Sıçanlarda intratekal kateterizasyon için modifiye edilmiş bir yöntem

Özet

Burada, tekrarlayan intratekal ilaç uygulaması için basit, kullanışlı ve güvenilir bir yaklaşımı temsil eden sıçanlarda intratekal kateterizasyon için modifiye edilmiş bir yöntem sunuyoruz.

Özet

İntratekal kateterizasyon, hayvan deneylerinde, özellikle nöropatik ağrı üzerinde yaygın olarak uygulanmaktadır. Bununla birlikte, geleneksel yöntemlerin hala çeşitli sınırlamaları vardır. Bazı araştırmacılar geleneksel yöntemleri geliştirmeye çalışmış olsalar da, mevcut yöntemlerin hala değiştirilmesi gerekmektedir. Burada, sıçanlarda intratekal kateterizasyon için modifiye edilmiş bir yöntem sunuyoruz.

Bu yöntemde 20 cm uzunluğunda paslanmaz çelik tel (0,2 mm çapında), 15 cm uzunluğunda plastik PE10 tüp, kendinden yapılmış bir sızdırmazlık kapağı ve 0,3 cm × 0,5 cm antialerjik bant kullanılır. İntratekal kateterizasyon için modifiye edilmiş yöntemimizin birçok avantajı vardır. İlk olarak, PE10 tüpüne paslanmaz çelik bir tel eklenmesi tüpün elastikiyetini arttırır, intratekal kateterizasyonun başarı oranını artırır, operasyon için gereken alan miktarını azaltır ve lomber omurga çevresindeki dokulara verilen zararı en aza indirir. İkincisi, PE10 tüpünün uzunluğu ameliyattan önce belirlenir ve kateter kalma süresi bir haftadan daha uzun olabilir. Üçüncüsü, PE10 tüpü, hayvan hareket ettiğinde tüp hareketini ve geri çekilmeyi önleyen 4 kez şekil-8 sütür ile sabitlenir. Dördüncüsü, PE10 tüpünü kapatmak için kendi kendine yapılan bir sızdırmazlık kapağı kullanılır, bu sadece beyin omurilik sıvısı sızıntısını önlemekle kalmaz, aynı zamanda PE10 tüpünün tekrar tekrar kesilmesi ihtiyacını da azaltır. Son olarak, PE10 tüpünün ekstrakorporeal ucu, hayvan hareket ettiğinde tüpün geri çekilmesini önleyen bir bantla bağlanır.

Bu yöntem, PE10 tüplerinin yaklaşık% 80'i ameliyattan 28 gün sonra bile yerinde kaldığı için sıçanlarda kateterizasyon başarı oranını artırabilir. Bu nedenle, bu modifiye edilmiş yöntem, tekrarlayan intratekal ilaç uygulaması için basit, kullanışlı ve güvenilir bir yaklaşımı temsil edebilir.

Giriş

Sıçanlarda intratekal kateterizasyon (subaraknoid kateterizasyon olarak da bilinir), intervertebral boşluktan subaraknoid boşluğa bir kateter yerleştirilmesini içeren bir yöntemdir¹. İlaçlar kateter yoluyla doğrudan subaraknoid boşluğa enjekte edilir, bu da araştırmacıların kan-beyin bariyerine nüfuz eden ilaçların etkilerini dikkate almadan ilaçların omurilik üzerindeki etkilerini araştırmalarına yardımcı olur ^2,3. Ayrıca, merkezi sinir sisteminin^mikro çevresini araştırmak için intratekal kateterizasyonu takiben beyin omurilik sıvısı toplanabilir ^4,5. İntratekal kateterizasyon için şu anda kullanılan yöntem ilk olarak 1976 yılında Yaksh ve Rudy⁶ tarafından kurulmuş ve o zamandan beri nörobilim, anestezi ve analjezi, omurilik aracılı kardiyovasküler regülasyon ve özellikle nöropatik ağrı alanlarında hayvan deneylerinde yaygın olarak uygulanmaktadır ^2,7. Bununla birlikte, bu yöntemin yüksek omurilik hasarı insidansı, subaraknoid kanama, postoperatif duyusal ve motor disfonksiyon, yüksek postoperatif mortalite ve yüksek nörolojik bozukluk riski gibi çeşitli sınırlamaları vardır 4,5,8,9,10 . Bu sınırlamaların üstesinden gelmek amacıyla, 1996'da Størkson ve ark.¹¹ yılında subaraknoid boşluğun lomber boşluklar yoluyla kateterizasyonu önerilmiş ve daha yüksek bir cerrahi sonrası başarı oranı bildirilmiştir. Özellikle, kalıcı kateterin sabitlenmesi bu yöntemde hala bir zorluktur ve hayvan hareketi nedeniyle kateter retraksiyonu yaygındır, bu da intratekal ilaç uygulamasını elverişsiz hale getirir.

Yukarıdaki sınırlamalar nedeniyle, bazı araştırmacılar 12,13,14,15 delme araçlarını, kateterizasyon yöntemlerini ve kateter fiksasyon yöntemlerini geliştirmeye çalışmışlardır, ancak kullanılan boncukların çapının ölçülmesindeki zorluk, tekrarlanan ponksiyonlara duyulan ihtiyaç ve kateterin kısa uzunluğu nedeniyle mevcut yöntemlerin hala değiştirilmesi gerekmektedir. ^vesaire.11

İntratekal kateterizasyon için lomber yaklaşıma¹ ve merkezi ven kateterizasyonu için Seldinger ^tekniğine16 göre, mevcut yöntemi basitleştirmek için paslanmaz çelik tel, kendi kendine yapılan bir sızdırmazlık başlığı ve antialerjik bir bant kullanan sıçanlarda intratekal kateterizasyon için bir yöntem geliştirdik. Bu yöntem sayesinde, kateter subaraknoid boşluğa kolayca yerleştirilebilir ve farenin arkasına stabil bir şekilde sabitlenebilir ve tekrarlanan intratekal ilaç uygulaması için tekrarlanan ponksiyonlara duyulan ihtiyaç önlenir.

Burada, sıçanlarda intratekal kateterizasyonun başarı oranını artırabilecek ve ilaçların tekrarlayan intratekal uygulaması için basit, kullanışlı ve güvenilir bir yaklaşımı temsil edebilecek modifiye bir yöntem sunuyoruz.

Protokol

İntratekal kateterizasyon, Ulusal Sağlık Enstitüleri Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu'ndaki tavsiyelere sıkı sıkıya bağlı olarak gerçekleştirildi ve protokol, Çin Deney Hayvanları Etik Kurulu tarafından onaylandı (No. TJBH15523201). Deneyde erkek Sprague-Dawley (SD) sıçanları kullanıldı. Hayvanların acı ve rahatsızlıklarını en aza indirmek için özen gösterildi.

1. Malzeme ve enstrüman hazırlığı

NOT: Başarılı bir intratekal kateterizasyon için materyal ve aletlerin hazırlanması çok önemlidir.

1. 15 cm uzunluğunda bir PE10 tüpü hazırlayın (uzunluk, sıçan başı ile kuyruğun ucu arasındaki mesafeye göre belirlenir), iki cilalı ucu olan 20 cm uzunluğunda paslanmaz çelik bir tel (0,2 mm çapında) PE10 tüpüne destek olarak yerleştirin ve yerleştirme derinliğini belirtmek için tüpü bir uçtan 2 cm işaretleyin (Şekil 1A'da siyah çarpı işaretleriyle işaretlendiği gibi, B).
2. 22 G'lik bir iğnenin keskin ucunu kesin ve distal ucunu kapatın (Şekil 1C).
3. Epidural bir kateteri (dış çapı 1.0 mm) 1 cm'lik parçalar halinde kesin. Ardından, keskin uçlu olmayan 22 G'lik bir iğneye bir parça yerleştirin (Şekil 1D) ve parçanın distal ucunu bir çift ısıtılmış düz forseps ile kapatın. Bu aparata tüp sızdırmazlık kapağı denir (Şekil 1E).
4. Bir makasla ipek bir bant (1,25 cm × 9,1 m) keserek 0,3 cm × 0,5 cm antialerjik bir bant hazırlayın (Şekil 1F).

2. Ameliyata hazırlık

1. Aletleri ameliyattan önce sterilize ederek intratekal kateterizasyon için hazırlayın. Ameliyat için kullanılan aletler dişli forseps, makas, gavaj aparatı, neşter sapı ve #10 bıçaktır. (Şekil 2).
2. PE10 tüpünü ve kılavuz teli yaklaşık 2 saat sterilizasyon için %75 etanole daldırın.

