan kaydırın. yay ucuna geçirilmek üzere ilk azı dişinin önüne 2 mm serbest kenar bırakın.
  7. Yaklaşık 7 ila 9 iplik uzunluğunda bir nikel titanyum (NiTi) bobini kesin.
    NOT: Bobinin elastik özellikleri ortodontik hareket için sabit kuvvet sağlayacaktır. Bobinin toplam sınırsız uzunluğu kesici diş ile azı dişi arasındaki boşluktan daha kısa olmalıdır. Dişin bobinini tutturmak için her iki ucunda fazladan 2 dişe ihtiyaç olduğunu unutmayın. Mikro CT taraması sırasında ışın sertleştirme gibi tarama yapıtlarını azaltmak için alüminyum tel seçilir.
  8. NiTi bobin yayı (0,15 mm tel çapı, 0,9 mm iç bobin çapı; alt ilk azı dişi ve alt kesici diş arasına 10 g kuvvet sağlar) yerleştirin. 1.6. adımda ilk azı dişinin etrafına yerleştirilen tel bağını kullanın, bobini azı dişi tarafındaki sabitlemek için kabloyu bobin yayı etrafında sıkıca bükün.
  9. Düzgün kuvvet seviyesi sağlamak için, ilk azı dişi ve kesici diş arasında tam olarak 3 aktif diş kullanın. Güç zincirini kesici dişten geçici olarak çıkarın ve bobini tutturmak için kesici diş üzerinde 2 ila 3 sınırlanmamış diş döngüsü. diş parçacıklarını kesici diş serbest dişeti kenar boşluğuna kaydırın.
  10. Bobinin insidans sınırına bir akışlı kompozit reçine tabakası yerleştirin ve diş kürleme ışığı ile kürleyin. Reçineyi iyileştirdikten sonra güç zincirini değiştirin.
  11. Aynı kür ışığını kullanarak, NiTi bobini 20 sn ısıtın. Bu, NiTi bobini sıkır. Bitmiş yerleşim Şekil 1Cgösterilir.
  12. Kontralteral tarafı sağlam bırakın veya birinci ve ikinci azı dişleri arasına tel gibi bir düzmece yerleştirin.
  13. Fareyi iyileşene kadar sıcak tutmak için anestezi edilmiş fareyi ısıtılmış bir ışığın altına yerleştirin.
  14. Fareyi tekrar tek bir kafese yerleştirin ve günlük olarak izleyin. Ortodontik hareket sırasında diyet değişikliğine gerek yoktur.
    NOT: Bir tarafta OTM cihazı bazı rahatsızlıklara neden olur, ancak beslenmeyi bozmaz. Bununla birlikte, her iki tarafa da cihaz takmak, ilave rahatsızlık miktarı nedeniyle tavsiye edilir. Dışa doğru ağrı belirtileri görülmediği sürece ağrı kesiciye gerek yoktur.

2. Taze hemi-mandibulalarda PDL liflerinin mikro-CT taraması

  1. Hemi-mandibula montajı (Şekil 2)
    1. İstenilen ortodontik hareket süresinden sonra, fareyi servikal çıkık yoluyla feda edin. Mandibulayı çıkarın ve hemi-mandibulalara ayırın.
      NOT: Numune düzeltilmeyeceğinden, çenenin diseksiyonunun ve montajının en kısa sürede, ideal olarak 30 dakika içinde yapılması önemlidir.
    2. Temiz tüy bırakmayan bir mendille çevredeki yumuşak dokuyu nazikçe çıkarın.
    3. Ortodontik cihazı, stereo mikroskop altında mikrocerrahi makas ve cımbız kullanarak en az 4 kat büyütme ile çıkarın.
    4. Numuneyi 1,5 mL hacimde, mikro santrifüj tüpünde ve suyla nemlendirilmiş tüy bırakmayan bir silme parçasında saklayın.
    5. Paketlenebilir diş kompozit reçinesini sahnedeki numune yuvasına yerleştirin, ardından taze hemi-mandibulayı kompozit içine yerleştirin. Montajdan önce, diş kompoziti ile temas eden kemik yüzeyinin yumuşak dokulardan arındırılmış ve kuru olduğundan emin olun, aksi takdirde diş kompoziti düzgün bir şekilde tedavi etmeyecektir.
    6. İlk azı dişi sahnenin orta çizgisi oluğuna ortalanana kadar hemi-mandibulanın konumunu ayarlayın. Oklüzal yüzeyin yatay olduğundan emin olun. Konumlandırmadan memnun kaldığında kompoziti iyileştirin.
      NOT: Numunenin stabilize edilmesine yardımcı olmak için hemmi mandibulanın yanlarına ve/veya kesici ucun üzerine ek az miktarda diş kompoziti yerlenebilir.
    7. Örnek aşamasındaki nem havuzlarının içine sönümlenmiş tüy bırakmayan mendil yerleştirin. Diş kompozitini ilk azı dişinin oklüzal yüzeyine yerleştirin. Odayı kapatmadan önce, numune seviyesinde x-ray yolunu hiçbir şeyin engellemediş olduğundan emin olun.
    8. Odayı mikro-CT'ye yapıştırın. Hazneyi mikro-CT numune aşamasına vidalayarak görüntüleme sırasındaki hareketin en aza indirilmesini sağla.
    9. X ışınlarını açın ve örs dikey olarak indirilirken, örs ucu kompozitle çevrilinceye kadar 2D görüntüler çekin, ancak kuvvette bir artış tespit edilir.
    10. Örs kompozit içine gömüldükten sonra x-ray kaynağını kapatın. Ardından, mikro CT odasını açın ve kompoziti açık Pleksiglas pencereden iyileştirin.
  2. Mikro BT ayarları
    1. Kaynak voltajı 40 kV ve akımı 200 μA olarak ayarlayın. Yakalanan görüntüler için 2 binning kullanın.
      NOT: PDL kemik ve dişten önemli ölçüde daha az yoğun olduğundan, PDL'yi görselleştirmek daha yüksek güç ve pozlama süresi gerektirir. Bu protokol PDL'yi görselleştirmek için ayarlar sağlar.
    2. Tek görüntü pozlama süresini 25 s olarak ayarlayın. Örnek aşamanın dönüşünü 183 derece veya daha fazla bir aralığa ayarlayın. 2500 projeksiyon için taramayı ayarlayın. Herhangi bir x-ışını kaynak filtresi kullanmayın, elde eden taramaların her iki tarafında 0,76 μm voksel boyutu vardır.
    3. Mikro BT yönergelerine göre uygun rekonstrüksiyon için bir referans taraması toplayın. Toplam projeksiyon olarak 1/3 sayıda referans görüntü kullanın. Geri projeksiyon filtreli bir algoritma kullanarak, ek binning olmadan birimi yeniden oluşturun.

