H-Tipi Hipertansiyonu Olan Sıçanlarda Huotan Jiedu Tongluo Dekaynatmasının Antihipertansif Etkileri ve Mekanizmaları

Özet

Burada, H-tipi hipertansiyonu indüklemek ve intragastrik olarak uygulanan Huotan Jiedu Tongluo kaynağının (HTJDTLD) antihipertansif etkilerini değerlendirmek için bir protokol sunuyoruz. H tipi hipertansiyonu olan sıçanlarda, HTJDTLD, muhtemelen endoplazmik retikulum (ER) strese bağlı apoptoz yolu aktivasyonunun inhibisyonu ile ilişkili etkili antihipertansif etkilere sahipti.

Özet

Yüksek plazma homosistein (Hcy) seviyeleri ile karakterize spesifik bir hipertansiyon formu olan H tipi hipertansiyon, dünya çapında önemli bir halk sağlığı sorunu haline gelmiştir. Bu çalışma, vasküler darlığı tedavi etmek için yaygın olarak kullanılan oldukça etkili bir geleneksel Çin tıbbı formülü olan Huotan Jiedu Tongluo kaynatma (HTJDTLD) nin hipotansif etkilerini ve altta yatan mekanizmaları araştırdı. Sıçanlarda H tipi hipertansiyonu indüklemek için metiyonin kullanıldı ve HTJDTLD intragastrik olarak uygulandı. Daha sonra, sıçanların kaudal arterinin sistolik ve diyastolik kan basınçları noninvaziv sıçan kaudal manometrisi ile ölçüldü. Aortun histolojik değerlendirmesi hematoksilen-eozin (HE) boyaması ile yapıldı. Hcy düzeylerini ölçmek için enzime bağlı immünosorbent assay (ELISA) ve Glukoz düzenleyici protein 78 (GRP78), Tümör nekroz faktörü (TNF) reseptörü ile ilişkili faktör 2 (TRAF2), c-Jun N-terminal kinazlar (JNK) ve kaspaz-3'ün mRNA ve protein düzeylerini belirlemek için kantitatif ters transkriptaz polimeraz zincir reaksiyonu (qRT-PCR) ve western blotlama kullanıldı. Sonuçlar, HTJDTLD'nin metiyonin tedavisinden sonra kan basıncını önemli ölçüde düşürdüğünü, histopatolojik lezyonları hafiflettiğini ve Hcy düzeylerini azalttığını gösterdi. Ayrıca, HTJDTLD, esas olarak endoplazmik retikulum (ER) strese bağlı apoptoz yolunda yer alan GRP78, JNK, TRAF2 ve kaspaz 3'ün gen ve protein ekspresyonunu önemli ölçüde inhibe etti. Genel olarak, sonuçlar HTJDTLD'nin H tipi hipertansiyonu olan sıçanlarda etkili antihipertansif etkilere sahip olduğunu ve ER stresine bağlı apoptoz yolu aktivasyonunun inhibisyonu ile ilişkili antihipertansif mekanizmaları ortaya çıkardığını göstermiştir.

Giriş

Kalp krizi, felç ve böbrek yetmezliği için önemli bir risk faktörü olan hipertansiyon, dünya çapında 1 milyar insanı etkileyen önemli bir halk sağlığı sorunu haline gelmiştir¹. Tiyol grubu içeren bir amino asit olan homosistein (Hcy), metiyonin metabolizmasının hayati bir metabolik aracıdır. Yüksek plazma Hcy düzeyleri ile hipertansiyon, inme gibi kardiyoserebrovasküler hastalıkların ortaya çıkması ve tekrarlaması için önemli bir risk faktörü olabilen H tipi hipertansiyon olarak tanımlanır ^2,3. Son yıllarda yapılan çalışmalar, H tipi hipertansiyonun birlikte görülmesinin kardiyovasküler....

Protokol

Tüm hayvan deneyleri, Changchun Çin Tıbbı Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) tarafından onaylandı. Malzemeler, Malzeme Tablosu'nda listelenmiştir.

1. Hayvanlar ve tedavi

1. Toplam 50 yetişkin spontan hipertansif sıçanı (SHR'ler) (erkek, 50 günlük) kontrol (CON), metiyonin (MET), MET + HTJDTLD + Enalapril maleat (EM), MET + EM ve MET + HTJDTLD grupları dahil olmak üzere beş gruba rastgele bölün.
   NOT: Deney fareleri, rahatlıklarını ve esenliklerini sağlamak için tasarlanmış kontrollü bir ortamda barındırıldı. Tesis, sabit 22 °C'ye ayarlanmış ve bağıl nem oranı %40-60 o....

Tartışmalar

Hipertansiyon, yetişkin nüfusun üçte birini etkileyen ve inme, koroner kalp hastalığı ve kalp ve böbrek yetmezliği riskini artıran en yaygın kardiyovasküler bozukluklardan^biridir8. H tipi hipertansiyon, primer hipertansiyon ve artmış homosistein düzeylerinin birlikte ortaya çıkması ile ifade eden ve yıllar içinde geniş ilgi gören özel bir hipertansiyon türüdür⁹. Son yıllarda, oral EM'nin antihipertansif ilaçlarla birlikte kullanımı, kan basınc.......

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR	Yeasen,China	11149ES	cDNA synthesis kit
Anti-beta-actin antibody	Bioss, China	bs-0061R
Anti-caspase-3 antibody	Bioss, China	bs-0081R
Anti-GPR78 antibody	Abcam, USA	ab108513
Anti-JNK antibody	Abcam, USA	ab76572
Anti-p-JNK antibody	Bioss, China	bsm-52462R
Anti-rabbit IgG antibody	Bioss, China	bs-0295G-HRP
Anti-TRAF2 antibody	Bioss, China	bs-22372R
Bio-Rad CFX96 Touch system	Bio-Rad	CFX96	real-time PCR detection system
ECL Western Blot Substrates	Merck, MA, USA	WBULP-10ML
Enalapril maleate folic acid tablets	Yangzijiang Pharmaceutical Company, China	20040991
FastStart SYBR Green Master	Sigma	FSSGMMRO
Fructus Trichosanthis	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Hirudo	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
intelligent noninvasive sphygmomanometer	Beijing Softron Biotechnology company	BP-2010A
Lonicerae Japonicae Flos	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Methionine	Sigma, USA	M9500
Radix Angelicae Sinensis	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Glycyrrhizae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Nardostachyos	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Rhodiolae Crenulatae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Salviae Miltiorrhizae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix Scrophulariae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Rat Hcy ELISA Kits	Shanghai Meimian Industrial Company, China	MM-0293R2
RIPA buffer	Shanghai Beyotime Biotechnology company	P0013B