3. Cerrahi

1. Sıçanı 3 L / dk akış hızında% 3 izofluran ile uyuşturun.
2. Fareyi ameliyat masasına yerleştirin ve arka pençeyi forseps ile sıkıştırırken geri çekilme refleksini gözlemleyin. Stimülasyona yanıt olarak arka pençe hareketinin olmaması başarılı anesteziyi doğruladı. İntratekal kateterizasyondan önce intramüsküler 1 mg / kg meloksikam enjeksiyonu ile yeterli analjezi uygulayın.
3. Sırtın bel omurga bölgesinden ve iki kulak arasındaki bölgeden bir tıraş makinesi ile tüyleri alın.
4. Bel omurgasındaki fleksiyonu artırmak için sıçanın karnının altına, bel-kalça kavşağındaki bir santrifüj tüpü (3 cm çapında) yerleştirin, böylece iğne ve kateterin geçmesi için daha fazla alan sağlayın.
5. Cerrahi bölgeleri (lomber omurga bölgesi üzerindeki alan ve iki kulak arasındaki alan) povidon-iyot çözeltisi ve ardından üç kez etanol çözeltisi ile sterilize edin. Fareyi aseptik bir pansumanla örtün ve cerrahi bölgeleri açığa çıkarın. Daha sonra ameliyattan önce PE10 tüpünü ve kılavuz teli normal tuzlu su ile yıkayın.
   NOT: İntratekal kateterizasyon sırasında kuyruk hareketinin gözlenebilmesi için kuyruk kapatılmamıştır.
6. Sol ve sağ bilateral iliak tepeler arasındaki orta noktada L6'nın spinöz sürecini bularak L5 ve L6 arasındaki intervertebral boşluğun yerini belirleyin. Operatörün sol baş parmağı ve sol işaret parmağı ile cildi sabitleyin ve ardından L4 ve S1 arasındaki dikenli sürecin hemen üzerinde 3-4 cm uzunluğunda bir orta hat kesisi yapın.
7. Deri altı dokuları bir makasla künt bir şekilde ayırın. L5 ve L6 arasındaki intervertebral boşluğu tekrar bulun ve L5 ve L6 dorsal işlemlerinin her iki tarafında küçük bir kesi (0,3 - 0,5 cm) yapın.
8. Intervertebral boşluğu genişletmek için L5 dorsal sürecini bir çift dişli forseps ile sıkıştırın ve kaldırın. Ardından, L6 dorsal işleminin üst kısmı tamamen açığa çıkana kadar omur gövdesinin etrafındaki kasları bir makasla kör bir şekilde ayırın.
   NOT: Çevredeki dokulara verilen zararı en aza indirmek amacıyla omur gövdesinin ve kaslarının herhangi bir bölümünün çıkarılmasından kaçınılmalıdır.
9. L5 sırt işlemi bir çift dişli forseps ile kaldırıldığında ve intervertebral boşluk başka bir çift forseps ile genişletildiğinde, ters "V" alanı tamamen açığa çıkana kadar L5-6 intervertebral boşluğu bir pamuk top ile temizleyin.
10. L6 dorsal işleminin hemen altındaki ters "V" bölgesinde 23 G'lik bir iğne ile omurgayı delin.
    NOT: Bir kuyruk hareketi gözlenir ve/veya renksiz şeffaf sıvı subaraknoid boşluktan dışarı akar, bu da subaraknoid boşluğa başarılı bir delinme olduğunu gösterir.
11. Paslanmaz çelik tel içeren PE10 tüpünü, kuyruğa doğru 30° eğilecek şekilde delinme bölgesindeki omurilik kanalına dikkatlice yerleştirin. PE10 tüpü direnç olmadan başarılı bir şekilde yerleştirilene kadar yerleştirme açısını ayarlayın (bu işlem sırasında bir kuyruk hareketi gözlemlendi).
12. PE10 tüpünün işaretli alanı arka kasa ulaştığında kateterizasyon durdurulur.
13. Paslanmaz teli PE10 tüpünden yavaşça çıkarın. Bir kuyruk hareketi gözlemlenebilir.
    NOT: Bir kuyruk hareketi gözlemlenebilir ve tel çıkarıldıktan sonra şeffaf sıvı (veya açık kırmızı sıvı) tüpten dışarı akabilir.
14. Ardından, PE10 tüpünü, içinden 20 μL normal salinin enjekte edildiği 1 mL'lik bir şırıngaya bağlayın. Şırınga çıkarıldıktan sonra, salin PE10 tüpünden sürekli olarak dışarı akacak ve bu da subaraknoid boşluğa başarılı bir şekilde yerleştirildiğini gösterecektir.
15. PE10 tüpünün tıkalı olmadığı onaylandıktan sonra, omur gövdesinin bir tarafındaki kasları 4-0 dikişle dikin ve bir düğüm atın. Daha sonra dikişi PE10 tüpünün etrafına bağlayın ve başka bir düğüm atın. Dikişi kesmeyin; diğer taraftaki kasları dikmek; dikişi tekrar PE10 tüpüne bağlayın, üçüncü bir düğüm yapın ve dikişi kesin.
    NOT: Bu işlem, tüpün yer değiştirme ve geri çekilme olasılığını azaltmak için PE10 tüpünü şekil-8 sütür ile sabitler.
16. Kulaklar arasındaki orta noktanın 1 cm altında 0,5 cm uzunluğunda bir kesi yapın. Deri altı dokuları makasla köreltin ve bel kesisinde uç görünene kadar kuyruğa doğru metal bir gavaj tüpü yerleştirin.
17. PE10 tüpünün distal ucunu, PE10 tüpü gavaj tüpünün diğer ucundan çıkana kadar gavaj tüpüne yerleştirin; Ardından gavajı yavaşça geri çekin.
18. PE10 tüpünün tekrar tıkanmadığı onaylandığında, bel kesisi etrafındaki kalan kasları 4-0 dikişle dikin, dikişi PE10 tüpünün etrafına bağlayın ve PE10 tüpünü tekrar sabitlemek için başka bir düğüm atın.
19. PE10 tüpüne zarar vermekten kaçınarak cildi dikin. Daha sonra boyun derisini 4-0 dikiş ile dikin, dikişi PE10 tüpünün etrafına bağlayın ve PE10 tüpünü sabitlemek için bir düğüm atın.
20. PE10 tüpünün tekrar engelsiz olduğu onaylandığında, PE10 tüpünün ekstrakorporeal ucunu bir sızdırmazlık kapağı ile kapatın.
21. PE10 tüpünü bir doku parçasıyla kurulayın ve ardından sıçan hareketi sırasında PE10 tüpünün geri çekilmesini önlemek için antialerjik bandı PE10 tüpünün etrafına birkaç kez bağlayın.

4. Lidokain doğrulama deneyi

1. Ameliyattan sonra, fareyi kafesine geri koyun (kafes başına bir tane) ve anesteziden iyileşme sırasında sıçan bilincini kazanana kadar yakından izleyin.
2. Sıçan tamamen uyandıktan sonra, sızdırmazlık kapağını çıkarın ve bir Hamilton şırıngası aracılığıyla 0.02 mL / s hızında PE10 tüpüne 20 μL% 2 lidokain enjekte edin, ardından 10 μL normal salin enjeksiyonu yapın.
3. PE10 tüpünü sızdırmazlık kapağıyla kapatın.
4. Fareyi bir masanın üzerine koyun ve dikkatlice gözlemleyin. İntratekal lidokain enjeksiyonundan sonra (PE10 tüpünden) arka ekstremite paralizi varlığı kateterizasyonun başarılı olduğunu gösterir (Şekil 3). Arka bacak felci genellikle yaklaşık 30 dakika sürer¹⁰.
   NOT: Aşağıdaki deneylerden önce farenin 5-7 gün iyileşmesine izin verin.
5. Uzuv fonksiyonunun tamamen iyileşmesine kadar iyileşme süresi boyunca fareyi yakından izleyin.

Sonuçlar

İntratekal enjeksiyon için PE10 tüpünün ekstrakorporeal ucu kesildi ve PE10 tüpü iki ilaç enjeksiyonu arasında bir sızdırmazlık kapağı ile kapatıldı. Pilot çalışmamızda, intratekal kateterizasyonun başarı oranı yaklaşık% 95 idi (20 sıçanın 19'u); Başarı, işlem sırasında bir kuyruk hareketi ve / veya renksiz şeffaf sıvının salınması ile gösterildi. Tüplerin yaklaşık %85'i ameliyattan 7 gün sonra, yaklaşık %80'i ise ameliyattan 28 gün sonra yerinde kalmıştır. Sıçanlar ameliyattan kısa bir süre sonra iyileşti ve ameliyattan sonraki 7 gün içinde herhangi bir komplikasyon gözlenmedi. Günlük hareketler normaldi ve davranışsal anormallik gözlenmedi. Bu sonuçlar, yöntemimizin başarı oranı ve uzun süre kalma oranı açısından daha önce bildirilenlerden daha üstün olduğunu göstermektedir.