3. Temizleme yöntemi (Şekil 3)

  1. Beş 1,5 mL mikro santrifüj tüpü hazırlayın.
  2. 1,5 mL mikro santrifüj tüplerde aşağıdaki çözeltilerden 1,4 mL hazırlayın: Fosfat tamponlu salinde (PBS) %4 paraformaldehit (PFA), deiyonize (DI) suda %50 etanol (EtOH), DI suyunda %70 EtOH ve %100 EtOH iki tüp.
    NOT: PFA, numunenin sabitlenmesi için kullanılır. ECi temizleme, düzeltilmemiş numuneler üzerinde de çalışır. Düzeltilmemiş örnekleri temizlemek için PFA adımını atlamanız yeterlidir.
  3. %4 PFA'da parçalanmış hemi-mandibula yerleştirin. Alüminyum folyo ile örtün ve 6 saat boyunca oda sıcaklığında yumuşak ayarda sallayıcıya yerleştirin.
  4. Hemi-mandibulayı % 50 EtOH'a taşıyın. 16 saat boyunca ışıktan kaplanmış rocker üzerine yerleştirin.
  5. Hemi-mandible'ı % 70 EtOH'a taşıyın. 16 saat boyunca ışıktan kaplanmış rocker üzerine yerleştirin.
  6. Hemi-mandible'ı % 100 EtOH'a taşıyın. 16 saat boyunca ışıktan kaplanmış rocker üzerine yerleştirin.
  7. 3.6'ı tekrarlayın. ikinci %100 EtOH tüpünde.
  8. Bir cam veya polipropilen tüpte 5 mL ECi hazırlayın.
    NOT: ECi polistireni çözrür, ancak polipropilen çözmez. Ayrıca, floresan proteinli bir doku kullanmazsa, numune temizleme işlemi sırasında ışığa maruz kalabilir.
  9. Hemi-mandibulayı ECi tüpüne taşıyın. Tüpü alüminyum folyo ile örtün ve en az 12 saat boyunca hafif bir ayarda rocker üzerine yerleştirin.
    NOT: Protokol burada duraklatılabilir. Susuz numune oda sıcaklığında ECi'de saklanabilir. ECi'nin donma veya erime noktası 6,5 ila 8,0 °C'dir. 4 °C'de saklamayın.
  10. Hemi-mandibula floresan mikroskop ile görüntüleme için hazırdır.
    NOT: Görüntüleme sırasında, optik olarak saydam kalabilmesi için numunenin ECi'ye batırılması gerekir.

Sonuçlar

Bu makale, OTM üretmek için bir yöntemin yanı sıra PDL içindeki kollajen liflerinin herhangi bir bölümleme olmadan 3D görüntülenmesi için iki yöntem sürmektedir. Hayvansal araştırma amacıyla, dişlerin hizalanması gerekli olmadığında, alveolar kemiğin tüm kök seviyelerinde yeniden şekillendirilmesini sağlarsa, bir diş hareketi ortodontik olarak kabul edilir. Güvenilir bir OTM oluşturmak için dişlere uygulanan sabit kuvvet seviyesi gereklidir. Burada, etkinleştirilmiş bir şekil-bellek NiT...

Tartışmalar

Farelerde OTM üretmek, boyut, genetik ve elleçleme avantajları nedeniyle çok arzu edilir. Mandibulanın kullanılması hem doku diseksiyonu hem de numune hazırlama ve görüntüleme açısından kolay bir kullanım sağlar. Burada OTM'den sonraki 7 gün içinde dişin kemik içindeki çevirisel hareketi ile OTM üretmek için bir yöntem sunduk. Bu protokol kullanılarak, diş hareketinin genel süresi uzatılabilir, çünkü aktif bobin yaklaşık 1 mm'ye kadar hareket için sabit bir kuvvet seviyesi sağlar. Bunun...

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Teşekkürler

Bu çalışma NIH (NIDCR R00- DE025053, PI:Naveh) tarafından desteklenmiştir. Harvard Biyolojik Görüntüleme Merkezi'ne altyapı ve destek için teşekkür ederiz. Tüm rakamlar biorender.com ile oluşturulur.

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
1-mL BD Luer-Lok syringeBD309628
1X phosphate buffered salineVWR Life Sciences0780-10L
200 proof ethanolVWR Life SciencesV1016
Aluminum alloy 5019 wireSigma-aldrichGF158288130.08 mm diameter wire, length 100th, temper hard. Used as wire ligature around molar.
Avizo 9.7Thermo Fisher ScientificN/AUsed to analyze microCT scans
Castroviejo Micro Needle HoldersFine Science Tools12060-01
Clr Plan-Apochromat 20x/1.0,CorrVIS-IR M27 85mmZeissN/AUsed for second harmonic generation imaging
Cone socket handle, single ended, hand-formG.Hartzell and son126-CSH3Handle of the inspection mirror
EC Plan-Neofluar 5x/0.16Zeiss440321-9902Used for light-sheet imaging
Elipar DeepCure-S LED curing light3M ESPE76985
Eppendorf safe-lock tubes, 1.5mLEppendorf22363204
Ethyl cinnamate, >= 98%Sigma-aldrichW243000-1KG-K
Hypodermic Needle, 27G x 1/2''BD305109
Ketathesia 100mg/mlHenry Schein Animal HealthNDC:11695-0702-1
KIMWIPES delicate task wipersKimberly-Clark21905-026 (VWR Catalog number)Purchased from VWR
LightSheet Z.1 dual illumination microscope systemZeissLightSheet Z.1/LightSheet 7Used for lightsheet imaging
LSM 880 NLO multi-photon microscopeZeissLSM 880 NLOUsed for two-photon imaging
MEGAmicro, plane, 5mm dia, SS-ThreadHahnenkratt6220Front surface inspectrio mirror
MicroCT machine, MicroXCT-200XradiaMICRO XCT-200
Mini-ColibriFine Science Tools17000-01
PermaFlo Flowable CompositeUltradent948
Procedure platformN/AN/ACustom-made from lab materials
Routine stereo micscope M80Leica MicosystemsM80
Sentalloy NiTi open coil springTOMY Inc.A 0.15mm diameter closed NiTi coil with an inner coil diameter of 0.9mm delivers a force of 10g. Similar products can be purchased from Dentsply Sirona. 
T-304 stainless steel ligature wire, 0.009'' diameterOrthodonticsSBLW1090.009''(.23mm) diameter, Soft temper
X-Ject E (Xylazine) 100mg/mlHenry Schein Animal HealthNDC:11695-7085-1
Z100 Restorative, A2 shade3M ESPE5904A2

Referanslar

  1. Li, Y., et al. Orthodontic tooth movement: The biology and clinical implications. The Kaohsiung Journal of Medical Sciences. 34 (4), 207-214 (2018).
  2. Meikle, M. C. The tissue, cellular, and molecular regulation of orthodontic tooth movement: 100 years after Carl Sandstedt. European Journal of Orthodontics. 28, 221-240 (2006).
  3. Krishnan, V., Davidovitch, Z., molecular, Cellular, molecular, and tissue-level reactions to orthodontic force. American Journal of Orthodontics and Dentofacial Orthopedics. 129 (4), 1-32 (2006).
  4. Shoji-Matsunaga, A., et al. Osteocyte regulation of orthodontic force-mediated tooth movement via RANKL expression. Scientific Reports. 7 (1), 8753 (2017).
  5. Oppenheim, A. Tissue changes, particularly of the bone, incident to tooth movement. European Journal of Orthodontics. 29, 2-15 (2007).
  6. Unnam, D., et al. Accelerated Orthodontics-An overview. Journal of Archives of Oral Biologyogy and Craniofacial Research. 3 (1), 4 (2018).
  7. von Bohl, M., Kuijpers-Jagtman, A. M. Hyalinization during orthodontic tooth movement : a systematic review on tissue reactions. European Journal of Orthodontics. 31 (1), 30-36 (2009).
  8. Kirschneck, C., et al. Comparative assessment of mouse models for experimental orthodontic tooth movement. Scientific Reports. 10 (1), 1-12 (2020).
  9. Naveh, G. R. S., Weiner, S. Initial orthodontic tooth movement of a multirooted tooth: a 3D study of a rat molar. Orthodontics & Craniofacial Research. 18 (3), 134-142 (2015).
  10. Nakamura, Y., et al. Time-lapse observation of rat periodontal ligament during function and tooth movement, using microcomputed tomography. European Journal of Orthodontics. 30 (3), 320-326 (2008).
  11. Kawarizadeh, A., Bourauel, C., Jager, A. Experimental and numerical determination of initial tooth mobility and material properties of the periodontal ligament in rat molar specimens. European Journal of Orthodontics. 25 (6), 569-578 (2003).
  12. Jónsdóttir, S. H., Giesen, E. B. W., Maltha, J. C. Biomechanical behavior of the periodontal ligament of the beagle dog during the first 5 hours of orthodontic force application. European Journal of Orthodontics. 28, 547 (2006).
  13. Lindhe, J., et al. Experimental breakdown of peri-implant and periodontal tissues. A study in the beagle dog. Clinical Oral Implants Research. 3 (1), 9-16 (1992).
  14. Salamati, A., et al. Functional tooth mobility in young pigs. Journal of Biomechanics. 104, 109716 (2020).
  15. Maria, R., et al. An unusual disordered alveolar bone material in the upper furcation region of minipig mandibles: A 3D hierarchical structural study. Journal of Structural Biology. 206 (1), 128-137 (2019).
  16. Wang, S., et al. The miniature pig: a useful large animal model for dental and orofacial research. Oral Diseases. 10, 1-7 (2007).
  17. Melsen, B. Tissue reaction to orthodontic tooth movement--a new paradigm. European Journal of Orthodontics. 23 (6), 671-681 (2001).
  18. Naveh, G. R. S., et al. Direct MicroCT imaging of non-mineralized connective tissues at high resolution. Connective Tissue Research. 55 (1), 52-60 (2014).
  19. Naveh, G. R. S., et al. Nonuniformity in ligaments is a structural strategy for optimizing functionality. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 115 (36), 9008 (2018).
  20. Naveh, G. R. S., et al. Tooth periodontal ligament: Direct 3D microCT visualization of the collagen network and how the network changes when the tooth is loaded. Journal of Structural Biology. 181 (2), 108-115 (2013).
  21. Naveh, G. R. S., et al. Tooth movements are guided by specific contact areas between the tooth root and the jaw bone : A dynamic 3D microCT study of the rat molar. Journal of Structural Biology. 17 (2), 477-483 (2012).
  22. Naveh, G. R. S., et al. Tooth-PDL-bone complex: Response to compressive loads encountered during mastication -A review. Archives of Oral Biology. 57 (12), 1575-1584 (2012).
  23. Ben-Zvi, Y., et al. Response of the tooth-periodontal ligament-bone complex to load: A microCT study of the minipig molar. Journal of Structural Biology. 205 (2), 155-162 (2019).
  24. Klingberg, A., et al. Fully Automated Evaluation of Total Glomerular Number and Capillary Tuft Size in Nephritic Kidneys Using Lightsheet Microscopy. Journal of the American Society of Nephrology. 28 (2), 452 (2017).
  25. Richardson, D. S., Lichtman, J. W. Clarifying Tissue Clearing. Cell. 162 (2), 246-257 (2015).
  26. Taddei, S. R. d. A., et al. Experimental model of tooth movement in mice: A standardized protocol for studying bone remodeling under compression and tensile strains. Journal of Biomechanics. 45 (16), 2729-2735 (2012).
  27. Nakamura, K., Sahara, N., Deguchi, T. Temporal changes in the distribution and number of macrophage-lineage cells in the periodontal membrane of the rat molar in response to experimental tooth movement. Archives of Oral Biology. 46 (7), 593-607 (2001).
  28. Rygh, P., et al. Activation of the vascular system: A main mediator of periodontal fiber remodeling in orthodontic tooth movement. American Journal of Orthodontics and Dentofacial Orthopedics. 89 (6), 453-468 (1986).
  29. Nagao, M., et al. Vascular endothelial growth factor in cartilage development and osteoarthritis. Scientific Reports. 7 (1), 13027 (2017).
  30. Licht, A. H., et al. Endothelium-specific Cre recombinase activity in flk-1-Cre transgenic mice. Developmental Dynamics. 229 (2), 312-318 (2004).
  31. Connizzo, B. K., Naveh, G. R. S. In situ AFM-based nanoscale rheology reveals regional non-uniformity in viscoporoelastic mechanical behavior of the murine periodontal ligament. Journal of Biomechanics. 111, 109996 (2020).
  32. Connizzo, B. K., et al. Nonuniformity in Periodontal Ligament: Mechanics and Matrix Composition. Journal of Dental Research. 2, 179-186 (2020).

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

BiyolojiSay 170periodontal ligamentdijital g r nt lemedoku temizleme tekni i3D g r nt lememikro BTortodontik di hareketi3D lif y n

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Bize Ulaşın

KÜTÜPHANEYE TAVSİYE ET

JoVE HABER BÜLTENLERİ

Araştırma

Eğitim

Yazarlar

Kütüphaneciler

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır