İntradermal Mikrodiyaliz: İnsanlarda Mikrovasküler Disfonksiyonun Yeni Mekanizmalarının Araştırılmasına Yönelik Bir Yaklaşım

Özet

İntradermal mikrodiyaliz, sağlık ve hastalıkta mikrovasküler fonksiyonu araştırmak için kullanılan minimal invaziv bir tekniktir. Bu teknikte kutanöz dolaşımda vazodilatasyon ve vazokonstriksiyon mekanizmalarını araştırmak için hem doz-yanıt hem de lokal ısıtma protokolleri kullanılabilir.

Özet

Kutanöz damar sistemi, insanlarda mikrovasküler fonksiyonu değerlendirmek için kullanılabilen erişilebilir bir dokudur. İntradermal mikrodiyaliz, kutanöz dolaşımda vasküler düz kas ve endotel fonksiyonunun mekanizmalarını araştırmak için kullanılan minimal invaziv bir tekniktir. Bu teknik, kardiyovasküler hastalık gelişme riskinin bir göstergesi olan azalmış nitrik oksit aracılı vazodilatasyon ile indekslenen mikrovasküler endotel disfonksiyonunun patofizyolojisinin farmakolojik diseksiyonuna izin verir. Bu teknikte, cildin dermal tabakasına bir mikrodiyaliz probu yerleştirilir ve kırmızı kan hücresi akışını ölçmek için probun üzerine lazer Doppler flowmetri probu ile lokal bir ısıtma ünitesi yerleştirilir. Lokal cilt sıcaklığı doğrudan ısı uygulaması ile klemplenir veya uyarılır ve vazodilatasyon veya vazokonstriksiyonu indüklemek veya ilgilenilen mekanizmaları (ko-faktörler, antioksidanlar, vb.) sorgulamak için hücre içi sinyal yollarını uyarmak veya inhibe etmek için prob aracılığıyla farmakolojik ajanlar perfüze edilir. Kutanöz vasküler iletkenlik ölçülür ve hastalık durumlarında endotel disfonksiyonunun mekanizmaları tanımlanabilir.

Giriş

Kardiyovasküler hastalık (KVH) Amerika Birleşik Devletleri'nde önde gelen ölüm nedenidir¹. Hipertansiyon (HTN) inme, koroner kalp hastalığı ve kalp yetmezliği için bağımsız bir risk faktörüdür ve Amerika Birleşik Devletleri nüfusunun ~% 50'sinden fazlasını etkilediği tahmin edilmektedir². HTN, bağımsız bir KVH (primer HTN) olarak veya polikistik böbrek hastalığı ve/veya endokrin bozukluklar (sekonder HTN) gibi başka bir durumun sonucu olarak gelişebilir. HTN'nin etiyolojilerinin genişliği, HTN ile gözlenen altta yatan mekanizmalar ve son organ hasarının araştırılmasını zorlaştırmaktadır. HTN ile ilişkili son organ hasarı....

Protokol

Tüm prosedürler, katılımcı alımından önce Pennsylvania Eyalet Üniversitesi Kurumsal İnceleme Kurulu tarafından onaylanır.

1. Ekipman kurulumu

1. Yerel ısıtma ünitesini ve lazer Doppler debimetreyi açın.
   NOT: Her ikisi de veri toplanmadan önce üreticinin talimatlarına göre kalibre edilmelidir. Lazer Doppler debimetre, 100 Hz'de (100 örnek/dak) örnekleme ve bir veri toplama yazılımında sürekli kayıt ile veri toplama donanımına bağlanmalıdır. Diğer veri toplama donanımı ve yazılımı kullanılabilirken, basitlik için kalan talimatlar PowerLab donanımını ve LabChart yazılım özelliklerini yansıtır.
2. Bir LabChart yazılım dosyası a....

Tartışmalar

İntradermal mikrodiyaliz tekniği, insan vasküler araştırmalarında çok yönlü bir araçtır. Müfettişler, uygulamalarını daha da çeşitlendirmek için protokolü değiştirebilir. Örneğin, bir ACh doz-yanıt protokolünü tanımlıyoruz, ancak tek başına vazodilatasyondan ziyade vazokonstriksiyon veya vazomotor ton mekanizmalarına ilişkin diğer araştırmalar, norepinefrin veya sodyum nitroprussid doz-yanıt yaklaşımlarını^{kullanmıştır} 26,27,28,29,30,31.

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
1 mL syringes	BD Syringes	302100
Acetlycholine	United States Pharmacopeia	1424511	Pilot data collected in our lab indicate drying acetylcholine increases variability of CVC response; do not dry, store in desiccator
Alcohol swabs	Mckesson	191089
Baby Bee Syringe Drive	Bioanalytical Systems, Incorporated	MD-1001	In this study the optional 3-syringe bracket (catalg number MD-1002) was utilized
CMA 30 Linear Microdialysis Probes	Harvard Apparatus	CMA8010460
Connex Spot Monitor	WelchAllyn	74CT-B	automated blood pressure monitor
Hive Syringe Pump Controller	Bioanalytical Systems, Incorporated	MD-1020	Controls up to 4 Baby Bee Syringe Drives
LabChart 8	AD Instruments		**PowerLab hardware and LabChart software must be compatible versions
Lactated Ringer's Solution	Avantor (VWR)	76313-478
Laser Doppler Blood FlowMeter	Moor Instruments	MoorVMS-LDF
Laser Doppler probe calibration kit	Moor Instruments	CAL
Laser Doppler VP12 probe	Moor Instruments	VP12
Linear Microdialysis Probes	Bioanalytical Systems, Inc.	MD-2000
NG-nitro-l-arginine methyl ester	Sigma Aldrich	483125-M	L-NAME
Povidone-iodine / betadine	Dynarex	1202
PowerLab C Data Acquisition Device	AD Instruments	PLC01	**
PowerLab C Instrument Interface	AD Instruments	PLCI1	**
Probe adhesive discs	Moor Instruments		attach local heating unit to skin
Skin Heater Controller	Moor Instruments	moorVMS-HEAT 1.3
Small heating probe	Moor Instruments	VHP2
Sterile drapes	Halyard	89731
Sterile gauze	Dukal Corporation	2085
Sterile surgical gloves	Esteem Cardinal Health	8856N	catalogue number followed by the initials of the glove size, then the letter "B" (e.g., 8856NMB for medium)
Surgical scissors	Cole-Parmer	UX-06287-26