Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Temsili Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Burada, iki boyutlu görüntü hareketine verilen görsel tepkilerden kaynaklanan göz hareketlerini doğrudan ölçen yarı otomatik bir nicel analiz yöntemi olan PyOKR'yi açıklıyoruz. Python tabanlı bir kullanıcı arayüzü ve analiz algoritması, önceki yöntemlere göre daha yüksek verim ve göz izleme parametrelerinin daha doğru nicel ölçümlerine olanak tanır.

Özet

Görsel uyaranlara verilen davranışsal tepkilerin incelenmesi, görsel sistem işlevini anlamanın önemli bir bileşenidir. Dikkate değer bir yanıt, retinada görüntü stabilizasyonu için gerekli olan yüksek oranda korunmuş doğuştan gelen bir davranış olan optokinetik reflekstir (OKR). OKR, görüntü izleme yeteneğinin sağlam bir şekilde okunmasını sağlar ve farklı genetik geçmişlere sahip hayvanlarda görsel sistem devrelerini ve işlevini anlamak için kapsamlı bir şekilde incelenmiştir. OKR iki aşamadan oluşur: göz, görsel düzlemin kenarına kadar bir uyaranı takip ederken yavaş bir izleme aşaması ve gözün yörüngedeki konumunu sıfırlayan telafi edici bir hızlı faz sakkad. Önceki izleme kazancı niceleme yöntemleri, güvenilir olmasına rağmen, emek yoğundur ve öznel veya keyfi olarak türetilebilir. Göz izleme yeteneğinin daha hızlı ve tekrarlanabilir bir şekilde ölçülmesini sağlamak için, her türlü video-okülografi ekipmanına uyarlanabilir olmanın yanı sıra, herhangi bir yönlü uyarana yanıt olarak iki boyutlu göz izleme hareketinin nicelleştirilmesine olanak tanıyan yeni bir yarı otomatik analiz programı olan PyOKR'yi geliştirdik. Bu yöntem, otomatik filtreleme, yavaş izleme aşamalarının seçimi, dikey ve yatay göz vektörlerinin modellenmesi, uyaran hızına göre göz hareketi kazanımlarının nicelleştirilmesi ve elde edilen verilerin istatistiksel ve grafiksel karşılaştırmalar için kullanılabilir bir elektronik tablo halinde düzenlenmesini sağlar. PyPI içe aktarma yoluyla kolayca erişilebilen bu nicel ve kolaylaştırılmış analiz hattı, OKR yanıtlarının hızlı ve doğrudan ölçümünü sağlayarak görsel davranışsal yanıtların incelenmesini kolaylaştırır.

Giriş

Görüntü sabitleme, kendi kendine hareket sırasında meydana gelen küresel optik akışı telafi etmek için hassas okülomotor tepkilere dayanır. Bu stabilizasyon esas olarak iki motor tepki tarafından yönlendirilir: optokinetik refleks (OKR) ve vestibülo-oküler refleks (VOR)1,2,3. Retina boyunca yavaş küresel hareket, görüntüyü 1,2 stabilize etmek için karşılık gelen yönde refleksif göz dönüşünü ortaya çıkaran OKR'yi indükler. Yavaş faz olarak bilinen bu hareket, yeni bir yavaş faza izin vermek için gözün hızla ters yönde ....

Protokol

Johns Hopkins Üniversitesi Tıp Fakültesi'nde (JHUSOM) gerçekleştirilen tüm hayvan deneyleri, JHUSOM'daki Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) tarafından onaylandı. Kaliforniya Üniversitesi, San Francisco'da (UCSF) gerçekleştirilen tüm deneyler, UCSF Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Programı tarafından onaylanan protokollere uygun olarak gerçekleştirildi.

1. Davranışsal veri toplama

  1. Dalga verileri (yani, küresel koordinatlarda gözün bakış açısının bir zaman serisi) oluşturmak için tercih edilen video-okülografi yöntemini kullanarak OKR göz hareketlerini kaydedin.
    NOT: JHUSOM'da toplanan temsil....

Temsili Sonuçlar

Yukarıda açıklanan analiz yöntemini doğrulamak için, vahşi tip farelerden ve bilinen bir izleme açığına sahip koşullu nakavt mutantından toplanan dalga izleri üzerindeki OKR izleme kazancını ölçtük. Ek olarak, analiz yöntemimizin daha geniş uygulanabilirliğini test etmek için, farklı bir video-okülografi toplama yöntemi kullanılarak elde edilen ayrı bir vahşi tip fare kohortundan elde edilen izleri analiz ettik. Sakkadların otomatik olarak filtrelenmesi, OKR veri işlemeyi ve analizini kolay.......

Tartışmalar

PyOKR, göz hareketlerine yansıyan görsel tepkileri incelemek için çeşitli avantajlar sağlar. Bunlar, parametrelendirme ve değişken uyaran hızlarını dahil etme yeteneğine ek olarak doğruluk, erişilebilirlik ve veri toplama seçeneklerini içerir.

Doğrudan göz izleme kazancı değerlendirmesi, hızlı fazlı sakkadların (ETM'ler) geleneksel manuel sayımından daha doğrudan bir nicel ölçüm olan göz hareketinin doğru bir karakterizasyonunu sağlar. Yararlı olmasına rağm.......

Açıklamalar

Yazarların herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Teşekkürler

Bu çalışma R01 EY032095 (ALK), VSTP doktora öncesi bursu 5T32 EY7143-27 (JK), F31 EY-033225 (SCH), R01 EY035028 (FAD ve ALK) ve R01 EY-029772 (FAD) tarafından desteklenmiştir.

....

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
C57BL/6J  miceJackson Labs664
Igor ProWaveMetricsRRID: SCR_000325
MATLABMathWorksRRID: SCR_001622
Optokinetic reflex recording chamber - JHUSOMCustom-builtN/AAs described in Al-Khindi et al.(2022)9 and Kodama et al. (2016)13 
Optokinetic reflex recording chamber - UCSFCustom-builtN/AAs described in Harris and Dunn, 201510
PythonPython Software FoundationRRID: SCR_008394
Tbx5 flox/+ miceGift from B. BruneauN/AAs described in Al-Khindi et al.(2022)9 
Tg(Pcdh9-cre)NP276Gsat/MmucdMMRRCMMRRC Stock # 036084-UCD; RRID: MMRRC_036084-UCD

Referanslar

  1. Stahl, J. S. Using eye movements to assess brain function in mice. Vision Res. 44 (28), 3401-3410 (2004).
  2. Kretschmer, F., Tariq, M., Chatila, W., Wu, B., Badea, T. C. Comparison of optomotor and optokinetic reflexes in mice.

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

Optokinetik RefleksOKRG z zlemeG rme SistemiG r nt SabitlemePyOKRYar Otomatik AnalizVideo ok lografiYava zleme A amasH zl Faz SakkadG z Hareketi Kazan m

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Araştırma

Eğitim

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır