Colacium sp.'nin Bağlı Aşamasının Fotofizyolojisinin Küvet Tipi Hızlı Tekrarlama Hızı Florometresi ile Ölçülmesi

Özet

Hızlı tekrarlama hızı florometresi (FRRf), fotosistem II fotofizyolojisini ve birincil üretkenliği ölçmek için faydalı bir yöntemdir. Burada, küvet tipi FRRf kullanarak substrat zooplankton üzerindeki epizoik alglerin, Colacium sp.'nin PSII fotofizyolojisini ölçmek için bir protokol tarif ediyoruz.

Özet

Hızlı tekrarlama hızı florometresi (FRRf), fotosistem II (PSII) fotofizyolojisini ve birincil üretkenliği ölçmek için faydalı bir yöntemdir. FRRf, çeşitli ökaryotik algler ve siyanobakteriler için PSII absorpsiyon kesitini (σ _PSII), maksimum fotokimyasal verimliliği (Fv / _Fm), etkili fotokimyasal verimliliği (Fq ′ / _Fm ′) ve fotokimyasal olmayan söndürmeyi (NPQNSV) ölçebilse de, bugüne kadar neredeyse tüm FRRf çalışmaları fitoplanktonlara odaklanmıştır. Burada, protokol epizoik alg Colacium sp'nin PSII fotofizyolojisinin nasıl ölçüleceğini açıklamaktadır. Ehrenberg 1834 (Euglenophyta), ekli aşamasında (zooplanktona bağlı), küvet tipi FRRf kullanarak. İlk olarak, substrat zooplanktonunun (Scapholeberis mucronata O.F. Müller 1776, Cladocera, Daphniidae) bazal floresan ve σ _PSII, Fv / Fm, _Fq′ / _Fm′ ve planktonik Colacium sp'nin _NPQNSV'si üzerindeki etkilerini tahmin ettik. Bu metodolojiyi doğrulamak için, S. mucronata'ya bağlı Colacium sp.'nin fotofizyoloji ölçümlerini kaydettik ve bu sonuçları planktonik aşamasıyla karşılaştırdık. Temsili sonuçlar, protokolün kalsiyum (Ca) ve manganezin (Mn) Colacium sp. fotofizyolojisi üzerindeki etkilerini nasıl belirleyebileceğini ve Mn zenginleştirmenin bağlı ve planktonik aşamalar arasındaki çeşitli etkilerini nasıl tanımlayabileceğini göstermiştir. Son olarak, bu protokolün diğer perifitik alglere uyarlanabilirliğini tartışıyoruz.

Giriş

Klorofil değişken floresansı, alg fotosistem II (PSII) fotofizyolojisini ölçmek için yararlı bir araçtır. Algler, PSII fotofizyolojilerini değiştirerek aşırı ışık ve besin eksikliği gibi çeşitli çevresel streslere yanıt verir. Hızlı tekrarlama hızı florometresi (FRRf), PSII fotofizyolojisini1,2 ölçmek ve birincil üretkenliği tahmin etmek için yaygın bir ^{yöntemdir1,3,4}, fitoplankton PSII fotofizyolojisinin yanı sıra geniş uzamsal ve zamansal ölçeklerde birincil üretkenliğin izlenmesini ^sağlar5,6,7

Protokol

1. Örnekleme

1. Göl suyunu yüzeyden bir kova ile toplayın. S. mucronata'ya bağlı Colacium sp.'yi hedeflemek için (Şekil 1A-C) 100 μm naylon ağ kullanarak 0.5-10 L göl suyunu ^{filtreleyin52}.
   NOT: S. mucronata genellikle sazlık (fragmitler) alanlar arasında olduğu gibi sığ, ötrofik, çamurlu sularda yoğun bir şekilde toplanır.
2. Konsantre numuneleri 500 mL plastik şişelerde 350 mL göl suyu ile saklayın. Karanlık koşullarda saklayın.
3. Laboratuvarda, numune suyunu 500 mL'lik bir beherin içine dökün ve birkaç dakika bekletin.

Sonuçlar

S. mucronata tarafından 5 bireye (inds.) mL^−1'e kadar bazal floresan (Şekil 5) veya Chl-a floresansının (Şekil 6) anlamlı bir etkisi yoktu. Bununla birlikte, Fv / _Fm ve _NPQNSV, S. mucronata 7.5 inds · mL ^{− 1} olduğunda önemli ölçüde etkilendi. Bu nedenle, ekli aşamada Colacium sp.'nin fotofizyolojisini ölçmek için, küvette yeterli

Tartışmalar

Bu protokol ilk kez, doğal bir ortamda ekli aşama sırasında Colacium sp.'nin fotofizyolojisinin, AF-6 ortamındaki planktonik aşamasıyla karşılaştırılabilir olduğunu göstermiştir. Ek olarak, açlıktan ölen S. mucronata'nın bağırsak içeriği, yoğunluk ≤5 inds · mL⁻¹ olduğunda taban çizgisini ve Chl-a floresansını etkilememiştir (Şekil 5 ve Şekil 6). Bu sonuçlar, bu protokolün düşük substr.......

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Acrodisc syringe filter	Pall Corporation, Ann Arbor, MI, USA		0.2 μm pore size
Act2Run	CTG Ltd., West Molesey, UK
Biotin	Wako	023-08711	AF-6 medium
CaCl2·2H2O	Wako	031-25031	AF-6 medium
CaCO3	Wako	036-00382	AF-6 medium
Citric acid	Wako	036-05522	AF-6 medium
CoCl2·6H2O	Wako	036-03682	AF-6 medium
Concentrated Chlorella	Recenttec, Tokyo, Japan		20 mg C·mL−1 ; store at 4 °C
FastOcean Act2	CTG Ltd., West Molesey, UK
Fe-citrate	Wako	093-00952	AF-6 medium
FeCl3·6H2O	Wako	091-00872	AF-6 medium
HCLP-880PF	Nippon Medical and Chemical Instruments  Co., Ltd., Osaka, Japan		With LED light bulbs
K2HPO4	Wako	160-04292	AF-6 medium
KH2PO4	Wako	167-04241	AF-6 medium
MgSO4·7H2O	Wako	137-00402	AF-6 medium
MnCl3·4H2O	Wako	139-00722	AF-6 medium
Na2EDTA	Wako	343-01861	AF-6 medium
Na2MoO4	Wako	196-02472	AF-6 medium
NaNO3	Wako	191-02542	AF-6 medium
NH4NO3	Wako	015-03231	AF-6 medium
Plankton Counter	Matsunami Glass, Osaka, Japan	S6300
Pylex test tube	CTG Ltd., West Molesey, UK		With rim, 16 x 100 mm
Vit. B1	Wako	203-00851	AF-6 medium
Vit. B12	Wako	226-00343	AF-6 medium
Vit. B6	Wako	165-05401	AF-6 medium
ZnSO4·7H2O	Wako	264-00402	AF-6 medium