Kateterler yoluyla lidokain enjeksiyonu üzerine alt ekstremitelerin tam felci, intratekal kateterizasyonun başarılı olduğunu gösterir¹⁵. İntratekal kateterizasyonun başarı oranı, toplam sıçan sayısının başarılı kateterizasyona sahip sıçan sayısına bölünmesiyle hesaplanır. Modifiye edilmiş yöntemimizde başarı oranı %95 olup, bu oran Hou ve ark. (%88)¹⁵ tarafından bildirilen yöntemle elde edilen orandan daha yüksekti. Bu, Şekil 4'te gösterilmiştir.

İntratekal kateterizasyondan 2, 5 ve 7. günlerde intratekal tüp izlendi ve başarılı kalıcı kateter oranı, başarılı kalıcı katetere sahip sıçan sayısı/toplam sıçan sayısı × %100 olarak hesaplandı. İntratekal kateterizasyondan 2, 5 ve 7 gün sonra, StØrkson ve ^ark.11'in çalışmasında başarılı kalıcı kateter oranı sırasıyla %94, %81 ve %65 idi. Tekniğimiz ile intratekal kateterizasyondan 2, 5 ve 7. günlerde başarılı kalıcı kateter oranı sırasıyla %95, %90 ve %85 idi (Şekil 5).

Şekil 1. İntratekal kateterizasyon için kullanılan malzemeler ve aletler. (A) 15 cm uzunluğunda bir PE10 tüpü hazırlandı ve yerleştirme derinliğini belirtmek için tüp bir ucundan 2 cm olarak işaretlendi. (B) PE10 tüpüne destek olarak iki cilalı ucu olan 20 cm uzunluğunda paslanmaz çelik bir tel yerleştirildi. (C) 22G iğnenin keskin ucu bir makasla kesildi ve distal uç bir çift forseps ile kapatıldı. (D) Bir epidural kateter (dış çapı 1.0 mm) 1 cm'lik parçalar halinde kesildi ve daha sonra keskin uçlu 22G iğneye yerleştirildi. (E) Epidural kateterin distal ucu bir çift ısıtılmış düz forseps ile kapatıldı; Bu aparata tüp sızdırmazlık kapağı adı verildi. (F) Bir makasla 0,3 cm × 0,5 cm antialerjik bant (ipek bant, 1,25 cm × 9,1 m) hazırlandı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 2. İntratekal kateterizasyon için aletlerin hazırlanması. Aletler (dişli forseps, makas, gavaj aparatı, neşter sapı ve # 10 bıçak gibi) yaklaşık 2 saat etanol ile sterilize edildi ve daha sonra ameliyattan yaklaşık 30 dakika önce normal salin ile yıkandı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 3. İntratekal kateterizasyon sonrası lidokain doğrulama deneyinin sonuçları. 20 μL% 2 lidokain intratekal enjeksiyonundan ve ardından 10 μL normal salin enjeksiyonundan sonra, sıçan geçici olarak felç oldu: alt ekstremite felci 30 saniye içinde meydana geldi ve 30 dakika sonra kayboldu, bu da intratekal kateterizasyonun başarılı olduğunu gösteriyor. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 4. Modifiye edilmiş yöntemimiz ile daha önce bildirilen bir yöntem arasındaki başarılı kateterizasyon oranının karşılaştırılması. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 5. Modifiye edilmiş yöntemimiz ile daha önce bildirilen bir yöntem arasındaki uzun süreli kateter oranının karşılaştırılması. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

	Değiştirilmiş yöntem	Önceki yöntem	Modifiye yöntemin avantajları	Önceki yöntemin dezavantajları
Yerleştirme için kılavuz yöntemi	paslanmaz çelik tel	Kılavuz kanül (20G 0.9× 38 mm)	Tüpün elastikiyetini arttırır,	Direncin hissedilmesi zordur, bu da operasyonun zorluğunu arttırır
			İntratekal kateterizasyonun başarı oranını artırır	Tekrarlanan delinme nedeniyle dokularda hasar
			Ameliyat alanı gereksinimini azaltır	Borunun bir ucu orijinal uzunluğun 1,5 katına kadar gerilir, bu da her iki ucun çapını farklı hale getirir
			Bel omurgası çevresindeki dokulara verilen zararı en aza indirir	20G kılavuz kanülün çapı, gerilmiş PE10 tüpünün çapının 2 katı veya daha fazla olması nedeniyle beyin omurilik sıvısı sızıntısına duyarlılık
PE10 tüpünün uzunluğu	15 cm	14 veya 28 cm	Kateterin kalma süresinden bağımsız olarak PE10 tüpünün uzunluğunu belirlemek kolaydır	Daha kısa PE10 tüpü için kateter kalma süresi daha kısadır; uzun PE10 tüpü için vücuttan düşmeye yatkınlık
Fiksasyon yöntemi	"8" dikiş ve 4 kez	1 veya 2 boncuk	Hayvan aktiviteleri sırasında tüp hareketini ve geri çekilmeyi önler	Her iki uçta borunun çapındaki fark ve boncuk yapımı sırasında PE10 tüpünün yer değiştirmesine duyarlılık
Boru sızdırmazlığı için yöntem	Kendi kendine yapılan kapak	Hayır	Beyin omurilik sıvısının sızmasını önler	PE10 tüpünün tekrar tekrar kesilmesi gerekliliği
			PE10 tüpünün tekrar tekrar kesilmesini önler
Retraksiyonun önlenmesi için yöntem	Anti-alerjik bant	1 veya 2 boncuk	Hayvan aktiviteleri sırasında tüpün geri çekilmesini önler	Geri çekilmeye yatkınlık

Tablo 1. Modifiye edilmiş yöntemin ve daha önce bildirilen bir yöntemin avantajları ve dezavantajları.

Tartışmalar

İntratekal kateterizasyonun başarı oranını en üst düzeye çıkarmak için bu modifiye yöntem için birkaç kritik ipucu vardır. İlk olarak, iki cilalı ucu olan 20 cm uzunluğunda paslanmaz çelik bir tel hazırlanmalı ve destek olarak PE10 tüpüne yerleştirilmelidir. İkinci olarak, operatör L5-6 intervertebral boşluğu bir pamuk top ile temizledikten sonra ters "V" alanını tamamen açığa çıkarmalı ve L5 sırt sürecini dişli forseps ile kaldırırken intervertebral boşluk başka bir forseps ile genişletilmelidir. Üçüncüsü, PE10 tüpü şekil-8 sütür ile dört kez sabitlenmelidir. Son olarak, PE10 tüpünün ekstrakorporeal ucu bir bantla bağlanmalı ve kendi kendine yapılan bir kapakla kapatılmalıdır.

İntratekal kateterizasyonun başarı oranı ve vertebral cisimlerin etrafındaki dokulara verilen hasar, deneysel sonuçların güvenilirliğini önemli ölçüde etkileyebilir¹⁵. Bu nedenle, başarı oranını mümkün olduğunca artırmak ve çevre dokulara verilen zararı azaltmak, hayvan modellerinin ve ilgili deneylerin oluşturulmasında çok önemlidir¹. Bu modifiye yöntemde, kılavuzluk için PE10 tüpüne paslanmaz çelik bir tel yerleştirilir, bu da tüpün elastikiyetini arttırır ve intratekal kateterizasyonun başarı oranını artırır. Ayrıca, bu modifiye yöntemle ameliyat için gereken alan miktarı azaltılır ve bel omurgası çevresindeki dokulara verilen hasar en aza indirilir, çünkü çevre dokular künt olarak ayrılır, ancak kesilmez. Buna karşılık, daha önce bildirilen yöntem^11'de, delme sırasında direnci azaltmak için 20 G'lik bir kılavuz kanül kullanılır ve dokulara zarar verebilecek tekrarlanan delme işlemine sıklıkla ihtiyaç duyulur. Ek olarak, daha önce bildirilen yöntemde, PE10 tüpünün çapını küçültmek için, ılık suya (60 °C) daldırılır ve daha sonra bir uçtan orijinal uzunluğun yaklaşık% 150'sine kadar gerilir, bu da tüp çapının tutarlılığını sağlayamayabilir ve bu nedenle beyin omurilik sıvısının sızmasına neden olabilir, çünkü 20G kılavuz kanülünün çapı, gerilmiş PE10 tüpününkinden yaklaşık iki kat daha büyük veya ona eşittir. Ayrıca, yöntemimizde, bel fonksiyonu büyük ölçüde korunur ve bu da cerrahinin sonraki deneylerin sonuçları üzerindeki etkisini önler. Bu sonuçlar Xu ve ark.² tarafından bildirilenlerle tutarlıdır.

Daha önce bildirilen yöntem^11'de, tüp delinme bölgesinin etrafındaki bölgeye sabitlenirse, PE10 tüpünün uzunluğu yaklaşık 14 cm'dir, ancak kateterin kalma süresi bu koşullar altında genellikle 7 günden daha kısadır (veya tüp sıçan tarafından vücuttan çıkarılır). PE10 tüpünün uzunluğu, tüp boynun arkasına sabitlenmişse yaklaşık 28 cm'dir, bu da yöntemimizde kullanılan PE10 tüpünden (15 cm) önemli ölçüde daha uzundur. Størkson ve ^ark.11 tarafından bildirilen protokolü takiben boncuklar oluşturulmuş olsa da, bazı tüpler vücuttan çıkarıldı ve tüplerin sadece yaklaşık% 65'i ameliyattan 7 gün sonra hala yerine sabitlendi, bu da sonraki deneylerin sonuçlarını önemli ölçüde etkiledi. Bizim yöntemimizde PE10 tüpü şekil-8 sütür ile 4 kez fikse edilmekte ve PE10 tüpünün ekstrakorporeal ucu bir bant ile bağlanarak yer değiştirme ve retraksiyon ihtimali azaltılmaktadır. Yöntemimizi takiben, ameliyattan 7 gün sonra tüplerin yaklaşık %85'i yerinde kaldı ve ameliyattan 28 gün sonra tüplerin yaklaşık %80'i yerinde kaldı.

Daha önce bildirilen yöntem^11'de, intratekal kateterin ekstrakorporeal ucu her ilaç uygulaması için kesilmelidir. Bununla birlikte, ilaçların tekrarlanan intratekal uygulaması, kateterin kalma süresini kısaltabilir ve bu da ilaçların intratekal uygulamasını elverişsiz hale getirir. Bu nedenle, yöntemimizde, günde bir kez etanol ile sterilize edilen PE10 tüpünü kapatmak için kendi kendine yapılan bir kapak kullanılır. Bu sadece beyin omurilik sıvısının sızmasını önlemekle kalmaz, aynı zamanda ilaçların intratekal uygulaması için PE10 tüpünün tekrar tekrar kesilmesi ihtiyacını azaltır ve ilaçların etkili bir şekilde verilmesini sağlar.

Modifiye edilmiş yöntemin ve daha önce bildirilen yöntemin avantajları ve dezavantajları Tablo 1'de özetlenmiştir. İlk olarak, modifiye yöntem için, PE10 tüpünde paslanmaz çelik tel kullanılması, tüpün elastikiyetini arttırır ve intratekal kateterizasyonun başarı oranını iyileştirir, operasyon için gereken alan miktarı azalır ve lomber omurga çevresindeki dokulara verilen hasar en aza indirilir. Daha önce bildirilen yöntemde, direnç hissedilene kadar 20G'lik bir kılavuz kanül yerleştirilir ve sıklıkla tekrarlanan ponksiyona ihtiyaç duyulur, bu da dokularda hasara neden olabilir. Ek olarak, bir uçtaki PE10 tüpü, uzunluğu orijinal uzunluğunun yaklaşık% 150'sine ulaşana kadar gerilir, bu da beyin omurilik sıvısı sızıntısına neden olabilir, çünkü 20G kılavuz kanülünün çapı, gerilmiş PE10 tüpününkinden 2 kat daha büyük veya ona eşittir. İkincisi, modifiye yöntemde, PE10 tüpünün uzunluğu ameliyattan önce belirlenir ve kateterin kalma süresi bir haftadan daha uzun olabilir. Daha önce bildirilen yöntemde, PE10 tüpünün uzunluğu, delinme bölgesinde sabitlenirse yaklaşık 14 cm'dir, ancak kateterin kalma süresi genellikle 7 günden kısadır, çünkü tüp sıçan tarafından vücuttan çekilmeye karşı hassastır; PE10 tüpünün uzunluğu, boynun arkasına sabitlendiği takdirde yaklaşık 28 cm'dir, bu da yöntemimizde kullanılan tüpün uzunluğundan önemli ölçüde daha uzundur. Üçüncüsü, modifiye yöntemde, tüp hareketini ve geri çekilmeyi önlemek için PE10 tüpü 4 kez şekil-8 sütür ile sabitlenir; PE10 tüpünü kapatmak için kendi kendine yapılan bir kapak kullanılır, bu sadece beyin omurilik sıvısının sızmasını önlemekle kalmaz, aynı zamanda PE10 tüpünün tekrar tekrar kesilmesi ihtiyacını da önler. Daha önce bildirilen yöntemde, tutarlı bir çapa sahip boncuklar elde etmek zordur, boncuklar oluşturulduğunda PE10 tüpünün yer değiştirmesi yaygındır ve genellikle PE10 tüpünün tekrar tekrar kesilmesi gerekir. Son olarak, modifiye yöntemde, PE10 tüpünün ekstrakorporeal ucu, tüpün hareket sırasında geri çekilmesini önleyen bir bant ile bağlanır. Bununla birlikte, önceki yöntemde, boncuklar PE10 tüpünün geri çekilmesini güvenilir bir şekilde önleyemez, çünkü tutarlı bir çapa sahip boncuklar elde etmek zordur.

Genel olarak, intratekal kateterizasyon için bu modifiye yöntem aşağıdaki avantajlara sahiptir. İlk olarak, PE10 tüpünde paslanmaz çelik tel kullanılması, tüpün elastikiyetini arttırır ve intratekal kateterizasyonun başarı oranını iyileştirir, operasyon için gereken alan miktarı azalır ve lomber omurga çevresindeki dokulara verilen hasar en aza indirilir, bu da lomber fonksiyonu mümkün olan en üst düzeyde korur ve cerrahinin sonraki deneylerin sonuçları üzerindeki etkisini önler. İkinci olarak, PE10 tüpü şekil-8 sütür ile 4 kez sabitlenir, bu da tüp hareketini ve hareket sırasında geri çekilmeyi önler. Üçüncüsü, PE10 tüpünü kapatmak için kendi kendine yapılan bir sızdırmazlık kapağı kullanılır, bu sadece beyin omurilik sıvısı sızıntısını önlemekle kalmaz, aynı zamanda PE10 tüpünün tekrar tekrar kesilmesi ihtiyacını da önler. Kateterin tekrar tekrar kesilmesi kateteri kısaltabilir ve bu da ilaçların verilmesini elverişsiz hale getirir. Son olarak, PE10 tüpünün ekstrakorporeal ucu, tüpün hareket sırasında geri çekilmesini önleyen antialerjik bir bantla bağlanır.

Bununla birlikte, bu modifiye intratekal kateterizasyon tekniğinde bazı sınırlamalar vardır. İlk olarak, ameliyattan sonra, PE10 tüpünün ekstrakorporeal ucuna zarar vermemek için sıçanların ayrı ayrı (kafes başına bir tane) barındırılması gerekir. İkincisi, sonraki deneylerden önce intratekal lidokain enjeksiyonundan sonra 5-7 gün boyunca iyileşme gereklidir.

Sonuç olarak, intratekal kateterizasyon için bu modifiye edilmiş yöntem, ilaçların tekrarlayan intratekal uygulaması için yararlı bir araç olarak hizmet edebilir ve deneylerin süresini kısaltmak için basit, kullanışlı ve güvenilir bir yol olabilir.

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
1 cc syringe		Jiangxi Hongda Medical Equipment Co., Ltd	1 cc
22 gauge × 1” needles		Jiangxi Hongda Medical Equipment Co., Ltd	22G
23 gauge × 1” needles		Jiangxi Hongda Medical Equipment Co., Ltd	23G
25 μL Hamilton Syringes		Shanghai Bolige Co.,Ltd	0.31mm 25 μL
4-O MERSILK NON-ABSORBABLE SUTURE		ETHICON	SA83G
50 mL corning centrifuge tubes 3 cm diameter	430820	CORNING
Epidural catheter and connector		Henan Tuoren Medical Device Co., Ltd	regular type
Gavage apparatus		Shanghai Bolige Co.,Ltd	8#
PE-10 Mirco Medical Tubing	BB31695-PE/1	Scientific Commodities, Inc
Scalpel handle and #10 blades		Jiangsu Songxin Medical Equipment Co., Ltd	125mm
Scissors		Jiangsu Songxin Medical Equipment Co., Ltd	100mm
Sprague-Dawley (SD) rats		Shanghai BK/KY Biotechnology Co., Ltd	Male
Stainless steel wire 0.2 mm diameter		Dongguan Jiazhi Metal Products Technology Co., Ltd.	0.2mm  ×  1m
Toothed forceps		Jiangsu Songxin Medical Equipment Co., Ltd	18cm
URGO silk tape		URGO	1.25cm × 9.1m