Bazi Bushen Kapsülünün Yumurtalıklı Sıçanlarda Östrojen Benzeri Etkisi

Özet

Burada, Bazi Bushen kapsülünün (BZBS) östrojen benzeri etkisi sayesinde yumurtalıklı kemirgen modelindeki RANKL / OPG sinyal yolunu düzenleyebileceğini gösteren bir protokol sunulmaktadır.

Özet

Bu çalışma, bir Çin bitkisel bileşiği olan Bazi Bushen kapsülünün (BZBS) yumurtalıklı farelerde östrojen benzeri etkisini göstermeyi amaçlamaktadır. Dişi Sprague-Dawley (SD) sıçanları rastgele altı gruba ayrıldı: sahte ameliyatlı bir grup, bir model grup (OVX), bir progynova grubu ve BZBS grupları (1, 2 ve 4 d / kg / gün). Sahte ameliyatlı gruptakiler dışındaki tüm sıçanlara ovariektomi yapıldı. BZBS tedavisinden 4 ay sonra mikro bilgisayarlı tomografi (mikro-BT) taraması, hematoksilen ve eozin (H&E) boyama, immünohistokimya ve enzime bağlı immünosorbent testi (ELISA) tespiti yapıldı. Sonuç olarak, OVX grubu ile karşılaştırıldığında, BZBS ile tedavi edilen sıçanlar, trabeküler kemik ve kemik iliği hücrelerinin sayısında ve alanında artış ve azalmış sayıda yağ hücresi gösterdi. İlaç gruplarında sağ tibianın kemik hacmi, trabeküler sayısı ve trabeküler kalınlığı arttı ve trabeküler boşluk azaldı. İlaç gruplarında 17β-estradiol ve serum kalsiyum seviyeleri yükseldi, ancak serum fosfor, sklerostin, β-CTX ve TRACP-5b seviyeleri azaldı. İlaç gruplarında RANKL ve sklerostin düzeyleri azalırken, osteoprotegerin (OPG) düzeyi arttı. Sonuç olarak, bu protokol over farelerinde Çin bitkisel bileşiklerinin terapötik etkilerini ve potansiyel moleküler mekanizmalarını çeşitli tekniklerle sistematik olarak değerlendirdi.

Giriş

Postmenopozal osteoporoz (PMOP), yetersiz over fonksiyonu, azalmış östrojen ve artmış osteoklast aktivitesi¹ ile oluşan, düşük kemik kütlesi, kemik dokusunun mikromimari dejenerasyonu ve kemik trabekülünün hasarı ile karakterize bir iskelet sistemi hastalığıdır. PMOP kırıklara neden olmaya eğilimlidir ve hastaların yaşam kalitesi üzerinde ciddi etkileri olabilir. Osteoporoz dünya çapında yaklaşık 200 milyon insanı etkilemektedir²; Menopoz sonrası kadınların yaklaşık% 40'ı osteoporoz^3'ten muzdariptir ve PMOP^4'lü hastaların% 33'ünde kırıklar ....

Protokol

Hayvan deneyleri, Hebei Yiling Tıbbi Araştırma Enstitüsü Hayvan Araştırmaları ve Etik Komitesi tarafından onaylandı (onay numarası: N2020150). 36 adet Sprague-Dawley (SD) dişi sıçan (3 aylık, 180-200 g ağırlığında) (bkz . Malzeme Tablosu) Hebei Yiling Tıbbi Araştırma Enstitüsü'nün yeni ilaç değerlendirme merkezinde normal gıda ve temiz su ile beslendi ve kontrollü sıcaklıklara (20-26 °C) ve bağıl neme (%40-%70) sahip odalarda günde 12 saat yapay ışığa maruz bırakıldı.

1. Hayvan deneyi

1. Sıçanları rastgele altı gruba ayırın, sahte ameliyatlı bir grup (SHAM grubu, 1....

Sonuçlar

Tibianın kemik mikroyapısı mikro-BT taraması ile değerlendirildi
Over sıçanlarının BZBS ile tedavisi, OVX'in neden olduğu trabeküler yapısal değişiklikleri önemli ölçüde azalttı. Sağ tibianın rekonstrüktif mikro-BT görüntülerinde gösterildiği gibi (Şekil 1A,B), OVX grubundaki trabeküler kemik, SHAM grubuna kıyasla KMY (Şekil 1C), B/TV (Şeki.......

Tartışmalar

Ovariektomi sonrası, süngerimsi kemiğin sürekli azalması ve kemik döngüsünün artması nedeniyle östrojen seviyeleri keskin bir şekilde azaldı. Esasen, menopozdan sonra azalan östrojen sekresyonunun azalması önemli kemik kaybına¹⁸ neden olabilir ve bu da yumurtalıklı sıçanlarda Ca²⁺ kaybına^{yol açabilir 19,20}. Östrojen almanın yumurtalıklı sıçanların metafiz kırığı.......

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
10% neutral buffered formalin	Proteintech Group, Inc.	23408-1AP-100
17-Beta-Estradiol ELISA kits	Proteintech Group, Inc.	21933-1-AP
3%H2O2	ShanDong LIRCON Medical Technology Incorporated Company	20221027
Anti-osteoprotegerin antibody	Abcam	ab203061
Bazibushen capsules	Shijiazhuang Yiling Pharmaceutical Co. Ltd.	XB2103001
Biotin goat anti-rabbit IgG	Abcam	ab207995
Calcium assay kits	Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute	C004-2-1
Diaminobenzidine	ZSGB-BIO	ZLI-9018
Estradiol valerate tablets	Bayer AG	156A
Gene 1580R centrifuge	GENE Co. Ltd.	GZ422515090077
Image-Pro Plus	Media Cybernetics	IPP 6.0
Leica DM6000B Microscope (fully automated upright microscope system)	Leica	361715
Normal Goat Serum Blocking Solution	Vector Laboratories	S-1000-20
Phosphate assay kits	Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute	C006-1-1
Phosphate buffered saline	Servicebio, Wuhan, China	CR10201M
Quantum GX2 microCT Imaging System	PerkinElmer	CLS149276
RANKL rabbit polyclonal antibody	Elabscience Biotechnology Co. Ltd.	E-EL-R3032-96T
Rat SOST (Sclerostin) ELISA kit	Elabscience Biotechnology Co. Ltd.	E-EL-R1405c-96T
Rat TRACP-5b (Tartrate Resistant Acid Phosphatase 5b) ELISA kit	Abcam	ab108667
Rat β-CTx (Beta Crosslaps) ELISA kit	Elabscience Biotechnology Co., Ltd.	E-EL-R0939c-96T
Sclerostin rabbit polyclonal antibody	Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.	SCXK(JING)2016-0006
Slide scanner	Hamamatsu Photonics K.K.	Nano Zoomer-SQ
Sprague Dawley female rats	Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.	ZLI-9381