Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Temsili Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Sıçanlarda kalvarial sütür-kemik kompozit defektlerinin ayrıntılı cerrahi prosedürlerini ve modelin kısa ve uzun vadeli prognozlarını araştırıyoruz. Sütür rejeneratif tedaviler geliştirmek için standart bir model oluşturmayı amaçlıyoruz.

Özet

Büyük ölçekli kalvarial defektler sıklıkla kraniyal sütür bozulması ile çakışır, bu da kalvarial defekt restorasyonunda ve kafatası gelişiminde bozulmalara yol açar (ikincisi gelişmekte olan kafatasında meydana gelir). Bununla birlikte, standart bir modelin olmaması, sütür rejeneratif tedavilerin araştırılmasında ilerlemeyi engellemekte ve farklı çalışmalarda karşılaştırmalı analizler yapmak için zorluklar doğurmaktadır. Bu sorunu ele almak için, mevcut protokol, sıçanlarda kalvarial sütür-kemik kompozit defektlerinin ayrıntılı modelleme sürecini açıklamaktadır.

Model, koronal sütürler boyunca 4,5 mm × 2 mm ölçülerinde tam kalınlıkta dikdörtgen delikler açılarak oluşturulmuştur. Sıçanlara ötenazi yapıldı ve kafatası örnekleri ameliyat sonrası 0. gün, 2. hafta, 6. hafta ve 12. haftalarda toplandı. Ameliyattan hemen sonra toplanan örneklerden elde edilen μBT sonuçları, koronal sütürün ve bitişik kemik dokularının çıkarılmasını içeren sütür-kemik kompozit defektinin başarılı bir şekilde kurulduğunu doğruladı.

Ameliyat sonrası 6. ve 12. haftalardan elde edilen veriler, defektin kapanması için doğal bir iyileşme eğilimi gösterdi. Histolojik boyama, defekt merkezinde artmış mineralize lifler ve yeni kemik göstererek bu eğilimi daha da doğruladı. Bu bulgular, kalvarial defektleri takiben zaman içinde ilerleyici sütür füzyonunu gösterir ve sütür rejenerasyonu için terapötik müdahalelerin önemini vurgular. Bu protokolün, sütür rejeneratif tedavilerin geliştirilmesini kolaylaştıracağını, kalvarial defektlerin fonksiyonel restorasyonu hakkında yeni bilgiler sunacağını ve sütür kaybıyla ilişkili olumsuz sonuçları azaltacağını tahmin ediyoruz.

Giriş

Kraniyal sütürler, kafatası kemikleri arasındaki yoğun fibröz bağlantılardır, hafif kafatası hareketini kolaylaştırmak için eklem görevi görür ve basınç altındaki beyin için koruyucu bir yastık sağlar1. Son yıllarda, artan araştırmalar, kraniyal sütürlerin kafatası gelişimi, kraniyofasiyal homeostaz ve doğal osteo-onarıcı potansiyel 2,3,4,5,6,7,8'deki önemli rolünü vurgulamıştır. B....

Protokol

Bu çalışmadaki tüm hayvan prosedürleri, Sichuan Üniversitesi Batı Çin Stomatoloji Okulu Etik Komitesi tarafından gözden geçirilmiş ve onaylanmıştır (WCHSIRB-D-2021-597). Toplam 12 (dört zaman noktasının her birinde 3 sıçan) Sprague-Dawley (SD) sıçan (erkek, 300 g, 8 haftalık) ticari bir kaynaktan elde edildi (bkz.

1. Ameliyat öncesi hazırlık

  1. Cerrahi malzemeler
    1. Kavisli forseps, tek kullanımlık steril neşter, periosteal elevatörler, irrigasyon iğnesi, pamuk topları, düşük hızlı bir el aleti, cerrahi motor, dental düşük hızlı yuvarlak frezler (

Temsili Sonuçlar

Bu çalışmada, sıçan kalvarial sütür-kemik kompozit defekti, koronal sütür boyunca 4.5 mm x 2 mm'lik dikdörtgen bir delik açılarak kuruldu. Cerrahi şematik çizim ve araştırma akış şeması Şekil 3'te gösterilmiştir. Postoperatif 0 günlük örneklerin, yani ameliyattan hemen sonra toplanan örneklerin 3D görüntüsü ve kesitsel görünümü, koronal sütürün yanı sıra her iki uçtaki bitişik kemik yapılarının tamamen çıkarılm.......

Tartışmalar

Konvansiyonel kalvarial defekt modelleri, kraniyal sütürler içersin ya da içermesin, öncelikle sert dokunun onarımına odaklanır ve genellikle sütür mezenşiminin hayati rejenerasyonunu ihmal eder19,20. Sütür rejenerasyonu araştırmalarında, Mardas ve ark.15,16 tarafından yapılanlar gibi önceki modeller, sıçanların sagital sütürü boyunca 5 mm'lik dai.......

Açıklamalar

Yazarların beyan edebilecekleri herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Teşekkürler

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı 82100982 (FL), 82101000 (HW), 82001019 (BY), Sichuan Eyaleti Bilim ve Teknoloji Departmanı 2022NSFSC0598 (BY), 2023NSFSC1499 (HW) ve Sichuan Üniversitesi Batı Çin Stomatoloji Okulu/Hastanesi'nden Araştırma Fonu (RCDWJS2021-5). Şekil 3 Biorender.com ile oluşturulmuştur.

....

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
4% paraformaldehydeBiosharpBL539A
2% Iodophor solutionChengdu Jinshan Chemical Reagent Co., Ltd.None
75% EthanolChengdu Jinshan Chemical Reagent Co., Ltd.None
Cotton ballsHaishi Hainuo Group Co., Ltd. None
Cotton swabsLakong Medical Devices Co., None
Curved forcepsChengdu Shifeng Co., Ltd.None
Dataviewer and Ctan software for residual defect volume assessmentsBrukerNone
Dental low-speed round bursDreybird Medical Equipment Co., Ltd.RA3-012
RA1-008
Disposable sterile scalpelHangzhou Huawei Medical Supplies Co., Ltd.None
Disposable syringes (22 G)Chengdu Shifeng Co., Ltd.SB1-089(IX)
Electric shaverJASEBM320210
Ethylene Diamine Tetraacetic Acid (EDTA)BioFroxx1340GR500
Hematoxylin and Eosin Stain KitBiosharpBL700B
Irrigation needle (23 G)Sichuan New Century Medical Polymer Products Co., Ltd.None
Low-speed handpieceGuangzhou Dental Guard Technology Co., Ltd.None
Masson’s Trichrome Stain KitSolarbioG1340
Medical non-woven fabricsHenan Yadu Industrial Co., Ltd. None
Micro-computed tomography (µCT) Scanco Medical AGµCT45
Mimics 20.0 for cross-sectional imagesMaterialiseNone
Needle holdersChengdu Shifeng Co., Ltd.None
Periosteal elevatorChengdu Shifeng Co., Ltd.None
Saline solutionSichuan Kelun Pharmaceutical Co., Ltd.None
Scanco medical visualizer software for 3D image reconstructionScanco Medical AGNone
SPSS Statistics 20.0 for statistical analysisIBMNone
Sprague-Dawley rats Byrness Weil Biotech LtdNone
Straight ScissorsChengdu Shifeng Co., Ltd.None
Surgical MotorMARATHONN3-140232
Surgical sutures (3-0 monofilament)Hangzhou Huawei Medical Supplies Co., Ltd.None

Referanslar

  1. Li, B., et al. Cranial suture mesenchymal stem cells: insights and advances. Biomolecules. 11 (8), 1129 (2021).
  2. Opperman, L. A. Cranial sutures as intramembranous bone growth sites. Dev Dyn. 219

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

Kalvarial DefektlerKraniyal S t r BozulmasS t r Rejeneratif TedaviStandardize ModelS anKoronal S t rKemik DokusuBTHistolojik BoyamaS t r F zyonuKemik Rejenerasyonu

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Araştırma

Eğitim

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır