Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.
Tehlikeli patojenlerin neden olduğu periprostetik eklem enfeksiyonu (PEE) klinik ortopedide yaygındır. Mevcut hayvan modelleri, PJI'nin gerçek durumunu doğru bir şekilde simüle edemez. Burada, PJI için yeni terapötikler araştırmak ve geliştirmek için Candida albicans biyofilm ile ilişkili bir PJI fare modeli kurduk.
Periprostetik eklem enfeksiyonu (PEE), cerrahları ve bilim adamlarını giderek daha fazla ilgilendiren Candida albicans'ın (C. albicans) neden olduğu yaygın enfeksiyonlardan biridir. Genel olarak, enfeksiyon bölgesinde C. albicans'ı antibiyotiklerden ve immün klirenstan koruyabilen biyofilmler oluşur. Enfekte implantın çıkarılması, debridman, antimikrobiyal tedavi ve reimplantasyonu içeren cerrahi, PEE tedavisinde altın standarttır. Bu nedenle, hayvan PJI modellerinin oluşturulması, PJI için yeni ilaçların veya terapötiklerin araştırılması ve geliştirilmesi için büyük önem taşımaktadır. Bu çalışmada, ortopedi kliniklerinde yaygın olarak kullanılan bir implant olan pürüzsüz bir nikel-titanyum alaşımlı tel, C. albicans tel boyunca eklem boşluğuna aşılanmadan önce bir C57BL/6 faresinin femoral eklemine yerleştirildi. 14 gün sonra, taramalı elektronik mikroskop (SEM) altında implantların yüzeyinde olgun ve kalın biyofilmler gözlendi. Enfekte eklem örneklerinin H&E boyamasında önemli ölçüde azalmış bir kemik trabekülü bulundu. Özetlemek gerekirse, kolay kullanım, yüksek başarı oranı, yüksek tekrarlanabilirlik ve yüksek klinik korelasyon avantajlarına sahip bir fare PEE modeli oluşturulmuştur. Bunun, C. albicans biyofilm ile ilişkili PEE önlemenin klinik çalışmaları için önemli bir model olması beklenmektedir.
Candida albicans (C. albicans) insan vücudunun birçok yerinde yaygın olarak bulunur1, bu aynı zamanda özellikle bağışıklığı baskılanmış hastalarda hayatı tehdit eden invaziv mantar enfeksiyonlarına neden olan en yaygın fırsatçı patojendir 2,3. C. albicans, polimorfik bir mantar olarak maya ve miselyum durumları arasında dönüşebilir. Miselyum durumu daha yüksek virülans, daha güçlü yapışma ve hücre ve dokuların istilasısergiler 4,5. Ayrıca C. albicans, takma dişler, kateterler ve stentler gibi ....
Hayvanlar Xi'an Jiaotong Üniversitesi'nden satın alındı. Tüm hayvan deneyi prosedürleri, Xi'an Jiaotong Üniversitesi Kurumsal Hayvan Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır (onay numarası: SCXK [Shaanxi] 2021-103). Fareler, kafes başına 5 fare ile bir hafta boyunca tutuldu. Yiyecek ve suya ücretsiz erişimlerine izin verildi. Hayvanlar, çalışma yapılmadan önce oda sıcaklığında (RT; 24 °C ± 1 °C) ve aydınlık/karanlık döngüsünde (12 saat/12 saat) tutuldu.
1. Tampon ve ekipman hazırlığı
Örneklerin bir plaka ortamına aktarılması ve gece boyunca inkübasyondan sonra kolonilerin sayılması, lezyonun yakınındaki lokal patojen yükünü değerlendirmek için yaygın olarak kullanılır 22,23. Çalışmamızda, karaciğer, böbrek ve dalak örneklerinin mikrobiyal kültürü negatifti, bu da bu çalışmadaki modelin farelerde sistemik enfeksiyon yerine sadece lokal enfeksiyona yol açtığını gösteriyor23.
Ameliyat sırasında cerrahi aletlerin veya cerrahi ortamın kontaminasyonundan kaynaklanan enfeksiyon, çoğu implant enfeksiyonunun ana nedenidir 24,25,26,27. Bu nedenle, bu çalışmada bir fare C. albicans biyofilm ile ilişkili PJI modeli oluşturulmuştur. İmplant olarak salin içinde süspanse edilmiş steril paslanmaz çelik partiküllerin kullanıldığı geleneksel PEE model.......
Yazarlar, bu yazıda bildirilen çalışmayı etkilemiş gibi görünebilecek bilinen hiçbir rakip mali çıkarları veya kişisel ilişkileri olmadığını beyan ederler.
Shaanxi Eyaleti Doğa Bilimleri Vakfı'ndan (hibe numarası 2021SF-118) ve Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı'ndan (hibe numaraları 81973409, 82204631) gelen mali destek için minnettarız.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
0.5 Mactutrius turbidibris | Shanghai Lujing Technology Co., Ltd | 5106063 | |
4 °C refrigerator | Electrolux (China) Electric Co., Ltd | ESE6539TA | |
Agar | Beijing Aoboxing Bio-tech Co., Ltd | 01-023 | |
Analytical balances | Shimadzu | ATX124 | |
Autoclaves Sterilizer | SANYO | MLS-3750 | |
Carbenicillin | Amresco | C0885 | |
Eclipse Ci Nikon upright optical microscope | Nikon | Eclipse Ts2-FL | |
Glucose | Macklin | D823520 | |
Inoculation ring | Thermo Scientific | 251586 | |
Isoflurane | RWD | 20210103 | |
NaCl | Xi'an Jingxi Shuanghe Pharmaceutical Co., Ltd | 20180108 | |
Paraformaldehyde | Beyotime Biotechnology | P0099 | |
Peptone | Beijing Aoboxing Bio-tech Co., Ltd | 01-001 | |
RWD R550 multi-channel small animal anesthesia machine | RWD | R550 | |
SEM | Hitachi | TM-1000 | |
Temperature incubator | Shanghai Zhichu Instrument Co., Ltd | ZQTY-50N | |
Ultrapure water water generator | Heal Force | NW20VF | |
Ultrasound machine | Do-Chrom | DS10260D | |
Yeast extract | Thermo Scientific Oxoid | LP0021B |
Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi
Izin talebiDaha Fazla Makale Keşfet
This article has been published
Video Coming Soon
JoVE Hakkında
Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır